湖南咨询EdU细胞增殖检测试剂盒原理

时间:2023年11月15日 来源:

EdU染料只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免样品损伤,而且无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更准确地反映DNA复制活性。EdU细胞增殖检测:EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与Apollo荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性,适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究,尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。与BrdU检测方法相比,EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU细胞增殖检测试剂盒的发展趋势如何?湖南咨询EdU细胞增殖检测试剂盒原理

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    直接测定DNA合成是细胞增殖检测的准确方法之一,的EdU细胞增殖检测试剂盒采用另外一种胸腺嘧啶核苷酸类似物-EdU(5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷),在细胞增殖时EdU能够插入正在复制的DNA分子中,利用EdU与染料之间的点击化学(ClickChemistry)反应可以进行高效快速的细胞增殖检测分析,可以有效地检测处于S期的细胞百分数。与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比(图1),更简单,更快速,更准确。EdU只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度。EdU分析方法反应条件比较温和,我们提供的一系列AndyFluor™染料标记可以用于多色通道选择。 上海咨询EdU细胞增殖检测试剂盒公司EdU细胞增殖检测试剂盒的重要组成部分。

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    避免反复冻融。如短时间内需多次重复使用,请于4℃避光保存,有效期半年。使用前须知该试剂是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。实验准备1、盖玻片2、1×PBS()(用DEPC水配置)3、含TritonX-100的PBS(用DEPC水配置)4、甘氨酸溶液(2mg/ml)(用DEPC水配置)5、培养板或培养皿实验参考96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板EU培养基100μl200μl300μl500μl1ml染色反应液100μl200μl300μl500μl1ml实验步骤(以96孔板,HK2贴壁细胞为例)细胞培养取对数生长期细胞,以每孔4×103~1×105细胞接种于96孔板中,培养至正常状态。EU标记1、将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EU溶液,制成2×EU标记培养基;2、提前将2×EU标记培养基预热,然后等体积加入到细胞原有培养基中,获得1×EU溶液,其中EU的终浓度为500μM;注:1)我们不建议替换全部培养基,因为这样可能会影响细胞增殖的速度;2)配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜;3、每孔加入300μl含EU培养基孵育细胞2小时,弃培养基。

EdU法细胞增殖成像分析试剂盒的功能和实验建议中文名称细胞增殖成像分析试剂盒(EdU法)(绿色荧光)货号KTA2030规格¥500/50T背景资料:细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗药物效果的基础实验手段。精确的检测细胞增殖方法是BrdU法。EdU法检测试剂盒是Brdu方法的性突破。EdU(5-溴-2-脱氧尿嘧啶)试剂盒是一种嘧啶类似物,可以在DNA合成期整合入DNA双链。实验建议细胞增殖成像分析试剂盒(EdU法)(绿色荧光),是BrdU方法的**性突破试剂盒组分:EdU(10mM)、AbFluor488叠氮化物上海东寰与您分享EdU细胞增殖检测试剂盒对如今市场的影响。

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EdU与T非常相似,而EdU染料只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免样品损伤,而且无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更准确地反映DNA复制活性。EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性,适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究,尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。与BrdU检测方法相比,EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU细胞增殖检测试剂盒如何发挥重要作用?湖北提供EdU细胞增殖检测试剂盒厂家

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细胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛细胞固定液,室温培养30分钟,弃固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,摇床孵育5分钟,以中和过量的多聚甲醛;(c)弃甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室温清洗5分钟;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100细胞通透液,室温通透10分钟,弃细胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室温清洗5分钟;该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测。湖南咨询EdU细胞增殖检测试剂盒原理

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