江西琼脂培养基制备器

微生物培养基制备：溶解灭菌后，盘子上无不溶性结晶紫、无紫色斑；与未溶解和消毒的盘子相比，盘子上有结晶紫和紫色斑点。因此正确的步骤顺序是在高压灭菌前需要进行培养基煮沸溶解。先煮沸溶解后冷却至二十五度，确定pH值；对需要高压灭菌的介质取平均值，高压灭菌后冷却至二十五度，这两种状况测量培养基pH值，固体培养基至少检测两个点，取它们的平均值。控制培养基在容器中不要超过百分之八十，避免填充过多。注意控制高压灭菌时间过长（115-116度）二十分钟即可，温度不超过121度，而且灭菌后的培养基在高温环境中不要长时间存放。一般液体培养基可用滤纸过滤法，滤纸应拆叠成折扇成漏斗形。江西琼脂培养基制备器

培养基在使用前通过高压或过滤灭菌。防止污染应该注意以下事项：确认工作细胞库是否被污染，确认毒种工作种子批是否被污染，确认所用培养基及其添加成分（如小牛血清、NaHCO3等）是否被污染，均可用细菌、及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中，可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养，48小时即可观察有无污染。其它：高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证，确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证，后者应在每次除菌前、后进行验证工作（至少应在除菌后进行一次）。另外，应将有毒区与无毒区严格分开，并有各自独自的空气净化系统及孵室，有毒区对无毒区应保持相对负压，防止病毒对培养细胞（尤其是细胞库）的污染。四川培养基制备器售后服务培养基制备器完全称取完毕后，还应进行一次检查。

培养基配置原则：控制pH条件，当培养基中酸性物质积累导致H+浓度增加时，H+与弱碱性盐结合形成弱酸性化合物，培养基pH不会过度降低；如果培养基中OH-浓度增加，OH-则与弱酸性盐结合形成弱碱性化合物，培养基pH也不会过度升高。但KH2PO4和K2HPO4缓冲系统只能在一定的pH范围内（6.4-7.2）起调节作用。有些微生物，如乳酸菌能大量产酸，上述缓冲系统就难以起到缓冲作用，此时可在培养基中添加难溶的碳酸盐（如CaCO3）来进行调节，CaCO3难溶于水，不会使培养基pH过度升高，但它可以不断中和微生物产生的酸，同时释放出CO2，将培养基pH控制在一定范围内。在培养基中还存在一些天然的缓冲系统，如氨基酸、肽、蛋白质都属于两性电解质，也可起到缓冲剂的作用。

微生物检验培养基制备的要点：培养基摆斜面，灭菌完成后，将试管中的中海琼脂培养基放在木棒或玻璃棒上，同时它很热，并且有适当的坡度。冷却后使琼脂凝固并变成斜面。斜面长度不超过试管的二分之一。微生物培养基质检，检验培养基灭菌后，发现有破损，浸水，颜色异常，棉塞被培养基污染。所有这些都必须丢弃，不能重复使用，并确定其很终pH值。无菌检查和效果检查也是必需的。无菌检查是取1~2瓶无菌培养基，37℃孵育一两天，确认无细菌生长；效果检查是将标准菌株接种到相关培养基上进行细菌检查。动物的生长、形态和生化条件与已知条件一致。两个条件都合格，准备好的培养基就可以使用了。培养基制备器必须附有该批培养基制备记录副页或明显标签。

在制备培养基时，通常要考虑以下因素：(1)pH值多数细胞系在pH=7.4下生长得很好。尽管各细胞株之间细胞生长*pH值变化很小，但一些正常的成纤维细胞系以pH=7.4～7.7，转化细胞以pH=7.0～7.4更合适。据报道，上皮细胞以pH=5.5合适。为确定*佳pH值，做一个简单的生长实验或特殊功能分析酚红常用作指示剂，pH=7.4呈红色，pH=7.0变橙色，pH=6.5变黄色，而pH=7.6呈红色中略带蓝色，pH=7.8呈紫色。由于对颜色的观察有很大的主观性，因而必须用无菌平衡盐溶液和同样浓度的酚红配一套标准样，放在与制备培养基相同的瓶子中。(2)缓冲能力碳算盐缓冲系统由于毒性小、成本低、对培养物有营养作用，因此比其他缓冲系统用得多。在pH值条件下的缓冲能力差。(3)渗透压多数培养细胞对渗透压有很宽的耐受范围，一般常用冰点降低或蒸汽压升高测定。如果自己配培养基，可通过测定渗透压防止称量和稀释等造成的误差。全自动培养基制备仪主要特点：无需排干空气。四川培养基制备器售后服务

为防止冷凝水过多，也可将培养基冷却至45 ~ 50°C再倒平板。江西琼脂培养基制备器

培养基制备基本方法：培养基各成份的混合和溶化，培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。很好使用不锈钢锅加热溶化，也可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动，以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。待大部分固体成分溶化后，再用较小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如为琼脂培养基，应先用一部分水将琼脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中，因蒸发而丢失的水分，必须加以补足。江西琼脂培养基制备器