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miRNA因在机体内起着调节作用被认为有诊断的生物标志物的潜力，外泌体miRNA富集的变化可反映生理病理的改变。一些病症特异性循环外泌体miRNA已被开发为肺病的早期诊断生物标记。据报道，miR-23b-3p，miR-10b-5p和miR-21-5p是非小细胞肺病（NSCLC）患者有希望的预后生物标志物。外泌体与疾病治病（应用潜能）：外泌体由于其表面具有多种粘附蛋白已经成为基因治病的潜在载体，纳米尺寸和柔韧性使它们能够跨越主要的生物屏障，如血脑屏障（BBB）等。与脂质体制剂相反，外泌体是天然存在的分泌性膜囊泡，毒性较低，从它们在体内普遍存在可以推断出其在体内的耐受性很好。另外，外泌体固有的归巢能力暗示了它们在药物递送中的潜在效用。例如，源自黑色素瘤的外泌体优先进入前哨淋巴结，这种归巢能力可以用作药物的靶向递送。活细胞分泌到胞外的囊泡样小体，含有多种蛋白和核酸分子(DNA、RNA、以及miRNA)。上海正规外泌体提取试剂厂家直销

外泌体研究思路。外泌体研究通常与高通量测序的联系紧密，研究思路可以分为三大类：表达谱、分子标志物和分子机制方向，其中表达谱思路的特点就是短平快、通常以测序数据为主要内容，短平快发表3-5分文章。而分子标志物的特点是在表达谱基础之上加入大量样本验证，建立ROC、KM曲线，分析分子与临床疾病的相关性为主，通常文章影响因子在3-10分之间。分子机制研究，顾名思义要做到细胞功能、机制研究深度，因此工作量通常较大，影响因子通常能够上10+。珠海外泌体提取试剂报价将沉淀物用PBS缓冲液进行悬浮，使外泌体悬浮于液体上层。

外泌体（Exosome）是细胞主动分泌的囊泡样小体，大小均一，直径30-200nm，密度1.10-1.18g/ml，来源普遍，几乎所有细胞都可分泌，在血液，尿液，唾液，脑脊液，腹水，乳汁等体液中普遍分布。外泌体较早在1986年发现于培养的绵羊红细胞上清液中。1996年，研究者发现外泌体作为抗原呈递因子参与T细胞依赖的抗一些病症反应，开启了外泌体蛋白研究的新天地。2013年诺贝尔生物/医学奖解答了细胞如何组织其内部较重要的运输系统之一——囊泡传输系统的奥秘。超离法因操作简单，获得的囊泡数量较多而广受?欢迎，但过程比较费时，且回收率不稳定，纯度也受到质疑。

用于外泌体提取的体液收集注意事项：1、抽血技巧。操作要轻柔迅速。试管可翻转8-10次使样本与抗凝剂混匀，避免剧烈摇晃。混匀后，将试管固定垂直放置于离心分离器，在顶部记录抽血的准确时间，因为抽血与离心之间的时间间隔可能是一个影响因素。外泌体在抽血后30分钟内是比较稳定的，若时间过长将导致外泌体数量增加。血小板极易因抽血时的物理因素而并释放出外泌体，其中包括接触、压力、切力。2、抽血时间。除了血液黏度，体内血液的各项指标在1天中变化很大。生理节律会对血小板的产生很大的影响。白细胞的募集和循环系统中促炎细胞和细胞会随时间变化。大量的具有特殊表面分子的微粒也被证明会随时间变化。目前尚无设计较好的实验对证实不同时间血液中外泌体的变化，故应在相同的时间采集样本。目前饮食是否会对EV产生影响尚未可知，但是由于脂蛋白可运载RNA且食物的摄取可以影响循环脂蛋白颗粒的类型、数量和作用，故抽血可在较后一次用餐后一段确定的时间进行。此提取方法条件复杂，成本高。

外泌体相关miRNA与肺病的诊断：miRNAs是一类含有20～25个核苷酸的非编码小RNA，能够通过下调或压制靶mRNAs来调节转录水平上的基因表达，目前非编码RNA被普遍发现存在于NSCLC患者外泌体中，参与一些病症的形成和演化过程。单个miRNA可能通过压制性复合物与多个mRNA结合，从而阻滞整个生物通路。因此，外泌体的miRNA具有成为NSCLC标志物的优势。Chen等在152例肺病患者的研究中初次报道了循环游离miRNA的表达，与75例健康者相比，发现了两种高表达的miRNA（miR-25和miR-223）。Rabinonowits等对27例肺病患者和9例健康人的血浆外泌体中12个miRNA的表达进行了评估，结果显示，12个一些病症相关的miRNA*在肺病患者中过度表达。Cazzoli等收集了30个血浆样本，发现4种外泌体miRNA（miR-378a、-379a、-139-5p、-200b-5p）在肺病患者血清中明显升高，用于筛查患者与健康人ROC曲线下面积（AUC）为0.908。外泌体携带大量特异性的蛋白质以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物质。宁波正规外泌体提取试剂

外泌体提纯试剂盒的特色与优势：纯化和富集的完整血浆/血清，尿液和细胞培养基中外泌体可用于功能研究。上海正规外泌体提取试剂厂家直销

用于外泌体提取的体液收集注意事项：1、选择血清还是血浆？推荐大多数研究选择血浆。血液凝固过程中血小板会产生大量外泌体，含量占血清中外泌体的50%以上，选择血浆可避免不必要的影响。2、注意抗凝剂的选择。肝素类抗凝剂与PCR假阴性有关，这可能是因为肝素与引物和/或酶有竞争作用。除了克制PCR，肝素可以与外泌体结合，阻止细胞摄取外泌体。因此需要记录肝素类药物的患者的血液样本。EDTA和双嘧达莫（CTAD），CTAD可以阻止血小板的并克制其释放外泌体。EDTA可能会干扰PCR反应（尽管其程度小于肝素），但是还是优于其他选择。此外，有研究表明钙螯合剂可在体外促进外泌体与血小板的结合从而降低经EDTA、或柠檬酸盐处理后的血液样本中外泌体的表观数量。使用肝素时这种影响就不会发生，因此建议在测量外泌体的精确数量时选用肝素。但是也有研究表明肝素可以导致体外条件下外泌体的减少。总之，目前尚需要更多的研究论证抗凝剂是否及如何对外泌体的释放，作用和下游反应产生特异性影响。上海正规外泌体提取试剂厂家直销