江苏自动酶标仪

七、双波长评价 　　方法：在运用酶标仪检测样品时，由于溶液中的小气泡、杯底的水纹印及划痕、小孔杯之间透明度的差异等等，这些都是仪器测定过程中常见的干扰因素，而标本中的干扰组份(如溶血、黄道)因洗涤而对测定结果影响则较小，因此我们将文献中的双被长评价方法改为：取同一厂、同一批号酶标板条(每个通道2条共24孔)每孔加入200ul甲基橙溶液(吸光度调0.065～0.070A)先后于8个通道分别采用单波长(490nm)和双波长(测定波长490nm、参比波长630/650nm)进行检测，计算单波长和双波长测定结果的均值、离散度，比较各组之间是否具有统计学差异以考察双波长消除干扰因素的效果。全自动酶标仪的数据分析系统可以自动计算、分析样品的数据，并生成图表、报告等结果。江苏自动酶标仪

酶标仪基本原理和特点 酶标仪是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图。光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光，进入塑料微孔极中的待测标本，该单色光一部分被标本吸收，另一部分则透过标本照射到光电检测器上。光电检测器将透射过待测标本后强弱不同的光信号转换成相应的电信号，电信号经前置放大、对数放大、模数转换等处理后，送入微处理器进行数据处理，转换成相应的浓度，较后由显示器和打印机输出结果。酶标仪的基本原理： 使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，较后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可较大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。北京酶标仪操作本地购买酶标仪推荐哪家好可咨询上海稳赢机电设备。

　检测步骤 　　1.取固体或液体样品5ml，加入25ml 70%的甲醇，混匀3分钟，静止10分钟，过滤，收集滤液，吸取100ul滤液加100ul分析缓冲液，混匀。 　　2.取出绿色的稀释孔和无色的有抗体包被的稀释孔各放入一个板架上。 　　3.吸取200ul酶联偶合物加入到绿色的稀释孔，再吸取100ul标样(0、2、5、20、50ppb)，和100ul步骤1的待检混合样，混匀3次。 　　4.然后从300ul混合物中吸取100ul加入到无色的有抗体包被的稀释孔中，静止15分钟。 　　5.将孔中的液体倒掉，用蒸馏水冲洗每个孔，将微孔倒置于纸巾上把水吸干。 　　6. 加入100ul底物，放置5分钟，颜色变为蓝色。 　　7. 加入100ul终止液，颜色变为黄色。 　　8. 上机检测，(酶标仪滤镜450nm，示差滤镜630nm) 　　9. 稀释倍数f：1 　　10. 定量限：生奶0.002ug/kg， 　　11. 牛奶或花生酱≤20ug/kg，合格， 　　12. 计算公式：X= c*f

按照滤光方式分类 　　滤光片式酶标仪内置滤光片，根据试验所需选择滤光片来获得不同的波长。光源发出的全波谱光经滤光片后，大部分被过滤，只剩下滤光片本身允许的波长通过。对ELISA来说，检测波长范围是400～750 nm（固定波长：405，450，490，630 nm）可见光范围，即可满足显色测定需求。“单波长”只使用对显色较大吸收的波长测定，目前基本已淘汰。“双波长”除了对较大吸收波长进行测定外，同时用对特异显色不敏感的波长进行校准，OD值为二者之差。选择什么波长主要根据底物溶液颜色和pH值，比如邻苯二胺OPD-过氧化氢H2O2或四甲基联苯胺TMB-H2O2较大吸收波长不同，前者的吸收波长为492 nm，后者为450 nm。对于多功能酶标仪来说，检测波长范围覆盖紫外区、可见光区、近红外等，需要5~6个滤光片。滤光片式酶标仪获得的波长都是固定的，不能获得任意所需波长，而且更换滤光片价格昂贵。酶标仪即酶联免疫检测仪，是酶联免疫吸附试验的专业仪器。

ELISA试剂盒又称为酶联免疫试剂盒，是现在很多生物制药厂和医疗实验室常用的检测设备，主要的试验方法就是酶联免疫吸附方法。 ELISA是将酶催化的放大作用与特异性抗原抗体反应结合起来的一种微量分析技术。酶标记抗原或抗体以后，既不影响抗原抗体反应的特异性，也不改变酶本身的活性。因为ELISA试剂盒价格低廉且准确性搞、反应时间短等优点，所以适合大批量的检测，一般常常用于食品安全检测方面。 食品安全检测ELISA试剂盒的操作原理： ELISA的操作步骤：样品收集保存、试剂准备、温育、洗板、显色、比色、包被、加样、加酶标抗体、终止反应、结果判定。 ELISA试剂盒需要遵循的3个要点： 1.抗原或抗体能吸附于固相载体表面，并保持其免疫学活性; 2.抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性; 3.酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，可根据已知浓度的抗原或抗体的颜色反应的深浅绘制标准曲线并依此计算出未知样品中抗体或抗原的浓度。上海稳赢机电设备的酶标仪普遍地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中。广东什么是酶标仪哪家好

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选购指南 酶标仪（MicroplateReader）是对酶联免疫检测（EIA）实验结果进行读取和分析的专业仪器。酶联免疫反应通过偶联在抗原或抗体上的酶催化显色底物进行的，反应结果以颜色显示，通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。 国内许多计生站系统开展了酶免检测项目，如：乙肝五项、优生优育系列检测等。过去多数采用目测方法，报出的结果缺乏科学的依据。例如：某弓形虫检测试剂盒中，临界值规定为：阴性对照品的OD值×2.5，通过目测无法判断标本孔的反应颜色是否超过临界值。肉眼进行两孔之间的颜色比较可能还行，但比较一孔的颜色是否超过另一孔颜色的2.5倍就不可能。江苏自动酶标仪