崇明区正规疾病动物模型建模

随着大气污染、吸烟、工业经济发展导致的理化因子增多以及人口年龄老化等因素，呼吸系统疾病近年来有明显增长的趋势。由于呼吸疾病涉及的较多，包括气管、支气管及肺部等，单以肺部为例，所涉疾病就包括肺阻塞、肺纤维化、肺气肿、等，下面，武汉云克隆将以大鼠/小鼠为模式动物，介绍几种常见的肺部疾病动物模型。4.特发性肺纤维化特发性肺纤维化（Idiopathicpulmonaryfibrosis，IPF）为不明原因引起的成人慢性、进展性、纤维化性间质性肺炎。4.1建模方法:SPF级C57/BL6雌性小鼠，体重约18~20g。使用气管滴注博来霉素法建模。动物疾病模型广泛应用于疾病机制研究。崇明区正规疾病动物模型建模

水杨酸性胃溃疡模型：大鼠禁食后水杨酸灌胃。4、结扎幽门法溃疡模型：大鼠麻醉后在无菌技术下结扎幽门。此模型适合做探索抗溃疡病药物研究和胃溃疡发病机制方面的研究。三、动物模型（animalmodelofhypertension）1、肾动脉狭窄性模型：在肾动脉上造成肾动脉狭窄。如果是单侧肾动脉狭窄，则在间隔10～12d后将另一侧肾摘除。手术几天后，血压开始升高，1～3个月后血压升至高峰，并可长期维持下去。2、肾外包扎性模型：肾外异物包扎，压迫肾实质，造成肾组织缺血，使肾素形成增加，血压上升。3、应激性模型：应激性大鼠模型常采用噪声和足底电击的复合刺激，每天2次，每次2h，约20d大鼠可形成南京正规疾病动物模型建模大量的遗传变异可作为研究人类疾病的借鉴。

该模型能够帮助我们研究pirb基因在免疫系统和神经系统的功能以及下游的调节机制。本发明的另一目的在于提供上述小鼠动物模型的构建方法。本发明所采用的第一种技术方案是：pirb基因敲入的小鼠动物模型，包括确定pirb基因的待敲入的特异性靶位点grna1和grna2，将pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的内含子1内，所述grna1的基因序列如seqid**所示，grna2的基因序列如。本发明所采用的第二种技术方案为：pirb基因敲入的小鼠动物模型的构建方法，具体按照以下步骤实施：步骤1、基于crispr/cas9技术构建针对c57bl/6j小鼠rosa26基因的特异性grna1和grna2，grna1的基因序列如seqid**所示，grna2的基因序列如；步骤2、构建“cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya”基因盒打靶载体，将打靶载体进行线性化处理；步骤3、步骤2中将含有loxp位点打靶载体、步骤1中有活性的grna1和grna2与cas9蛋白共同注射进入**小鼠受精卵中，获得f0代小鼠；步骤4、将步骤3中性成熟的阳性f0小鼠分别与野生型鼠交配繁一代，获得f1代杂合子小鼠，通过pcr、测序和southern杂交确定动物基因型；步骤5、将步骤4获得的f1代杂合子小鼠近交获得f2代纯合子小鼠。

配制成6mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg分别在***天及第八天腹腔注射。实验建立大鼠卵巢早衰模型1.实验仪器及材料：如表1所示。表12.实验方法：①动物信息：sd大鼠，雌性，6-8周，体重180-220g。普通环境饲养，灭菌饲料饲养，自由饮水。②分组及给药剂量：如表2所示。表2③给药途径及频率：腹腔注射；2mg、3mg组连续注射7天；4mg、6mg组***天、第八天注射；对照组连续7天注射生理盐水。④病理检测：末次注射后15天，动物麻醉，采集血液，分离血清，elisa法测定血清中e2、fsh、lh水平变化情况。解剖动物，取卵巢组织称重，对大鼠的卵巢组织形态学进行观察。注射期间每天称重，给药后每周称重两次，每天进行阴道涂片检测动情周期。3.统计方法：采用graphpad进行统计分析。所有计量资料均采用均值±标准差表示采用单因素方差分析各组间均值的差异，p＜。4.试验结果：(3mg组注射完成后*存活一只，不进行统计)如表3、表4、图1、图2、图3所示：①***水平：与空白组相比，2mg组、4mg组、6mg组e2水平均降低，但是只有2mg组有明显降低(p＜)，如图1所示；与空白组相比，2mg组、4mg组、6mg组fsh水平均上升，只有2mg组有明显升高(p＜)，如图2所示；与空白组相比。必须真正了解研究者感兴趣且需要的小鼠疾病模型。

1、动物模型名称：角膜环钻致角膜损伤兔模型2、实验动物种属：新西兰兔3、实验动物性别：雌雄不限4、实验动物年龄：2~3月龄5、实验动物体重：1.8~2.5kg6、实验动物环境：SPF级。1、实验方法：角膜环钻致兔角膜机械性损伤。耳缘静脉注射戊巴比妥钠联合肌肉注射速眠新Ⅱ进行兔麻醉。环钻前先用2%硼酸溶液冲洗双眼，再滴0.25%氯霉素眼药水2滴消毒，以保持结膜清洁。开睑，滴2%利多卡因滴眼液2滴行角膜表面麻醉，用已灭菌的6mm角膜环钻分别在兔眼角膜上作环切，并滴入2滴氯霉素眼药水润洗，用显微眼镊、角膜上皮铲和精细眼剪小心去掉角膜损伤区域上皮，术毕，滴氯霉素眼药水2滴。2、检测标准：肉眼或裂隙灯下观察到角膜有损伤。可根据要求提供构建成功的模型动物或相关组织材料。镇江皮肤疾病动物模型建模

广泛应用于药效评价、转化医学等医学前沿领域。崇明区正规疾病动物模型建模

无论营养学和环境卫生学等方面，同一时期内很难在人身上取得一定数量的定性疾病材料。动物模型不仅在群体的数量上容易得到满足，而且可以通过投服一定剂量的药物或移植一定数量的**等方式，限定可变性，取得条件一致的模型材料。（五）可以简化实验操作和样品收集动物模型作为人类疾病的“缩影”，便于研究者按实验目的需要随时采取各种样品，甚至及时处死动物收集样本，这在临床是难以办到的。实验动物向小型化的发展趋势更有利于实验者的日常管理和实验操作。崇明区正规疾病动物模型建模