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蜂毒肽制备方法
目前获取蜂毒肽的方法有3种,化学合成、从粗蜂毒中分离纯化和生物工程法。利用化学合成的方法可以获得具有生物活性的蜂毒肽纯品,但其成本太高,并不适合蜂毒肽的生产,实际应用较少。目前,获取蜂毒肽纯品的主要途径是从粗蜂毒中分离纯化。分离纯化方法以色谱理论为基础,随着色谱技术的发展以及与其他提取工艺的结合,操作成本逐渐降低,产量和纯度有所提高。利用生物工程技术可以诱导蜂毒肽基因在工程菌中表达,然后收集纯化表达蛋白,从而得到蜂毒肽纯品。由于蜂毒肽有破坏细胞膜以及致死细胞毒性,其在工程菌中的直接表达无法实现。面对这个问题,科学家们找到了在工程菌中表达蜂毒肽融合蛋白的方法,并在融合蛋白的选择及后期分离纯化上进行了大量研究,取得较大进展。 蜂毒中富含的蜂毒肽对产生神经兴奋的碱型受体有阻滞作用。胡蜂蜂毒生产厂家哪家好
王秋波等通过人工合成含特异性酶切位点的AB两条寡核苦酸片段,在Klenow酶作用下形成目的基因,用限制型内切酶HindⅢ,XmnⅠ同时酶切目的基因和表达载体Pmal-p2质粒,在T4连接酶的作用下构建两者的重组体,通过α-互补筛选出附性克隆,并通过特异性酶切和测序分析进行鉴定,获得重组蜂毒肽的原核表达克隆。
2003年,刘岭等通过MTT法对SMMC-7721、BEL-7402和Hep-3B三种肝*细胞系进行研究,考察蜂毒肽*****的量效关系,结果显示:在8~64μg/mL剂量时,蜂毒肽的抑瘤率直线上升,在体外表现***的抗瘤效果。 哈药六厂蜂毒粉蜂毒贮存在毒囊中的垫刺里,由蛰针排出。
***镇痛作用蜂毒中的单体多肽是***的主要成分,它具有类***样的作用,但无***的不良反应t 。蜂毒肽对前列腺素合成酶的***作用是吲哚美辛的7Il倍,故有
较好的镇痛***作用l|J。镇痛强度为***的40%.是安替比林的68倍、镇痛作用的持续时间亦较长,但无水扬酸类对消化道的刺激和甾体类的免疫***作用
对内分秘系统的作用 蜂毒对垂体肾上腺皮质系统有明显的兴奋作用,能使肾上腺皮质***和促肾上腺皮质***ACTH释放增加,起到抗风湿、类风湿荚节炎作用。
在通常情况下,C-末端有4个氨基酸残基携带正电荷,N-末端有2个氨基酸残基携带正电荷,整个分子带6个正电荷。蜂毒肽的N-末端起前20个氨基酸残基主要是疏水的,C-末端的6个氨基酸残基主要是亲水的。
分子的3个赖氨酸和2个精氨酸残基使其成为强碱性肽,在中性水溶液中,蜂毒肽作为单体是以随机的卷曲结构存在的,而随着pH值以及离子强度的增高,蜂毒肽自我交联,形成螺旋的四聚体结构,有研究发现在不同的溶液中蜂毒肽的螺旋结构区域及螺旋间的角度是不同的。螺旋结构中前21个氨基酸是极性的,位于螺旋的表面,而非极性氨基酸在螺旋的另一面。其两亲性(am-phiphilie)是膜结合肽和膜蛋白跨膜螺旋的特征。所以这个特性决定蜂毒肽既可以溶于水中,又可以与膜自然结合,进而溶解细胞。 具**性的成分是蜂毒肽、多巴胺和组织胺。
蜂毒对血液系统的作用:
蜂毒的抗凝作用和溶血作用是其血液毒的主要表现,也是其***
化淤改善微循环重要环节。已证实蜂毒能增加大白鼠、免皮肤毛细血
管通性。蜂毒及其组分引起肥大细胞释放肝素、组织胺和5-羟色胺等
生理活性物质是影响微循环改变的重要因素。实验证明,极小里的蜂
毒进入人体就能改变***的功能状态,且对微循环有广谱的生物
学活性,***开放数量增加,灌注加强,流速提高,血液的流动.
性增高,***通透性增加,这些因素综合作用会**改善组织代
谢,有效提高组织修复能力和再生能力。实验证明,天然蜂毒及其有
效成分蜂毒肽、磷脂酶A具有很好的抗凝作用及纤溶作用。蜂毒对血
液凝固的影响还存在--条神经反射通路,用蜂毒灌注实验动物的隔离
颈动脉窦时,血液凝时间除延长。 ,还有透明质酸酶、蜂毒磷脂酶 及组胺等多种活性物 质,故有肽类“宝库”之称。纯蜂毒
在***风湿性关节炎、类风湿性关节炎及坐骨神***等方面应用**为普遍。胡蜂蜂毒生产厂家哪家好
1991年,张青文开始提取了蜂王毒腺的RNA,用于棉铃虫卵中的转译,成功地合成了Promelittin,并对提取的mRNA成分进行了研究,结果发现总RNA在除去rRNA后就可得到高纯度的蜂毒肽mRNA。
1997年,李继周等通过mRNA-cDNA反转录的方法合成了蜂毒肽基因,用λgt11建立了蜂毒肽的cDNA文库,并用抗体探针筛选出能够表达蜂毒溶血肽的阳性克隆。 Benachir等利用钙黄绿素作为荧光标记物,系统研究了蜂毒肽诱导的膜渗漏。认为蜂毒肽与囊泡的结合会非常迅速,而且在蜂毒肽作用下,有的囊泡的内容物全部释放,而有的则保持完整。 胡蜂蜂毒生产厂家哪家好
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