辽宁PNGaseF去糖基化酶疾病机理研究

genovis分析依那西普和曲妥珠单抗游离聚糖：为了确认依那西普和曲妥珠单抗中半乳糖损失的LC-MS数据，进行了释放的N-聚糖分析。标记的N-聚糖的分离清楚地表明了依那西普和曲妥珠单抗上半乳糖的丢失，如半乳糖基化聚糖物种的信号丢失所示。该酶是一种有价值的工具，可降低样品异质性，用于分析携带α连接的 GalNAc 残基作为未成熟截短he心 1 的复杂 O-糖蛋白。1. 高效 α-N-乙酰半乳糖胺酶 – 快速、完全去除 Tn-抗原和 α1-3-连接的 GalNAc；2. 实现完全糖基去除，以改善蛋白质表征；3. 可固定在即用型离心柱中。OmniGLYZOR Microspin 小柱中包含以下组分：PNGase F；O-糖苷酶。辽宁PNGaseF去糖基化酶疾病机理研究

Fc N-聚糖在抗体的效应功能中起着至关重要的作用，但可能会增加蛋白质表征测定的复杂性。在天然条件下用PNGase F去除Fc N-糖可以表征游离N-糖以及去糖基化抗体的功能和结构。 为了证明PNGase F固定化和PNGase F冻干在天然反应条件下有效去除Fc N-聚糖，对zhiliao性抗体曲妥珠单抗进行了处理。图2中的质量数偏移表明，在37°C下用Genovis的PNGase F冻干或PNGase F固定化孵育1小时后，曲妥珠单抗上的Fc N-聚糖成功去除，与在溶液中用PNGase F冻干处理的样品相比，没有酶干扰用PNGase F固定处理的样品的分析。辽宁PNGaseF去糖基化酶疾病机理研究GalNAcEXO固定化离心柱用于水解糖蛋白上的GalNAc残基。

FucosEXO中的酶在大肠杆菌中表达，带有His标签，分子量为87 kDa和64 kDa。FucosEXO在天然条件下水解糖蛋白上的岩藻糖，在6至8的pH值范围内显示出高活性，无需辅助因子或添加剂。1. 用于方法开发的灵活格式；2. 可以结合酶以提高效率；3. 适用于自动化工作流程；4.即用型 - 只需加水即可。Genovis的FucosEXO 是 α-岩藻糖苷酶的混合物，用于在 N-和 O-糖基化蛋白或游离寡糖上有效水解 α1-2、α1-3 和 α1-4-连接的岩藻糖。人血清中 O-糖蛋白的富集：GlycOCATCH还可用于从复杂的样品混合物（如人血清）中选择性富集O-糖基化蛋白。简而言之，用Genovis的SialEXO处理血清并应用于GlycOCATCH树脂。洗涤树脂，用8M尿素洗脱O-糖基化蛋白。用胰蛋白酶消化样品并使用 RP-LC-MS/MS 进行分析，并使用 Swiss Prot 数据库鉴定蛋白质列表。O-糖基化蛋白以黄色表示。

Genovis的GlycOCATCH®是一种亲和树脂，可特异性结合O-糖基化（粘蛋白型）蛋白和肽，从而实现简单的工作流程，以富集和纯化携带O-聚糖的蛋白质和肽。洗涤离心柱，并用8M尿素洗脱结合的蛋白质。对洗脱材料的分析表明，由于洗脱O-糖基化蛋白，并且树脂与非糖基化蛋白和N-糖基化蛋白的结合可以忽略不计。选择性结合 O-糖蛋白：为了测试选择性，将一系列 O-糖基化、N-糖基化和非糖基化蛋白与Genovis的GlycOCATCH 一起孵育。为了在肽水平上研究Genvois的GlycOCATCH的O-糖特异性，将O-glcyosyled肽（糖蛋白）与一系列未修饰的肽混合。用于糖蛋白去唾液酸化的冻干酶混合物SialEXO 冻干剂以冻干粉的形式提供，装在 2000 个单位的小瓶中。

α连接的Genovis的GalNAcs的水解：GalNAcEXO 是一种 α-N-乙酰半乳糖胺苷酶，可有效水解糖蛋白上的末端 GalNAc 残基。与丝氨酸或苏氨酸连接的 GalNAc（称为 Tn 抗原）被 GalNAcEXO 快速有效地水解，并且该酶还在 α1-3 连接的末端 GalNAcs 上显示出活性。Genovis的GalNAcEXO 是一种外α-N-乙酰半乳糖胺酶，用于有效水解与糖蛋白（Tn 抗原）中的丝氨酸或苏氨酸残基相连的 α-N-乙酰半乳糖胺 （GalNAc）。该酶还在 α1-3 连接的末端 GalNAc 上显示活性。GalNAcEXO 在天然条件下水解糖蛋白上的 GalNAc，在 pH 值 6.0 至 7.6 范围内具有高度活性。依那西普的磷性能测试 ：PNGaseF去除N-聚糖。黑龙江固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

GlycOCATCH®用于结合的 O-糖蛋白的可选洗脱方法：靶向 O-糖蛋白富集；辽宁PNGaseF去糖基化酶疾病机理研究

genvois的OpeRATOR 是一种内切蛋白酶，可催化直接靠近 O-聚糖的天然粘蛋白型 O-糖基化蛋白的肽键的水解。内切蛋白酶具有高特异性，可消化丝氨酸或苏氨酸残基的O-聚糖N端的蛋白质。 OpeRATOR 活性需要粘蛋白型的 O-聚糖，并且该酶不会用 N-连接聚糖消化糖蛋白。该酶对具有亚洲化he心1 O-聚糖的位点z活跃。它还消化唾液酸化的he心 1 和he心 3，但程度要低得多。为了获得z佳性能，需要去除唾液酸，因此，SialEXO冻干（唾液酸酶混合物）包含在购买中。 辽宁PNGaseF去糖基化酶疾病机理研究