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即为本发明构建的一种pirb基因敲入的小鼠动物模型。本发明所采用第二种技术方案的特点还在于,步骤1中得到grna1和grna2后分别与trancrrna在25℃孵育10min形成二级结构。步骤3中grna1、grna2的浓度均为2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射浓度为30~100ng/μl。步骤4中southern杂交采用bamhi和avrii核酸内切酶切割f1代杂合子小鼠的dna。本发明的有益效果是:本发明提供了pirb基因敲入的小鼠动物模型及其构建方法,本发明的小鼠动物模型对于pirb基因功能的研究和在体验证提供了良好的基础。分离自pirb基因敲入小鼠的细胞还可以用于研究pirb发挥调节作用的下游机制。通过pirb敲入动物模型与不同类型cre小鼠的杂交,可以用于研究ad不同***或不同细胞类型pirb的调节作用。上海东寰告诉您如何选择好的动物模型。宝山区疾病动物模型建模购买
配制成6mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg分别在***天及第八天腹腔注射。实验建立大鼠卵巢早衰模型1.实验仪器及材料:如表1所示。表12.实验方法:①动物信息:sd大鼠,雌性,6-8周,体重180-220g。普通环境饲养,灭菌饲料饲养,自由饮水。②分组及给药剂量:如表2所示。表2③给药途径及频率:腹腔注射;2mg、3mg组连续注射7天;4mg、6mg组***天、第八天注射;对照组连续7天注射生理盐水。④病理检测:末次注射后15天,动物麻醉,采集血液,分离血清,elisa法测定血清中e2、fsh、lh水平变化情况。解剖动物,取卵巢组织称重,对大鼠的卵巢组织形态学进行观察。注射期间每天称重,给药后每周称重两次,每天进行阴道涂片检测动情周期。3.统计方法:采用graphpad进行统计分析。所有计量资料均采用均值±标准差表示采用单因素方差分析各组间均值的差异,p<。4.试验结果:(3mg组注射完成后*存活一只,不进行统计)如表3、表4、图1、图2、图3所示:①***水平:与空白组相比,2mg组、4mg组、6mg组e2水平均降低,但是只有2mg组有明显降低(p<),如图1所示;与空白组相比,2mg组、4mg组、6mg组fsh水平均上升,只有2mg组有明显升高(p<),如图2所示;与空白组相比。徐汇区哪一家疾病动物模型建模小鼠是人类疾病理想的动物模型不仅因为小鼠在生理上与人类极为相似而且小鼠的遗传资源非常丰富。
大鼠卵巢重量统计示意图。图6:动情周期检测(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:动情前期,动情期,动情后期,动情间期。图7:he染色观察不同方法造模对卵泡形态的影响(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:空白组,2mg组,4mg组,6mg组。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步的说明。然而,本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解,在不背离本发明的精神和范围的前提下。进一步地,压迫元件采用不受磁场干扰、置入体内不会对神经造成化学刺激以及具有一定可塑性的材料制备而成。
1、动物模型名称:卵清蛋白联合氢氧化铝致支气管***豚鼠模型2、实验动物种属:豚鼠3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:7~8周龄5、实验动物体重:250~350g6、实验动物环境:SPF级。1、实验方法:卵清蛋白联合氢氧化铝诱导。每只豚鼠腹腔注射100µg卵清蛋白(OVA)+30mg氢氧化铝(Al(OH)3)致敏。***次致敏后第5天再致敏1次,共2次。***一次致敏后第21d开始采用超声雾化器喷雾10μgOVA/只,豚鼠置于一直径约50cm的有盖大圆盆中,给药过程中对盆内通O2。2、检测标准:使用OVA喷雾激发后症状观察,豚鼠出现不同程度的呼吸急促、咳嗽、抓痒、甚至抽搐等支气管***症状,表明成功构建了豚鼠***模型。疾病动物模型建模怎么做?
建立一种理想的腰椎间盘突出的动物模型对本病的机制研究和临床防治具有重要意义。现有模型对腰椎间盘突出症的模拟均存在明显不足,或与临床实际病变部位有一定差距,如慢性坐骨神经结扎模型;或操作难度大,对动物损伤重,如自体髓核移植模型,选择性神经根结扎模型。因此,急需一种新的操作简单,重复率高,稳定且能准确模拟腰椎间盘突出后症状的动物模型。技术实现要素:为了建立一种操作简单,稳定好且能准确模拟腰椎间盘突出后症状的动物模型,本发明提供了一种大鼠慢性背根神经压迫模型的制备方法。其包括以下步骤:步骤一、麻醉大鼠;步骤二、于大鼠腰4到骶1水平左侧或右侧作纵行切口,切开皮肤,钝性分离椎旁肌,暴露腰4椎间孔和腰5椎间孔;步骤三、将压迫元件插入到左侧或右侧腰4椎间孔及腰5椎间孔中,得到大鼠慢性背根神经压迫模型。其中,步骤一具体为:腹腔注射1%戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醉大鼠后,将大鼠背部剃毛,碘伏消毒背部皮肤,俯卧位固定于动物手术台上,铺无菌巾。在一个具体实施方式中,压迫元件为l型棒;步骤三具体为:将2根l型棒的***端分别插入到左侧或右侧腰4椎间孔及腰5椎间孔中,l型棒的第二端置于腰4椎间孔及腰5椎间孔外。什么是疾病动物模型建模?无锡疾病动物模型建模哪家好
动物疾病模型广泛应用于疾病机制研究。宝山区疾病动物模型建模购买
通过pirb敲入动物模型与不同类型cre小鼠的杂交,可以用于研究ad不同***或不同细胞类型pirb的调节作用。附图说明图1为本发明pirb基因敲入的小鼠插入pirb基因cds和loxp位点的打靶质粒载体的构建图;图2为本发明pirb基因敲入的小鼠模型的构建方法的流程图;图3为本发明f1代pirb敲入的小鼠的基因型pcr结果鉴定电泳图;图4为本发明f1代pirb敲入的小鼠验证pirb基因敲入效果的测序峰图;图5为本发明f1代pirb基因敲入的小鼠进行southern鉴定的方法示意图;图6为本发明f1代pirb基因敲入的小鼠进行southern鉴定的结果图。宝山区疾病动物模型建模购买
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