四川琼脂培养基 培养基制备器

培养基的配制：分装：一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。三角瓶：若作静置培养，则100ml培养基/250ml的三角瓶，很多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶，否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞，造成染菌；若作摇瓶培养，则15～20ml培养基/250ml的三角瓶，保证通气良好。试管分装：液体培养基一般装4～5ml，约试管的1/4高度；固体斜面培养基一般装3～4ml，约试管的1/5高度。包扎：分装好后，塞上棉塞，在用牛皮纸将棉塞包裹好，防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。灭菌：按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高，营养成分会被破坏，培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。摆斜面：灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放，使其凝固成为一个斜面，约占试管长度的1/2。贮存：培养基在30℃下放置，无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。全自动培养基制备仪主要特点：不会产生气泡。四川琼脂培养基 培养基制备器

马铃薯培养基的制作过程：(1)称量和熬煮：按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。滤液补充水分到1000ml。(2)加热溶解：把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g(提前搞碎)，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。(3)分装：按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。分装量：固体培养基约为试管高度的1/5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。(4)加棉塞：培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等)，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性能。触摸屏培养基制备器售后全自动培养基制备分装系统：铝制表面光滑平坦;易于清洁，无孔隙和裂缝，以防培养基流进去。

培养基是生物制品领域中常用的物质，在细菌和细胞培养中十分必要，但是现有技术中有些培养基的某种组份容易分解，造成保存时间短等问题，导致培养基的使用成本十分高。其中，在动物培养基中，谷氨酰胺是一种必要的组份，但是在常温下，很短的时间内，约7-10日中培养基中的谷氨酰胺成份就可降解90％以上，这给其商品化带来很大的困难。这样的培养基在现有技术中很多，都具有上述的缺陷，例如，中国CN1087778C公开了一种杂交瘤细胞的无血清培养基，其中包含有谷氨酰胺成份，但是这种培养基的保存时间十分有限，很难达到商业使用的目的。

微生物培养基制备：溶解灭菌后，盘子上无不溶性结晶紫、无紫色斑；与未溶解和消毒的盘子相比，盘子上有结晶紫和紫色斑点。因此正确的步骤顺序是在高压灭菌前需要进行培养基煮沸溶解。先煮沸溶解后冷却至二十五度，确定pH值；对需要高压灭菌的介质取平均值，高压灭菌后冷却至二十五度，这两种状况测量培养基pH值，固体培养基至少检测两个点，取它们的平均值。控制培养基在容器中不要超过百分之八十，避免填充过多。注意控制高压灭菌时间过长（115-116度）二十分钟即可，温度不超过121度，而且灭菌后的培养基在高温环境中不要长时间存放。制备培养基的操作要点：半固体培养基如果把少量的凝固剂加入到液体培养基中，就制成了半固体培养基。

培养基配制：配制用水，培养基的大部分是水，所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准，水的电阻应为200万欧姆，一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。培养基：培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）调pH至7.2-7.4，若pH值超过7.6或远低于6.8，则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌，使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。血清：培养中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高压灭菌，无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体，置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定，一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制，可选用无血清培养基。全自动培养基制备分装系统：一体化控制;主机和选配件（附加剂泵）可通过Mediafill触摸屏一起控制。天津进口培养基制备器

培养基的制备记录：每次制备培养基均应有记录，包括培养基名称。四川琼脂培养基 培养基制备器

培养基的安全分装：无菌补料：通过分装口可以定量添加无菌添加剂。大尺寸的分装口带有安全锁。通过使用一个瓶子将添加剂添加到分装开口或通过一个septum膜，使用注射器将添加剂加入，确保了添加剂的无菌添加。无菌分装：培养基制备器的分装口可以在分装的时候打开，用于无菌分装培养基。硅胶管是使用分装接头连接到分装口。为了确保培养基的无菌分装，硅胶管和分装接头必须提前在灭菌器中灭菌。培养基可以通过集成的空压机产生的无菌空气压力分装或通过连接到常见的蠕动泵或其他集成成泵的装置，来进行培养基的分装。分装选项：制备和灭菌过的培养基可以通过一个软管进行分装。在每次灭菌进程中，内吸管和分装口也通过进入的蒸汽进行了灭菌。分装软管和连接到该软管的分装接头必须使用合适的蒸汽灭菌工艺预先灭菌，并且必须在无菌条件下连接到分装口。四川琼脂培养基 培养基制备器

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