江西培养基制备器安装调试

马铃薯培养基的制作过程：(1)称量和熬煮：按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。滤液补充水分到1000ml。(2)加热溶解：把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g(提前搞碎)，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。(3)分装：按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。分装量：固体培养基约为试管高度的1/5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。(4)加棉塞：培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等)，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性能。一般液体培养基可用滤纸过滤法，滤纸应拆叠成折扇成漏斗形，以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。江西培养基制备器安装调试

湿热灭菌：湿热灭菌在高压锅或培养基制备器中进行，高压灭菌一般采用121℃±3℃灭菌15min，具体培养基按食品微生物学检验标准中的规定进行灭菌。培养基体积不应超过1000mL，否则灭菌时可能会造成过度加热。所有的操作应按照标准或使用说明的规定进行。灭菌效果的控制是关键问题。加热后采用适当的方式冷却，以防加热过度。这对于大容量和敏感培养基十分重要，例如含有煌绿的培养基。过滤除菌：过滤除菌可在真空或加压的条件下进行。使用孔径为0.2μm的无菌设备和滤膜。消毒过滤设备的各个部分或使用预先消毒的设备。一些滤膜上附着有蛋白质或其他物质（如物品），为了达到有效过滤，应事先将滤膜用无菌水润湿。宁夏培养基制备器售后服务全自动培养基制备分装系统：运行过程顺滑无声;大程度的削减了噪音。

培养基制备器：培养基的种类繁多，但制备的方法大同小异，一般可分为6个步骤：用水、称量、溶解复水、灭菌、pH测定、保存。1、必须选用专门纯净水或者经消毒过后的无菌水。2、培养基进行复水的容器不得用铜锅或铁锅，放置离子混入培养基中，影响微生物的生长。3、容器的体积须大于复水后培养基总体积的2倍，预防出现溢出情况。4、在对培养基进行加热时，若培养基内含有琼脂粉成分，则需要将其充分浸泡一段时间。加热的过程中不断进行搅拌防止出现培养基结底炭化从而造成成分损害。部分培养基则需要使用沸水进行加热，预防发生局部烧焦及沸腾溢出。5、琼脂类培养基进行再融化时应使用沸水浴或流动蒸汽进行加热，较多只能加热两次，第二次再融化后仍未用完的培养基应弃去。6、而当对培养基实施灭菌时，需严格按照说明规范操作。但是也不能盲目按照说明的时间进行，需结合实际情况，合理调节灭菌时间，防止出现培养基灭菌过度而造成的成分变性。

培养基在使用前通过高压或过滤灭菌。防止污染应该注意以下事项：确认工作细胞库是否被污染，确认毒种工作种子批是否被污染，确认所用培养基及其添加成分（如小牛血清、NaHCO3等）是否被污染，均可用细菌、及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中，可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养，48小时即可观察有无污染。其它：高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证，确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证，后者应在每次除菌前、后进行验证工作（至少应在除菌后进行一次）。另外，应将有毒区与无毒区严格分开，并有各自独自的空气净化系统及孵室，有毒区对无毒区应保持相对负压，防止病毒对培养细胞（尤其是细胞库）的污染。培养基制备器具有液量分配，时间分配，复制分配三种工作模式。

血清培养基主要问题：血清含一些对细胞产生毒性的物质，如多胺氧化酶，能与来自高度繁殖细胞的多胺反应（如精胺、亚精胺）形成有细胞毒性作用的聚精胺。补体、抗体、细菌有毒的等都会影响细胞生长，甚至造成细胞死亡。动物个体不同，血清产地、批号不同，每批质量差异甚大，其成分不能保持一致。取材中可能带入支原体、病毒，对细胞产生潜在影响，可能导致实验失败或实验结果不可靠性。大规模生产中，血清来源越来越困难，价格昂贵，是构成动物细胞培养对生产成本的主要部分之一。半固体培养基，指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。辽宁琼脂培养基 培养基制备器

培养基制备器不要过早打开灭菌锅，要等灭菌锅内气体和温度都降到与室温一致或相差不大时再打开灭菌锅。江西培养基制备器安装调试

培养基的分装：培养基的分装，应按使用的目的和要求，分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵，其外还须用防水纸包扎（现试管一般多有用螺旋盖者）。分装时好好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时，分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒，以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中，随该批培养基同时灭菌，以为测定该批培养基好终pH之用。江西培养基制备器安装调试

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