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时间:2020年07月28日 来源:上海临辰医药科技有限公司

醇脱氢酶参与的化学酶法合成D-泛解酸内酯与D- 泛解酸内酯的工业合成类似, 从缩醛反应出发再经醇脱氢酶还原, *经过三步就合成了D- 泛解酸内酯。这种醇脱氢酶参与的化学酶法合成过程由德国比勒费尔德大学HEIDLINDEMANN M 等在2015 年设计以异丁醛和乙醛酸乙酯为起始原料, 以L-组氨酸作为有机催化剂在酸性条件下发生醛醛缩合反应,得到(R)-中间体1。醇脱氢酶以异丙醇为辅底物实现辅酶循环,将中间体1 还原成中间体2,中间体2 无需分离直接自发环化成D-泛解酸内酯。反应中D-泛解酸内酯的总得率达55%,产物e.e.值达到95%。DL-泛解酸内酯再在串珠镰孢霉菌的作用下生成D-泛解酸,经内酯化获得D-泛解酸内酯。哪里有泛解酸内酯型号

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化学酶法合成D-泛解酸内酯

泛酸具有一个手性中心,其中D-泛酸是工业生产所需要的。化学法合成D-泛酸(或泛酸钙)工艺成熟,但步骤繁琐且对消旋化产物进行结晶拆分费用昂贵。利用生物酶法生产光学纯的D-泛酸可进一步升级合成工艺,提升产品的竞争力。生物酶法主要包括利用生物菌体发酵生产和酶法催化。生物菌体发酵法利用基因工程技术在大肠杆菌、谷氨酸棒状杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母等宿主菌中表达泛酸生物合成基因和氨基酸生物合成基因,并利用基因工程菌进行微生物发酵,泛酸产量较高,但微生物发酵法发酵液成分复杂,后续的产物分离提取较困难。酶法催化可以替代化学反应过程中的某些步骤, 以化学酶法的方式来实现D-泛酸的前体物质D-泛酸内酯的生产。目前国内外酶法催化生产D-泛解酸内酯的方法主要包括酶法选择性拆分和酶法不对称合成。关于酶法不对称合成,笔者主要综述了三种路线:1) 前手性物质酮泛解酸或酮泛解酸内酯不对称还原成D-泛解酸内酯;2) 利用(R)-羟基腈裂合酶来合成泛解酸内酯前体羟基特戊醛;3) 醇脱氢酶参与的化学酶法合成D-泛解酸内酯。


泛解酸内酯型号将缬氨酸在过氧化氢酶和α‑酮异戊酸还原酶的作用下,进行酶转化得到α‑酮异戊酸。

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D-泛解酸内酯是一种重要的原料药中间体,主要用于D-泛酸钙(D-(+)-N-(2,4-二羟基-3,3-二甲基丁酰)-β-氨基丙酸钙)和D-泛醇的合成。现有技术中有的采用异丁醛、甲醛和**为原料经过化学合成获得DL-泛解酸内酯,DL-泛解酸内酯再在串珠镰孢霉菌的作用下生成D-泛解酸,经内酯化获得D-泛解酸内酯,但是本方法采用了毒性较高的**,在实际生产操作中安全风险大,且废水不易处理,采用DL-泛解酸内酯制备D-泛解酸内酯过程繁琐,效率低下。

D-泛解酸内酯水解酶基因,基因片段长度为1146bp,该序列同来源于尖镰孢霉菌(F.oxysporum)AKU 3702菌株的编码D-泛解酸内酯水解酶cDNA结构基因的同源性为90.06%.将所得片段定向克隆到pTrc99a载体中,转化至JM109感受态细胞,筛选出了阳性克隆.经IPTG诱导阳性菌,进行SDS-PAGE电泳,检测出在约40kD处有一蛋白表达带.对两株重组基因工程菌的比活力进行测定,结果分别为37U和41U.


串珠镰孢霉菌(Fusarium moniliforme)CGMCC 0536的D-泛解酸内酯水解酶具有高度的立体选择性,可立体专一性拆分DL-泛解酸内酯,生成D-泛解酸. D-泛酸钙世界市场年消费量约30000吨。

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该酶已经成功的应用于工业化,取得了很好的综合效益.为了提高D-泛解酸内酯水解酶的酶活力及在低pH条件下的稳定性,我们在基因水平上对酶进行了研究. 利用RT-PCR方法,扩增得到了编码源于串珠镰孢霉菌(Fusarium moniliforme)CGMCC

0536的D-泛解酸内酯水解酶cDNA,对其结构进行分析,根据分析结果设计了一对特异引物,成功扩增到了编码D-泛解酸内酯水解酶cDNA的结构基因,结构基因同pMD18-T载体连接后,进行测序.D-泛解酸内酯水解酶cDNA结构基因序列已在Genebank数据库申请登记,登记号为AY728018. 泛解酸内酯储存条件:密封保存,并放在阴凉,干爽的位置。高纯泛解酸内酯源头好货

99%含量的泛解酸内酯。哪里有泛解酸内酯型号

一种高纯度的D‑泛酸内酯的合成方法包括步骤:将DL‑泛酸内酯加入到水中,在pH为6.0‑8.0用酶水解,得到D‑泛解酸以及L‑泛酸内酯;将上述水溶液经有机溶剂萃取,得到D‑泛解酸的水溶液以及L‑泛酸内酯有机溶液;将D‑泛解酸的水溶液,控温20‑80℃反应,用酸调节pH至1‑4,然后关环得到D‑泛酸内酯水溶液;将步骤S3所得的D‑泛酸内酯水溶液经有机溶剂萃取,然后经浓缩,蒸馏,结晶得到D‑泛酸内酯;将步骤S2所得的L‑泛酸内酯溶液经浓缩、然后在碱性条件下消旋得到DL‑泛酸内酯。本发明为泛酸钙制备得到D‑泛酸内酯,工艺路线操作简单,反应条件温和,安全,环保,原料价廉易得,工业适应性强。哪里有泛解酸内酯型号

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