山西培养基制备器安装调试
倒平板:灭菌溶化的培养基冷却到50℃左右后,倒入无菌干燥的培养皿中。培养基的温度不能过高,否则容易在培养皿的内盖上形成太多的冷凝水;温度太低,培养基又容易凝固成块,无法制成平板。倒平板时,应在靠近酒精灯火焰进行,以免外界的杂菌落入平板内,左手拿培养皿,右手拿三角瓶的底部,用左手的小指和手掌部位把三角瓶的棉塞拔下,灼烧瓶口,用大拇指和食指把培养皿盖打开一条缝,至瓶口刚好伸入,倒入培养基,以铺满底为限,不超过培养皿高度的三分之一,迅速盖好盖,放在桌面上,轻轻地转动培养皿,使培养基分布均匀,冷凝后即可。液体培养基在静止的条件下,在菌体或培养细胞的周围,形成透过养分的壁障,养分的摄入受到阻碍。山西培养基制备器安装调试
天然培养基中血清主要作用:对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。这种作用是偶然发现的,则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被较广用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时,粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子,他们在代谢中起重要作用,如SeO3、硒等。福建培养基制备器供应商培养基制备器勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊。
简单制作培养基,需要完成以下几个主要步骤:需要选择培养基配方,同一种培养基,其表达方式往往存在着差异。所以,除了应当严格按照标准方法的规定编制之外,我们一般应尽可能收集有关数据,加以比较和核对,然后根据自己的目的选择和记录数据来源。需记录培养基的制备,培养基的制备记录包括培养基的名称、配方及其来源、pH值、灭菌温度、时间、配制日期、制备人等,并且要复印记录和保存原始记录备查。对副本的记录应该和培养基一起保存,以防出现混乱。需称重培养基的成分,培养基成分要准确称量,并注意防止混淆。每一种成分称量完毕后,都要在分装的一面打上记号,然后将分装的药物一起放在左边。每一个成分称量完之后,都会向右移动。全部称量完毕,应再次检查。
血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理:血清中沉淀物的出现有许多种原因,但好普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成的,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血渭解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物并不影响血清本身的质量。若想去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。何谓热灭活:一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和启动。培养基的制备记录:每次制备培养基均应有记录,包括培养基名称。
加棉塞:分装完毕后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是过滤空气,避免污染。棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作,不要用脱脂棉,以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。制作棉塞时,要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度,揪取手掌心大小一块,铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中,用右手食指插入棉花中部,同时左手食指与姆指稍稍紧握,就会形成1个长棒形的棉塞。棉塞作成后,应迅速塞入管口或瓶口中,棉塞应紧贴内壁不留缝隙,以防空气中微生物沿皱折侵入。棉塞不要过紧过松,塞好后,,以手提棉塞、管、瓶不下落为合适。棉塞的2/3应在管内或瓶内,上端露出少许棉花便于拔取。塞好棉塞的试管和锥形瓶应盖上厚纸用绳捆札,准备灭菌。制备培养基的操作要点:固体培养基在液体培养基中加入适量的凝固剂即成固体培养基。福建培养基制备器供应商
培养基制备器对于采用表面接种形式培养的固体培养基,应先对琼脂表面进行干燥。山西培养基制备器安装调试
⑴倒置的小管充满培养基,不留气泡。⑵在关闭杀菌锅的排气阀之前,将锅内的气体排空。⑶试管塞不要塞得太紧。使用硅胶塞时,请勿使用橡胶塞。⑷不可过早打开杀菌锅,等杀菌锅内的气压和温度降到与室温相同或相差不大时再打开杀菌锅。如果按照以上方法操作还有气泡,可以用水作为培养基组的对照试验。如果培养基组有气泡,对照组没有气泡,可以确定培养基本身原因。为有效体现培养基其生物学特性,其制备生长及繁殖需要特定的PH范围。山西培养基制备器安装调试
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