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蜂毒肽制备方法

目前获取蜂毒肽的方法有3种，化学合成、从粗蜂毒中分离纯化和生物工程法。利用化学合成的方法可以获得具有生物活性的蜂毒肽纯品，但其成本太高，并不适合蜂毒肽的生产，实际应用较少。目前，获取蜂毒肽纯品的主要途径是从粗蜂毒中分离纯化。分离纯化方法以色谱理论为基础，随着色谱技术的发展以及与其他提取工艺的结合，操作成本逐渐降低，产量和纯度有所提高。利用生物工程技术可以诱导蜂毒肽基因在工程菌中表达，然后收集纯化表达蛋白，从而得到蜂毒肽纯品。由于蜂毒肽有破坏细胞膜以及致死细胞毒性，其在工程菌中的直接表达无法实现。面对这个问题，科学家们找到了在工程菌中表达蜂毒肽融合蛋白的方法，并在融合蛋白的选择及后期分离纯化上进行了大量研究，取得较大进展。 蜂毒含有的多肽类、酶类及胺类等成分能刺激肌肤产生天然的胶原蛋白。面膜蜂毒诚信经营

1999年，Kubo等通过5种细胞毒的测定方法对蜂毒肽与嗜酸性粒细胞的主要碱性蛋白进行比较，结果证实蜂毒肽能插入K562细胞的胞膜中进而形成孔道，引起Ca内流，使胞内Ca浓度升高，细胞裂解。1小时内，蜂毒肽对实验的白血病细胞均具杀伤效果。Shamsher等研究发现蜂毒肽可***磷酸脂酶D进而裂解人单核白血病细胞(U937)。

2000年，王关林等从蜜蜂毒腺中提取总RNA，通过RT-PCR方法扩增得到了蜂毒肽前体蛋白的cDNA，再进一步通过定点诱变在蜂毒肽序列前引入了经胺裂解位点，构建了与β-半乳糖苷酶部分序列相融合的蜂毒肽诱变蛋白表达载体，序列分析结果表明，他们成功地引入了目的密码子，且与β-半乳糖苷酶部分序列构成正确的读码框，并在大肠杆菌中表达了诱变蛋白。 护肤品蜂毒含量蜂毒中富含的蜂毒肽等能直接杀伤**细胞并能增强人体应激能力。

1972年，Habermant报道1μmol/L的蜂毒肽就能阻止**细胞增殖但却不***正常细胞的生长与克隆率。

1983年，Vlasak等用mRNA-DNA逆转录的方法，利用质粒pBR322构建了蜂王毒腺的cDNA文库，用蜂王毒腺总mRNA制作探针从此文库中分离得到了蜂毒肽的cDNA，再进一步将其克隆到质粒pUC18上进行DNA序列分析，由DNA的序列分析结果推测出的蜂毒肽序列与实际测得的完全相同。

1996年，Arora通过对正常大鼠肝细胞与大鼠肝*细胞抗缺氧损伤能力的实验对比，证实蜂毒肽***磷脂酶A2(***2)能够解除肝*细胞对缺氧的抵抗。DUnn等将来自于鼠抗人骨髓瘤细胞和淋巴瘤细胞表面特异蛋白的抗体SCFV基因同蜂毒肽基因相融合，构建了能杀**细胞的抗***基因，大肠杆菌中融合基因并表达，精制的抗***显示了体外杀死**细胞的效能。 Kindas等从处女蜂王的毒腺中提取得到了总mRNA，发现蜂毒肽mRNA含大约400个碱基对和1个短的polyA尾。 Haase实验表明蜂毒肽可以***细胞脂酶，包括磷脂酶C(PLC)、磷脂酶D(PLD)、磷脂酶A2(***2)及甘油三酯酶等。

蜂毒对神经系统具有***作用:①******系统，表现为胆碱对神经的阻滞，造成半球皮层和皮质下(特别是下丘脑)的******;②***植物神经系统交感神经节的兴奋传导，使胃肠平滑肌活动和兴奋性增强;***周围神经冲动的传导，阻碍或延迟其传导速度。

用蜂毒肽代替蜂毒全毒不仅对辐射有预防作用，而且还有***作用。高纯度的蜂毒肽可以明显提高抗辐射效应，而且和全蜂毒比较差别非常明显。蜂毒肽对**细胞的毒性作用也引起了人们的注意。蜂毒肽具有膜活性，直接对细胞的磷脂膜起溶解作用，***细胞发育，对**细胞有强烈的细胞***作用。 新鲜蜂毒为无色透明的液体状，味苦，有芳香气味。

蜂毒是工蜂毒腺分泌出来的一种具有芳香气味的成分复杂的混合物，主要含有蛋白质多肽类、酶类、生物胺类和其他物质。蜂毒中研究较多的是蜂毒溶血肽，又称蜂毒肽(melittin)。蜂毒肽约占蜂毒干重的50%，也是蜂毒中具药理作用和生物学活性的主要组分。MLT呈强碱性，易溶于水，相对分子质量为2849，。2013年3月，美国科学家宣布，可以利用在蜂刺***中发现的化学物质毁灭**毒，防止**传播，但又不伤及周围正常细胞。

尤其是蜂毒肽可以抗对青霉素具有耐药性的金黄色葡萄球菌。蜂毒肽还能增强磺胺类和青霉素类***的***效力，对多种***、***也具0性。其对前列腺素合成酶的***作用是吲哚镁辛的70倍，镇痛强度为***的40%。实验研究证明，全蜂毒、蜂毒肽、神经毒多肽、MCD均能刺激垂体肾上腺系统使皮质***释放增加而产生***作用。蜂毒肽还能***白细胞转移. 蜂毒的主要成分是多肽类、氨基酸、酶类、多巴胺、组织胺、酸类等。药用马蜂毒价格表格

蜂毒肽(mPlilfin)是蜂毒的主要成分．约占蜂毒于重的 50％。面膜蜂毒诚信经营

蜂毒的体内过程:

蜂毒通过血液或***运输，肌肉注射后吸收很快，主要分布于肾、

肺、心、肝、小肠、关节、脾、肌肉，脑组织含童很少，主要经肾排出，肌肉注射后30 分钟，肾中浓度比较高，尿液中约90分钟时含里比较高。大

部分降解成小肽排出。极小里得蜂毒明肽进入***。

四、蜂毒的毒副作用:

1、蜂毒具有出血、溶血、神经毒性和组织胺作用，非过敏人群，在

***剂里内，不会0性反应。病人在***过程中出现轻微发热是正常

反应，不必处理，随着***的继续，会逐渐缓解。对于反应较强烈的患

者，可从小剂里开始，逐渐增加。对于轻微过敏反应，可继续***，会

逐渐缓解。严重过敏者，比较好不用，必要时可用***法。 面膜蜂毒诚信经营