上海永诺数字PCR代理商

时间:2020年08月13日 来源:

数字PCR(Digtal PCR)是一种核酸定量精密检测的新兴技术手段,于20世纪由Vogelstein等提出。它是将稀释后的核酸模板分配到大量不同的反应单元中,使每个反应单元中有一个或没有核酸。利用PCR扩增的同时,加入可检测荧光。待扩增结束时,使用统计学方法采集每个反应单元出现的荧光次数,从而定量检测样本中的核酸浓度。

基于分液方式的不同,数字PCR主要分为3种:微流体数字PCR(Microfluidic digital PCR,mdPCR)、微滴数字PCR(Droplet digital PCR,ddPCR)和芯片数字PCR(Chip digital PCR,cdPCR)。 流式检测,顺序逐一检测每个微滴,无荧光交叉干扰,微滴阴性阳性判读准确。上海永诺数字PCR代理商


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无创产前检查

镰状细胞贫血(sickle cell anemia)是HBB基因突变引起的常染色体显性遗传病,有严重的危害,可以导致高达5%的胎儿死亡率及4.62%的孕妇死亡率。而精细有效的无创产前诊断是预防镰状细胞贫血患儿出生的有效方法。研究人员采用dPCR技术检测孕妇胎儿游离DNA(cff-DNA)HBB基因突变。结果显示,dPCR技术能够确定87%的男性胎儿(n=45)和75%的女性胎儿(n=20)HBB基因的突变状态。当cff-DNA浓度大于7%时,可以**的检测出HBB基因突变[3],可以说是相当厉害了。



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总结

数字 PCR 的优点:

  • 无需依赖参考物或标准品
  • 通过增加 PCR 平行样的总数可实现所需的精度
  • 高度耐受***剂
  • 能够分析复杂混合物
  • 与传统 qPCR 不同,数字 PCR 对出现的拷贝数呈线性反应,可以检测到较小倍数变化的差异。

实时荧光定量 PCR 的优点:

  • 提高检测的动态范围
  • 无需 PCR 后处理
  • 检测能够覆盖低至 2 倍的变化
  • 在 PCR 的指数期内采集数据
  • 报告基团荧光信号的增加与生成的扩增子数量成正比
  • 裂解探针提供扩增子的长久裂解记录

传统 PCR 的缺点:

  • 精确度差
  • 灵敏度低
  • 动态范围小 < 2 logs
  • 分辨率低
  • 非自动化
  • ***基于规格的区别分析
  • 结果未表示为数字
  • 使用溴化乙锭染色不足以定量
  • PCR 后处理

数字PCR的应用

检验检疫 食品安全

转基因食品检测(国标)

病原菌鉴定

动物源性检测分析

 

科研

基因表达差异监测

•CRISPR-Cas9基因编辑结果验证

甲基化含量鉴定

单细胞研究:测序、PCR

 

临床

**液体活检:早筛、用药、监测、复发

无创产前筛查:低成本、快速

***性疾病:HBVHIV定量


据悉,MiniDrop™**团队由微流控、光学、机电学、化学、临床医学、分子生物学等多学科交叉领域的**组成,依托精密仪器研发、生物纳米材料与分子生物学等平台,以微滴式数字PCR仪为**,打造了全自动液体处理工作站、核酸提取试剂盒等创新产品,致力于解决**、***领域的精细诊断。
单细胞研究:测序、PCR。

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MicroDrop-100系统产品特点

一、适应性广,灵活性高

1理论上可覆盖qPCR(荧光定量PCR)的所有应用

2样本多样性,样本通量可达96个样本,支持灵活设定

3开放式平台,支持用户自行开发试剂、产品。

 

二、灵敏度高,准确性高

1***定量——无需依赖标准曲线

2采用微滴式技术高达100,000个的微滴

3线性范围达到6个数量级,灵敏度高达万分之一

 

三、可分析复杂混合物

1、准确度不完全依赖于扩增效率

2双通道荧光检测,支持EvaGreen染料及探针法

3支持多重数字PCR

 

四、操作简单,使用方便

1全封闭防污染设计,一键式自动化操作。

2可选全中文分析软件 数字PCR技术是公认的液体活检领域灵敏度比较好的检测方法。流式数字PCR品牌

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研究方向

基因表达差异研究

检测时完全不依赖传统的Ct值即可实现真正意义上的***定量,从而提供了比实时荧光定量PCR更精确的基因差异表达研究,尤其对于那些靶基因表达差异微小的情况:microRNA、lncRNAs等的表达分析、等位基因的不平衡表达、单细胞基因表达分析、Exosome内核酸分子定量分析等。


拷贝数变异(CNV)研究

微滴化的样品处理及检测,这种摆脱Ct值的计算方法而直接获取目标基因的***拷贝数,为拷贝数变异的研究提供了***的检测精度。是其他诸如二代测序、芯片杂交等平台无法达到的,因此采用数字PCR能够有效对NGS、aCGH的实验结果进行验证,并具有成本低、通量高的特点。


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浚和(上海)仪器有限公司坐落在上海市闵行区秀文路898号西子国际中心5号楼911室,是一家专业的仪器仪表、电气设备、环保设备、机械设备及配件、化工产品及原料(除危险化学品、监控化学品、民用物品、易制毒化学品)的销售,从事货物及技术的进出口业务,从事电子科技领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让,机械设备的维修。 【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】公司。目前我公司在职员工达到5~10人人,是一个有活力有能力有创新精神的高效团队。公司业务范围主要包括:[ "真空泵", "喷雾干燥机", "培养箱", "等离子清洗机" ]等。公司奉行顾客至上、质量为首、的经营宗旨,深受客户好评。目前公司已经成为[ "真空泵", "喷雾干燥机", "培养箱", "等离子清洗机" ]的**企业,正积蓄着更大的能量,向更广阔的空间、更***的领域拓展。

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