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1997年，李继周等通过mRNA-cDNA反转录的方法合成了蜂毒肽基因，用λgt11建立了蜂毒肽的cDNA文库，并用抗体探针筛选出能够表达蜂毒溶血肽的阳性克隆。 Benachir等利用钙黄绿素作为荧光标记物，系统研究了蜂毒肽诱导的膜渗漏。认为蜂毒肽与囊泡的结合会非常迅速，而且在蜂毒肽作用下，有的囊泡的内容物全部释放，而有的则保持完整。内容物释放的比例与蜂毒肽/脂质的摩尔比率有关。更为特别的是蜂毒肽可以区别出完整的和已经有物质渗出的囊泡，而且表明卵磷脂双分子层表面负电荷的存在对蜂毒肽的裂解能力有***作用，并且与负电荷的密度成一定比例。国 内采用新工艺将蜂毒中致痛物质去除，制成蜂毒注射液。蜂毒批发厂

蜂毒肽制备方法

目前获取蜂毒肽的方法有3种，化学合成、从粗蜂毒中分离纯化和生物工程法。利用化学合成的方法可以获得具有生物活性的蜂毒肽纯品，但其成本太高，并不适合蜂毒肽的生产，实际应用较少。目前，获取蜂毒肽纯品的主要途径是从粗蜂毒中分离纯化。分离纯化方法以色谱理论为基础，随着色谱技术的发展以及与其他提取工艺的结合，操作成本逐渐降低，产量和纯度有所提高。利用生物工程技术可以诱导蜂毒肽基因在工程菌中表达，然后收集纯化表达蛋白，从而得到蜂毒肽纯品。由于蜂毒肽有破坏细胞膜以及致死细胞毒性，其在工程菌中的直接表达无法实现。面对这个问题，科学家们找到了在工程菌中表达蜂毒肽融合蛋白的方法，并在融合蛋白的选择及后期分离纯化上进行了大量研究，取得较大进展。 药厂收购蜂毒厂家现货蜂毒肽破坏肥大细胞和亚细胞结构时产生的组胺还能降低血管的外周阻力。

蜂毒中的磷脂酶A皇约占全毒于重的8％～l2％，由128个氨基酸组成 磷脂酶 活性较高，水解磷脂的脂肪链，使卵磷脂成为溶血卵磷脂起间接溶血作用．是间接溶血毒：

 蜂毒的药理研究

对神经系统的作用蜂毒是向神经性的，在大脑网状组织}具有阻滞作用和溶胆碱活性，并能改变皮层的生物电活性、尤其是蜂毒肽对N一胆碱受体有选择性阻滞作用，可使***系统突触内兴奋传导阻滞。

 ***作用蜂毒肽能***20～30种革兰阳性和阴***原微生物的生长繁殖，并能对抗对青霉素耐药的金黄色葡萄球菌，还能增强磺胺类和青霉素类***的***敛力一

1999年，Kubo等通过5种细胞毒的测定方法对蜂毒肽与嗜酸性粒细胞的主要碱性蛋白进行比较，结果证实蜂毒肽能插入K562细胞的胞膜中进而形成孔道，引起Ca内流，使胞内Ca浓度升高，细胞裂解。1小时内，蜂毒肽对实验的白血病细胞均具杀伤效果。Shamsher等研究发现蜂毒肽可***磷酸脂酶D进而裂解人单核白血病细胞(U937)。

2000年，王关林等从蜜蜂毒腺中提取总RNA，通过RT-PCR方法扩增得到了蜂毒肽前体蛋白的cDNA，再进一步通过定点诱变在蜂毒肽序列前引入了经胺裂解位点，构建了与β-半乳糖苷酶部分序列相融合的蜂毒肽诱变蛋白表达载体，序列分析结果表明，他们成功地引入了目的密码子，且与β-半乳糖苷酶部分序列构成正确的读码框，并在大肠杆菌中表达了诱变蛋白。 ，还有透明质酸酶、蜂毒磷脂酶 及组胺等多种活性物 质，故有肽类“宝库”之称。

蜂毒是蜜蜂科昆虫中华蜜蜂、意大利蜜蜂等工蜂尾部毒性分泌的毒液，同时也是蜜蜂自卫的“化学武器”，当蜂群受到威胁时蜜蜂便会群起而攻之，在生产中养蜂人常用电刺激的方法获取蜂毒，简单来说就是用直流电刺激蜜蜂进行蛰刺排毒，然后再将蜜蜂排除的毒液收集起来便可得到较为纯净的蜂毒。

二、参考价格

蜂毒的价格极为昂贵(在所有蜂产品中都是**贵的)，蜂毒干粉大约在300～400元1克，而精制蜂毒的价格基本上在1200元以上1克，为什么蜂毒这么贵呢？主要原因是蜂毒的提取极为不易且蜜蜂的排毒量非常低(1只工蜂排毒量大约为0.15～0.3毫克左右，也就是说大约需要7000只蜜蜂才能生产出1克蜂毒)。

去除大分子物质和胺类等物质后的得到的精制蜂毒。本地蜂毒成交价

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***镇痛作用蜂毒中的单体多肽是***的主要成分，它具有类***样的作用，但无***的不良反应t 。蜂毒肽对前列腺素合成酶的***作用是吲哚美辛的7Il倍，故有

较好的镇痛***作用l|J。镇痛强度为***的40％．是安替比林的68倍、镇痛作用的持续时间亦较长，但无水扬酸类对消化道的刺激和甾体类的免疫***作用

对内分秘系统的作用 蜂毒对垂体肾上腺皮质系统有明显的兴奋作用，能使肾上腺皮质***和促肾上腺皮质***ACTH释放增加，起到抗风湿、类风湿荚节炎作用。

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