上海如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒优势

    荧光试剂请避光保存。反应缓冲液10X1ml催化剂溶液25x400ulTAMRA红色荧光溶液400x25ul缓冲添加剂粉末200mgHoechstX20ul使用前须知该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测，适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理，固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测。实验步骤(以24孔板，HK2贴壁细胞为例)EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU标记培养基；(b)提前将2xEdU标记培养基预热，然后等体积加入到细胞原有培养基中，获得lxEdU溶液，其中EdU的终浓度为10uM；注：1)我们不建议替换全部培养基，因为这样可能会影响细胞增殖的速度；2)配置好的培养基建议现用现配，用量以没过细胞为宜；(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时，弃培养基；注：1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态；2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次，毎次5分钟，以除去未掺入DNA的EdU残留。注：贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。细胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛细胞固定液，室温培养30分钟，弃固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸。EdU细胞增殖检测试剂盒怎样使用？上海东寰告诉您。上海如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒优势

本试剂盒使用便捷、兼容性好。本试剂盒只需常用的多聚甲醛固定和Triton X-100穿透，就可以使叠氮化物探针有效进入细胞并发生点击反应，不会影响细胞形态，不会影响基于抗体的免疫荧光和免疫组化检测，也不会影响DNA的荧光染色(如PI染色检测细胞周期、DAPI或Hoechst染料检测细胞核)。而BrdU法为了使大分子的BrdU抗体进入细胞并与DNA上的BrdU结合，需要对双链DNA进行变性处理(如酸变性、热变性或者DNase消化等)，这种变性可能会影响细胞形态，影响后续的免疫荧光和免疫组化检测、DNA的荧光染色等。BrdU法和BeyoClick™ EdU法检测原理的比较参见图2。福建提供EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好使用EdU细胞增殖检测试剂盒的好处有哪些？

    MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTTCellProliferationandCytotoxicityAssayKit)是一种非常经典的细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒，被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。MTT可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物formazan(图1A)。在特定溶剂存在的情况下，可以被完全溶解(图1B)。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度(图2)。细胞增殖越多越快，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒实测效果图。，在细胞培养箱内孵育4小时，显微镜下可见大量结晶状的深紫色产物formazan生成。B.不同数量HeLa细胞在MTT溶液(MTTsolution)加入后4小时的效果图(上图)及深紫色产物formazan生成后加入Formazan溶解液(Formazansolvent)，充分溶解后的效果图(下图)。

EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU检测染料只有BrdU抗体大小的1/500，在细胞内很容易扩散，无需DNA变性（酸解、热解、酶解等）即可有效检测，可有效避免样品损伤，在细胞和组织水平能更准确地反映细胞增殖等现象。EdU染色(a)通过用10:1去离子水稀释10x反应缓冲液进行配制1xEdU反应缓冲液；(b)按照溶解200mg缓冲添加剂溶于1ml去离子水的比例称取适量的粉末进行溶解，即为可用的缓冲添加剂的浓度，建议现用现配；注：缓冲添加剂为白色粉末，较难准确称量，称量范围可稍微放宽，但是不应超过±20%，且该粉末较易氧化，使用后请旋紧管盖，如试剂出现棕黄色，则需报废或更换。EdU细胞增殖检测试剂盒的特点是什么？上海东寰告诉您。

    EdU细胞増殖检测试剂盒(红色荧光)使用说明产品简介细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要指标。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物，其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中，通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应，把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面，这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性，广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性，只需温和的细胞固定化和透化处理，能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点，操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似，而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散，无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)，可有效避免样品损伤，而且无需抗原抗体反应，能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。试剂盒组分产品编号试剂浓度试剂量保存条件EdU溶液1000X40ul室温运输，4℃长期储存，勿冻存。使用EdU细胞增殖检测试剂盒前的安全检查。上海如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒优势

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EdU细胞增殖分析试剂采用click化学技术，可为新合成的DNA检测与定量提供比传统BrdU方法更的替代物。当在DNA合成过程中掺入修饰的核苷EdU（5-乙炔基-2-脱氧尿苷）时，可以通过快速的“click化学”反应检测到它，并且对细胞的破坏作用小。点击化学相比于BrdU具有更简便、更快速、更易操作的优点。与使用溴脱氧尿苷(BrdU)检测法不同，Click-iTEdU检测法不是基于抗体，因此并不需要DNA变性以检测掺入的核苷。此外，Click-iTEdU可以与R-PE、R-PEtandems和GFP等荧光蛋白复用提高效力。当您平行比较这些方法时，Click-iTEdU和InvitrogenClick-iTPlusEdU在测定细胞增殖方面的优势是显而易见的。上海如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒优势