**泛解酸内酯高质量的选择

时间:2020年06月30日 来源:

 国外D-泛酸钙、D-泛醇生产公司主要有日本***制药精细化学品公司、德国BASF公司、荷兰DSM公司等。国外BASF、DSM均采用化学法生产,而日本***制药采用生物法酶拆分工艺制备中间体D-泛解酸内酯,这也是目前**技术的工艺。

D-泛酸、D-泛醇是一种重要的维生素***、食品添加剂和饲料添加剂,用途广、市场需求量很大。世界上主要的泛酸生产厂家有Roche、BASF和日本***制药。传统的生产方法是化学拆分法或钙盐诱导结晶法。化学拆分的缺点是拆分剂太贵,分离困难,步骤多,成本高,还0性和环境污染问题。钙盐诱导结晶法步骤多,收率低,投资大,扩大生产规模比较困难。另外,诱导结晶法不能用于D-泛醇等泛酸衍生物生产。


D-泛解酸内酯的传统工业方法是化学拆分法和生物拆分法。**泛解酸内酯高质量的选择

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微生物选择性的不对称水解DL-泛解酸内酯中的D-泛解酸内酯,得到D-泛解酸,再将D-泛解酸进行内酯化生产D-泛解酸内酯。该方法工艺控制简单,微生物酶专一性好,可以得到高光学纯度的D-泛解酸内酯。




利用D-泛解酸内酯水解酶N末端序列,并根据NCBI中公布的D-泛解酸内酯水解酶cDNA序列设计了一个特异引物,该引物结合Oligo(dT)15,以串珠镰孢霉(Fusarium moniliforme)CGMCC 0536 mRNA反转录得到的总cDNA为模板进行扩增,获得约1.5kb左右的片段,将其克隆到T载体上进行测序,对测得的序列进行分析,重新设计了一对引物,并在引物两端分别加上限制酶EcoRI和SalI的识别位点序列,利用热启动PCR成功地扩增出了D-泛解酸内酯水解酶基因, 品质泛解酸内酯销售电话泛解酸内酯加工后生成 D-泛解酸内酯(左酯)。

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将D-泛解酸内酯水解酶cDNA结构基因分别插入到大肠杆菌胞内表达载体pTrc99a和分泌表达载体pET20b中,构建重组质粒pTrc99a-LAC和pET20b-LAC.将重组载体pTrc99a-LAC转化大肠杆菌JM109.重组菌在IPTG诱导下表达出有活性的重组酶,经SDS-PAGE检测,重组大肠杆菌有分子量约为40 kD的蛋白表达带,重组酶活力平均为39 U/克湿细胞.将分泌重组载体pET20b-LAC转化大肠杆菌BLR(DE3)pLysS,利用IPTG对重组菌进行诱导,D-泛解酸内酯水解酶被分泌表达至大肠杆菌的周质空间,信号肽被正确识别切下后,获得活性的D-泛解酸内酯。D-泛解酸内酯

泛解酸内酯对环境可能有危害,对水体应给予特别注意。

泛解酸内酯是混旋泛酸钙的中间体。

泛解酸内酯沸点(ºC,1.01kpa):120-122(2kpa)

泛解酸内酯相对密度(d204)   :1.65。

泛解酸内酯闪点(ºC):120~122。

泛解酸内酯熔点(℃):91。

D-(-)-Pantolactone

D-(-)-泛酰内酯

食品安全国家标准:食品营养强化剂 D-泛酸钙适用于以β-氨基丙酸钙和D-泛解酸内酯经酰化反应而得的营养强化剂D-泛酸钙。



D-泛酸钙具有补充人体内维生素B需求和增强食品风味两方面功效。

食品加工领域将D-泛酸钙用于制作各种营养保健品。

泛酸钙具有缓冲***苦味的作用。 钙在食品中用作营养增补剂,通常其钙盐与其他 B 族维生素一起用于补充营养。

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一种高纯度的D‑泛酸内酯的合成方法包括步骤:将DL‑泛酸内酯加入到水中,在pH为6.0‑8.0用酶水解,得到D‑泛解酸以及L‑泛酸内酯;将上述水溶液经有机溶剂萃取,得到D‑泛解酸的水溶液以及L‑泛酸内酯有机溶液;将D‑泛解酸的水溶液,控温20‑80℃反应,用酸调节pH至1‑4,然后关环得到D‑泛酸内酯水溶液;将步骤S3所得的D‑泛酸内酯水溶液经有机溶剂萃取,然后经浓缩,蒸馏,结晶得到D‑泛酸内酯;将步骤S2所得的L‑泛酸内酯溶液经浓缩、然后在碱性条件下消旋得到DL‑泛酸内酯。本发明为泛酸钙制备得到D‑泛酸内酯,工艺路线操作简单,反应条件温和,安全,环保,原料价廉易得,工业适应性强。中文别名:D-泛酰内酯。高含量泛解酸内酯合成

D-泛酸存在于植物以及低等生物的代谢过程中,被称为遍多酸或本多酸,是水溶性维生素B族的一种。**泛解酸内酯高质量的选择

D-泛解酸内酯水解酶基因,基因片段长度为1146bp,该序列同来源于尖镰孢霉菌(F.oxysporum)AKU 3702菌株的编码D-泛解酸内酯水解酶cDNA结构基因的同源性为90.06%.将所得片段定向克隆到pTrc99a载体中,转化至JM109感受态细胞,筛选出了阳性克隆.经IPTG诱导阳性菌,进行SDS-PAGE电泳,检测出在约40kD处有一蛋白表达带.对两株重组基因工程菌的比活力进行测定,结果分别为37U和41U.


串珠镰孢霉菌(Fusarium moniliforme)CGMCC 0536的D-泛解酸内酯水解酶具有高度的立体选择性,可立体专一性拆分DL-泛解酸内酯,生成D-泛解酸. **泛解酸内酯高质量的选择

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