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什么是细胞培养:细胞培养是指从动物或植物中提取细胞,然后在人工环境中进行培养以进行科学研究。较早的细胞培养技术是在100多年前开发的,为科学的巨大突破做出了贡献。如今,它已成为全世界实验室用于研究细胞的生理学、生物化学、疾病潜在机制以及药物和有毒化合物的作用的基本工具。它也可用于在药物筛选和大规模制造生物化合物,诸如疫苗和治病性蛋白质。贮存:培养基在30℃下放置1天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。制备培养基的操作要点:液体培养基所配制的培养基是液态的。福建培养基制备器品牌
制备培养基有什么要求:1、培养基需保持澄清,便于观察细菌的生长情况,培养基加热煮沸后,可用脱脂棉花或绒布过滤,以除去沉淀物,必要时可用鸡蛋白澄清处理,所用琼脂条要预先洗净晾干后使用,避免因琼脂含杂质而影响透明度。2、盛装培养基不宜用铁、铜等容器,使用洗净的中性硬质玻璃容器为好。3、培养基的灭菌既要达到完全灭菌目的,又要注意不因加热而降低其营养价值,121℃15min即可,如为含有不耐高热物质的培养基如糖类、血清、明胶等,则应采用低温灭菌或间歇法灭菌,一些不能加热的试剂如亚碲酸钾、卵黄、TTC、克菌素等,待基础琼脂高压灭菌后凉至50℃左右再加入。北京自动搅拌培养基制备器全自动培养基制备仪主要特点:无需排干空气。
分接触和利用培养基中的养料,适于作生理等研究,由于发酵率高,操作、方便,也常用于发酵工业。(3)半固体培养基。是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。固体培养基的制作步骤:1、首先我们要准备好一个装有1000ml的烧杯,然后在准备好的杯中在放入500ml的蒸馏水,在将牛肉膏和蛋白胨、氯化钠这些都溶解在水中。2、其次我们在调节PH值,调节时需要百分之10的氢氧化钠溶液,将PH值调到7.2,在此也要定容到1000ml,较后在将这些液体都分别放入10个锥形瓶内,每一瓶都装100ml。
培养基配制:素:为防止培养时期细菌的污染,可在培养基中添加适当素,一般用量与组织细胞培养相同:卡那霉素100单位/毫升,或双抗--青霉素100单位/毫升,链霉素100微克/毫升。植物血凝素(PHA):非增殖期的细胞不能制备染色体,如人外周血淋巴细胞,但在离体培养过程中,在PHA的作用下,可被刺激转化为淋巴母细胞而进入有丝分裂。经实验测定其分裂高峰分别于培养后44-48小时和68-72小时。PHA有粘多糖,蛋白质两种重要成分。粘多糖促使有丝分裂,蛋白质起凝集作用。PHA的细胞数随其浓度而增加,直至全部免疫活性细胞均被为止,但PHA浓度过高会引起凝集,一般采用4%浓度为好。液体培养基,固体培养基的对应词,是微生物或动植物细胞的液状培养基。
培养基的实验室制备:1.过滤灭菌:过滤灭菌可以在真空负压或正压条件下进行。使用无菌设备和0.2um孔径的滤膜。将过滤装置的各个部分消毒灭菌,或使用预消毒设备。一些滤膜上附着蛋白质或其他物质()。为达到有效过滤,应事先将滤膜用无菌水润湿。2.监测:应对经湿热或过滤灭菌的培养基进行监测,尤其要对pH、色泽、灭菌效果和均匀度等指标进行监测。添加剂的制备:制备含有有毒物质(生素)时应小心操作,避免因粉末的扩散造成实验人员过敏或发生其他不良反应。采用适当的预防措施并小心按照产品使用说明操作。培养基由于富含营养物质,易被污染或变质。辽宁Systec培养基制备器
配制培养基的原则:根据培养目的需要选择适宜的营养物质。福建培养基制备器品牌
培养基的分装:培养基的分装,应按使用的目的和要求,分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵,其外还须用防水纸包扎(现试管一般多有用螺旋盖者)。分装时好好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时,分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒,以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中,随该批培养基同时灭菌,以为测定该批培养基好终pH之用。福建培养基制备器品牌
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