中国台湾全自动培养基制备仪
培养基的配制:1、配料:在容器中加入少量水,按照配方称取各种药品,加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。2、溶解:淀粉溶解:少量冷水调成糊状,加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。3、调PH:用1N的盐酸或1N的NaOH把培养基调节到所要求的值。4、过滤:滤纸或棉花进行过滤。5、分装:一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。(1)三角瓶:若作静置培养,则100ml培养基/250ml的三角瓶,较多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15-20ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。(2)试管分装:液体培养基一般装4-5ml,约试管的1/4高度。固体斜面培养基一般装3-4ml,约试管的1/5高度。6、包扎:分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。7、灭菌:按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。液体培养基是培养基物理分类一种,是相对固体培养基而言的,是微生物或动植物细胞的液状培养基。中国台湾全自动培养基制备仪
配制培养基需要哪些制备:(1)称出规定数量的琼脂和蔗糖,加水直到培养基较终容积的34,加热溶解,完全融解后的溶液是透明的。在配制液体培养基(不加琼脂)时无需加热。(2)按需要加入一定量的各种贮存母液,包括生长调节物质和其他特殊附加物。吸取母液要使用专一的移液管。如有必要,培养基中所需的维生素,可在高压灭菌之后通过减压过滤装置或微孔过滤器灭菌后再加入。(3)蒸馏水定容。充分混合后调节培养基的pH,一般以5.66.0为好。(4)培养基分装,分装量一般以占培养容器的1514为宜。之后在24h内完成高压灭菌,也可以高压灭菌后再进行培养基的无菌分装,室温下存放备用。暂时不用的培养基应放置于10摄氏度下保存,而含有生长调节物质的培养基在45摄氏度保存更佳。上海不锈钢内桶培养基制备仪选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。
培养基的配置应该注意的几大步骤:常用玻璃仪器的准备制备培养基所用的吸管、锥形瓶、毛细吸管、平皿等玻璃仪器用前要用肥皂水洗刷后用清水冲洗干净,晾干后备用。(1)平皿用纸或布包好,或装在金属盒内,于121℃高压蒸汽菌3min后烘干,备用。(2)试管管口用棉花塞或硅氟塑料试管塞塞好,再用布或报纸包扎好,121℃高压蒸汽灭菌20℃后烘干,备用。(3)吸管及滴管先用少许棉花塞于吸口端(防止污染物吸出,或橡皮帽内的气体污染),然后用纸包后或装入金属吸管筒内,于121℃高压蒸汽灭菌20min后烘干,备用。其他玻璃器皿均应按上法处理,也应装金属筒内160℃干热灭菌2h后,备用。
培养基灭菌方法有哪五种类型:1、辐射灭菌原理方法:辐射灭菌原理:是用高能电磁辐射和细菌核酸的光化学反应引起细菌死亡。常用的是紫外线,X射线和伽马射线。主要用于室内空气和器皿的表面消毒。2、干热灭菌原理方法:干热灭菌原理:是采用高温氧化微生物,使蛋白质变性并浓缩电解质以杀死微生物。3、化药灭菌原理方法,化药灭菌原理:使用化药与微生物细胞中的成分发生反应,从而使蛋白质变性酶失活。4、过滤灭菌原理方法:过滤灭菌原理:是使用不能渗透的微生物滤膜进行灭菌。使用方法是使用0.01-0.45毫米的细孔滤膜对压缩空气,酶溶液和其他对热不稳定的复合溶液进行灭菌。5、湿热灭菌原理方法:在工业生产中,用于灭菌对于培养基,管道和设备,通常将蒸汽加热到一定温度并保持一段时间,这称为湿热灭菌。湿热灭菌原理:是直接用蒸汽进行灭菌。蒸汽冷凝后会释放出大量潜热。蒸汽具有强大的穿透力,破坏细菌蛋白质和核酸的化学键,使酶失活并杀死由于代谢紊乱引起的微生物。在配制用于观察和定量测定微生物生长状况的合成培养基时,常需在培养基中加入少量螯合剂。
培养基的安全分装:无菌补料:通过分装口可以定量添加无菌添加剂。大尺寸的分装口带有安全锁。通过使用一个瓶子将添加剂添加到分装开口或通过一个septum膜,使用注射器将添加剂加入,确保了添加剂的无菌添加。无菌分装:培养基制备器的分装口可以在分装的时候打开,用于无菌分装培养基。硅胶管是使用分装接头连接到分装口。为了确保培养基的无菌分装,硅胶管和分装接头必须提前在灭菌器中灭菌。培养基可以通过集成的空压机产生的无菌空气压力分装或通过连接到常见的蠕动泵或其他集成成泵的装置,来进行培养基的分装。分装选项:制备和灭菌过的培养基可以通过一个软管进行分装。在每次灭菌进程中,内吸管和分装口也通过进入的蒸汽进行了灭菌。分装软管和连接到该软管的分装接头必须使用合适的蒸汽灭菌工艺预先灭菌,并且必须在无菌条件下连接到分装口。微生物只有在营养物质浓度及其比例合适时才能良好生长。中国香港自动培养基制备仪
半固体培养基,指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。中国台湾全自动培养基制备仪
干粉培养基有哪些注意事项:①熔化培养基制备必须在玻璃容器中进行,如果使用铜或铁器皿,会影响细菌的生长。②注意按照先加水再加颗粒干粉培养基顺序,反之则不利于培养基溶解。③单在必要时进行加热溶解操作,其加热温度也不要过高时间不要过长,主要原因是高温会破坏琼脂和培养基中的一些营养成分。④生产的干粉培养基和颗粒培养基都经过pH校准,使用时无需特殊验证。因为高压会影响pH值,则应在高压后验证pH值。⑤液体培养基通常是预先包装好的,分装时应注意每管的用量不得高于试管的三分之二。⑥高压后冷却至五六十度环境,再导入平板,否则会形成更多的水蒸气,导致细菌分离数量。中国台湾全自动培养基制备仪
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