品质泛解酸内酯Pantolactone

时间:2020年07月22日 来源:

将D-泛解酸内酯水解酶cDNA结构基因分别插入到大肠杆菌胞内表达载体pTrc99a和分泌表达载体pET20b中,构建重组质粒pTrc99a-LAC和pET20b-LAC.将重组载体pTrc99a-LAC转化大肠杆菌JM109.重组菌在IPTG诱导下表达出有活性的重组酶,经SDS-PAGE检测,重组大肠杆菌有分子量约为40 kD的蛋白表达带,重组酶活力平均为39 U/克湿细胞.将分泌重组载体pET20b-LAC转化大肠杆菌BLR(DE3)pLysS,利用IPTG对重组菌进行诱导,D-泛解酸内酯水解酶被分泌表达至大肠杆菌的周质空间,信号肽被正确识别切下后,获得活性的D-泛解酸内酯。D-泛解酸内酯DL-泛解酸内酯再在串珠镰孢霉菌的作用下生成D-泛解酸,经内酯化获得D-泛解酸内酯。品质泛解酸内酯Pantolactone

品质泛解酸内酯Pantolactone,泛解酸内酯

水解酶催化选择性拆分制备D-泛解酸内酯DL-泛解酸内酯可经手性拆分得到所需要的D-泛解酸内酯。化学法拆分所需的化学拆分剂或结晶操作一般较为昂贵, 而利用水解酶催化的动力学拆分, 具有节能环保、产品光学纯度高等优点,更适用于工业生产。水解酶选择性水解泛解酸内酯,根据选择性可分为L-泛解酸内酯水解酶和D-泛解酸内酯水解酶。DL-泛解酸内酯经L-泛解酸内酯水解酶水解,留下D-泛解酸内酯,产生的L-泛解酸再经化学内酯、外消旋转为DL-泛解酸内酯。已知的L-泛解酸内酯水解酶,大多来源于细菌,如多形无色杆菌、苏云金芽孢杆菌、放射性土壤杆菌、根*农杆菌。高纯度泛解酸内酯产品的辨别方法泛酸钙大量用于饲料工业。

品质泛解酸内酯Pantolactone,泛解酸内酯

D-泛解酸内酯水解酶基因,基因片段长度为1146bp,该序列同来源于尖镰孢霉菌(F.oxysporum)AKU 3702菌株的编码D-泛解酸内酯水解酶cDNA结构基因的同源性为90.06%.将所得片段定向克隆到pTrc99a载体中,转化至JM109感受态细胞,筛选出了阳性克隆.经IPTG诱导阳性菌,进行SDS-PAGE电泳,检测出在约40kD处有一蛋白表达带.对两株重组基因工程菌的比活力进行测定,结果分别为37U和41U.


串珠镰孢霉菌(Fusarium moniliforme)CGMCC 0536的D-泛解酸内酯水解酶具有高度的立体选择性,可立体专一性拆分DL-泛解酸内酯,生成D-泛解酸.

泛酸钙大量用于饲料工业。

泛酸钙作为维生素饲料添加剂,畜禽养殖中具有重要的作用。

泛解酸内酯加工后生成 D-泛解酸内酯(左酯)。

氢氰酸作为泛酸系列的关键中间体D-泛解酸内酯的重要原料。

D-泛酸存在于植物以及低等生物的代谢过程中,被称为遍多酸或本多酸,是水溶性维生素B族的一种。

微生物酶法拆分泛酸钙合成中间体泛解酸内酯的方法。


用微生物酶将 D, L-泛解酸内酯拆分得到 D-泛解酸内酯,与 B再一丙氨酸钙缩合生产 D-泛酸钙。


将缬氨酸在过氧化氢酶和α‑酮异戊酸还原酶的作用下,进行酶转化得到α‑酮异戊酸。

D-泛酸钙世界市场年消费量约30000吨。
品质泛解酸内酯Pantolactone,泛解酸内酯

D-泛解酸内酯是一种重要的原料药中间体,主要用于D-泛酸钙(D-(+)-N-(2,4-二羟基-3,3-二甲基丁酰)-β-氨基丙酸钙)和D-泛醇的合成。现有技术中有的采用异丁醛、甲醛和**为原料经过化学合成获得DL-泛解酸内酯,DL-泛解酸内酯再在串珠镰孢霉菌的作用下生成D-泛解酸,经内酯化获得D-泛解酸内酯,但是本方法采用了毒性较高的**,在实际生产操作中安全风险大,且废水不易处理,采用DL-泛解酸内酯制备D-泛解酸内酯过程繁琐,效率低下。将所述α‑酮异戊酸与四氢叶酸在羟甲基转移酶和氯化镁的作用下,反应制备酮泛解酸。***泛解酸内酯高质量的选择

D-泛解酸内酯的市场供应商现状。品质泛解酸内酯Pantolactone

该酶已经成功的应用于工业化,取得了很好的综合效益.为了提高D-泛解酸内酯水解酶的酶活力及在低pH条件下的稳定性,我们在基因水平上对酶进行了研究. 利用RT-PCR方法,扩增得到了编码源于串珠镰孢霉菌(Fusarium moniliforme)CGMCC

0536的D-泛解酸内酯水解酶cDNA,对其结构进行分析,根据分析结果设计了一对特异引物,成功扩增到了编码D-泛解酸内酯水解酶cDNA的结构基因,结构基因同pMD18-T载体连接后,进行测序.D-泛解酸内酯水解酶cDNA结构基因序列已在Genebank数据库申请登记,登记号为AY728018. 品质泛解酸内酯Pantolactone

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