Helios血小板裂解液如何制备
间充质间质细胞(MSCs)体外扩增的培养基一般添加胎牛血清FBS,但是考虑到异种ganran及免疫反应的风险,监管机构并不鼓励使用。人血小板裂解液除了不存在异种免疫反应或牛病原体ganran的风险,有助于增强间充质干细胞的扩增,也相对容易地根据良好的生产规范程序生产,并已用于临床应用,因此现如很多资料显示血小板裂解液已被证明是扩增MSCs一种非常有效的FBS替代方法(参考文献1)。血小板裂解液由血浆组成,含有纤维蛋白原和凝血因子,对于一般细胞培养中涉及的含钙培养基来说通常需要加入抗凝剂(常用肝素、Rivaroxaban利伐沙班、argatroban阿加曲班等)来防止凝胶形成,其中肝素很为常用。 血小板裂解液中的沉淀是怎样形成的?Helios血小板裂解液如何制备
血小板中含有很多不同的细胞生长因子,包括PDGF,VEGF,EGF等,实践证明,血小板分泌的细胞生长因子能够对多种细胞起到支持生长的作用,可以完全替代胎牛血清(FBS)甚至于在支持一些细胞培养的效果上优于FBS。本产品是将多人份浓缩血小板混合后裂解而成,产品均一性好,经过了严格安全性有效性质量检控。人血小板裂解液能够支持包括间充质干细胞成骨分化,成脂分化,造血干细胞以及诱导性多能干细胞的生长等。是这些细胞公认的动物源血清替代品。 达科为血小板裂解液保存温度血小板裂解液进口麻烦吗?
现在咱们已经了解到肝素对于血小板裂解液使用浓度优化的必要性,小编继续福利大放送,现给大家带来德国PLBioscience公司的ELAREM系列的高性价比人源血小板裂解物,据说有不到千元便可买到50ml的XENO-FREEN无动物源MSCs细胞培养补充剂hPL,用户根据自己的实验需求选择需要添加肝素版本和不需要添加肝素版本。并且考虑到用户从科研到临床的过渡需求,我们曼博生物为各位用户提供各种研究级、GMP/临床级的hPL以支持学术研究、工业生产以及体外诊断行业中的细胞扩增应用。
那么经常有客户会问道人血小板裂解液中的肝素的使用浓度到底如何抉择呢?添加培养之前有必要花时间来优化下这个肝素浓度参数吗?现在小编通过比较了不同浓度的普通肝素(unfractionatedheparinUFH,分子量3000-30000Da)和低分子肝素(LMWH-分子量2000-12000Da)在hPL培养基中培养MSCs的增殖能力、成纤维细胞体外集落形成单位(colony-formingunit,CFU-F)、免疫表型和体外分化等情况,给大家作解答。从而帮助大家正确使用血小板裂解液。 血小板裂解液里有哪些生长因子?
MSCs是异质性的细胞群,其组成可能受培养条件的影响。血小板裂解液中肝素及其浓度高低对细胞形态和生长模式并未有明显的影响。通过免疫荧光显微镜分析未发现波形蛋白(一种通常在中胚层起源的细胞中表达的中间丝)和α-SMA表达的差异,肝素浓度对于α-SMA(绿色)和波形蛋白(红色)的分布并无影响。脂肪组织源性间充质干细胞(AT-MSC)和骨髓源性间充质干细胞(BM-MSC)本身免疫表型就是相似的,经添加不同浓度肝素的血小板裂解液培养扩增的AT-MSC和BM-MSC的流式细胞分析结果显示出CD29、CD73、CD90和CD105表达,而表面标记CD14、CD31、CD34和CD45的缺失,可见肝素浓度对MSC免疫表型的表达水平几乎是没有影响的。 血小板裂解液里的沉淀是怎么形成的?人血小板裂解液保存温度
有谁知道血小板裂解液主要含有哪些生长因子?Helios血小板裂解液如何制备
通过BODIPY染色的脂肪滴来反映的成脂分化情况,发现两种肝素UFH和LMWH在高浓度时,分化成脂细胞的百分比明显降低。同样的,通过茜素红染色的磷酸钙沉淀分析成骨分化情况,高浓度肝素也降低了成骨分化的百分比,特别是在脂肪组织来源的MSCs中,UFH肝素高浓度对成脂和成骨分化诱导的负面影响较为明显。基于上述结果,我们现在知道血小板裂解液中添加的抗凝剂肝素在体外MSCs扩增的必要性,在购买血小板裂解液后,用户应结合自己的实验条件去合理的选择合适的肝素浓度,而肝素浓度的选择应该在有效防止含血小板裂解液培养基凝胶形成的基础上尽量降低,以减少肝素对于MSCs的增殖能力、成纤维细胞体外集落形成单位(CFU-F)、MSCs体外分化等的影响。 Helios血小板裂解液如何制备
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