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特殊染色化学试剂的选择:化学试剂的选择主要针对自配试剂而言,对于商品化试剂盒则在于染液质量。1、一般要求选用很好品牌的化学试剂,特别是一些染色中关键的试剂。很好的化学试剂(如Sigma、国药、阿拉丁、西陇等)是保证高质量染液的前提和关键,特别对于染液中的关键试剂尤为重要。如碱性品红在一些染色液(抗酸、无色品红、醛品红等)中均为主要试剂,其质量决定了较终的染色效果。如配制无色品红染液时,所使用的偏重亚硫酸钠试剂质量不合格,则会导致染液配制失败,无法染出合格的切片。2、纯度一般以分析纯为主。糖尿病性肾小球硬化症或血管病的诊断。上海提供糖原染色试剂盒产品介绍
染色的原理和临床意义:原理:粒细胞和单核细胞胞浆中含有的过氧化物酶(peroxidase,POX)能将底物过氧化氢分解,产生新生态氧,它将四甲基联苯胺氧化为联苯胺蓝。联苯胺蓝自我脱氢氧化,显棕色四甲基苯醌二胺,再加入亚硝基铁**与联苯胺蓝结合,可形成稳定的蓝色颗粒,定位于细胞浆内酶所在的部位。临床意义: 临床上主要用于急性白血病类型的鉴别:急性淋巴细胞白血病原、幼淋巴细胞POX染色均呈阴性反应;急性粒细胞白血病 原粒细胞POX染色呈局灶分布的阳性反应;急性早幼粒细胞白血病 颗粒增多的早幼粒细胞POX染色呈强阳性反应;急性单核细胞白血病原、幼单核细胞POX染色多呈细小颗粒弱阳性反应。上海哪家提供糖原染色试剂盒动物材料取用时需对动物施以麻醉,常用的麻醉剂有氯仿和。
糖类染色:糖类从组织化学技术角度来分,可分为多糖、中性粘液物质、酸性粘液物质、粘蛋白及粘脂质。多糖主要指糖原,它是一种胶样液态存在于肝细胞、骨骼肌、心肌等处。因糖原在肝脏及心肌疾患及某些的病变中分布和量都有一定改变,故糖原的染色在临床病理诊断上具有重要意义。(1)肝及心肌糖原沉着症的诊断:糖原染色显示在肝或心肌细胞内有大量糖原存在即可确诊。(2)糖尿病性肾小球硬化症或血管病的诊断。(3)高雪氏病与尼曼——匹克氏病的鉴别:前者为阳性、后者为阴性,做此染色较易鉴别。(4)骨内骨外尤文氏肉瘤的诊断:此瘤 80%细胞内有较多糖原,糖原染色为阳性,所以糖原染色为阳性(大多数细胞)可以协助诊断。(5)腺泡状软组织肉瘤与化感瘤:前者棒状小体糖原染色为阳性。
糖原染色――检查项目的注意细节:其判断标准随细胞不同而异,一般分为5级,即0~4级。糖原染色――检查项目的一般步骤:(1)新鲜干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸馏水冲洗数次,待干。(2)浸入10g/L过碘酸水溶液中10min,蒸馏水冲洗数次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自来水冲洗约5min,再用蒸馏水冲洗,然后用20g/L甲基绿复染20min,水洗,晾干。糖原染色――检查项目结果解读:(1)新鲜干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸馏水冲洗数次,待干。(2)浸入10g/L过碘酸水溶液中10min,蒸馏水冲洗数次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自来水冲洗约5min,再用蒸馏水冲洗,然后用20g/L甲基绿复染20min,水洗,晾干。冷冻切片染色效果不佳,成熟时间2个月,染色时间一般15-20分钟。
糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年较先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色试剂盒不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛不Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化,这是很关键的步骤。PAS技术是很少可检测不同种类的黏液物质(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技术却不能区别黏蛋白和糖原。若要冸确鉴别黏液物质(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步骤。大多数情冴下可用α–淀粉酶或麦芽淀粉酶来催化糖原的糖苷键水解,形成水溶性的双糖-麦芽糖,在应用PAS技术之前将糖原从组织切片上除去。人类的唾液被认为是消化糖原的一种有效手段,但是出于安全以及缺乏标冸唾液的考虑,不主张应用唾液。切出的石蜡切片要好,不能有皱褶或者刀痕,切片不能太厚。湖南口碑好的糖原染色试剂盒
可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。上海提供糖原染色试剂盒产品介绍
糖原及粘液染色法注意事项:1、 糖原的固定要及时,而且标本要新鲜。2、如用无水酒精作糖原的固定剂,有它的弊病,因无水酒精渗透较慢,而且容易产生极化,(极化是糖原颗粒趋向于细胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果较佳,其配法如下:苦味酸饱和于95%酒精85ml40%甲醛 10ml冰醋酸 5ml3、各种试剂必须化学纯,亚硫酸钠须有浓厚气味,器皿必须洁净而干燥,染色缸亦是。4、如果Schiff氏试剂,在经过活性碳吸附漂白后不显无色,首先应考虑试剂中的偏重亚硫酸钠是否失效。如果偏重亚硫酸钠气味不浓,使用时可考虑适当的增加用量。其次考虑碱性品红本身,常常虽属同一生产厂家,但不同批号,其效果就可能不同,应特别引起注意。上海提供糖原染色试剂盒产品介绍
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