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pirb-cki)pirb基因敲入的小鼠,pirb基因敲入到特异性组织或细胞中。其中pirb-cwt小鼠表达cre,但不含有loxp-pirb等位基因,pirb-chetandpirb-cki小鼠表达cre并分别含有一个或者两个loxp-pirb等位基因。其中f3代杂交小鼠纯合子/杂合子鉴定所用的pcr引物如下:f3:5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’r3:5’-atactccgaggcggatcacaa-3’f5:5’-gcatctgacttctggctaataaag-3’homozygotes:644bpheterozygotes:644bp/453bpwildtypeallele:453bp组织特异性的基因敲入也可以通过加入另一对引物,用pcr来验证:pcrforconstitutivekiallele:f6:5’-ggcaacgtgctggttattgtg-3’r6:5’-ggctgtactctgaggataggcttag-3’f7:5’-agatctgcaagctaattcctgc-3’withcki:1180bp/215bpconstitutivekiallele:303bp注意:如果dna的样本不够纯,或者pcr的延伸时间不够长,可能扩增不出来1180bp的产物。cre阳性pcr鉴定所需的引物如下:forward:5’-gaacgcactgatttcgacca-3’reverse:5’-gctaaccagcgttttcgttc-3’creamplicon:204bp。序列表西安医学院pirb基因敲入的小鼠动物模型及其构建方法(artificialsequence)1ggcaggcttaaaggctaacctgg23223dna人工序**定研究疾病目的了解影响疾病发生的内在与外在因素。皮肤疾病动物模型建模公司
来源:ZSCI基础研究中如果加入动物实验部分则使得研究更加趋于完善,投稿时中稿率也相应会增加。但将动物实验做好却不是一件容易的事情。这篇文章主要讲动物模型的构建技术,把骨科、糖尿病相关的动物模型构建做了一个***的技术汇总,建议先码后读,文章内容有部分做了简化,想看详细讲解可以在文末获取课件!一、骨科相关动物模型1.骨关节炎1)骨关节炎模型构建方法(诱发性)-关节腔内手术法、关节腔注射法。2)模型评分标准①SafraninO染色与OARSI评分(PMID:31046827、30942801)②HE染色与OARSI评分(PMID:30609097)③SafraninO染色与Mankin评分(PMID:30609097)2.骨质疏松症1)骨关节炎模型构建方法去趋法模型PMID:31037128实验动物:小鼠方法:在戊巴比妥麻醉下进行双侧卵巢切除术以诱导骨质疏松症,同时对照组小鼠*进行卵巢外置但未切除。2)模型检测指标(PMID:31037128)①HE染色②Micro-CT③TRAcP染色④Micro-CT相关指标检测3.类风湿性关节炎类风湿性关节炎(RA)是一种慢性自身免疫性疾病状态,其特征是滑膜增生,软骨退化和脊椎关节的骨侵蚀4.强直性脊柱炎1)强直性脊柱炎模型构建方法2)模型检测指标。江苏小鼠疾病动物模型建模这类动物疾病模型是指各种疾病共同性的一些病理变化过程的模型。
APOE-/-鼠左颈动脉结扎糖尿病模型目的:用APOE-/-鼠做左颈动脉结扎后注射STZ造糖尿病模型一、材料:动物:APOE-/-鼠;试剂:STZ、柠檬酸缓冲液;器械:眼科剪、眼科弯镊、眼科剪、手术剪、手术镊、6-0非吸收缝合线、4-0缝合线;二、颈动脉结扎模型建立:APOE-/-鼠做左颈动脉内颈支脉和外颈支脉结扎,其中外颈支脉结扎点需要保持甲状腺支脉于左颈动脉畅通;三、糖尿病模型建立:1、柠檬酸缓冲液配制:A液:柠檬酸g+双蒸水100ml;B液:柠檬酸三钠g+双蒸水100ml;A液与B液1:混合,调整PH为;2、STZ液配制:取STZ溶于柠檬酸缓冲液中,浓度为10mg/ml,um滤头过滤,避光,现配现用,10min内使用;术前禁食12h,100mg/kg腹腔注射SZT液,连续2d;四、检测:颈动脉组织HE。
本能发明的另一目的是公开了如上所述的方法制备的鼠慢性背根神经压迫模型的用途是将该模型用于腰椎间盘突出***方法研究和/或影像学检测研究。进一步地,该模型用于与磁性相关的***和/或检测方面的研究,比如经颅磁刺激和核磁共振。本发明利用压迫元件插入腰椎椎间孔,模拟腰椎间盘突出后突出物对神经根的持续慢性的机械压迫症状,有益效果有:1.应用机械压迫神经根模拟腰椎间盘突出病理,症状的病因学与临床情况接近;2.相关的疼痛行为类似于特定的慢性疼痛症状,且易于客观测量;3.制备方法简单,对动物损伤小,稳定性好,成功率高;4.造模关键材料压迫元件不受磁场干扰,无在磁场作用下移位风险,有利于后续对动物进行磁疗,经颅磁刺激等***及核磁共振等检查;5.造模关键材料压迫元件不影响磁场,不会对***仪器和核磁共振等仪器产生不良影响;6.此方法获得的模型由于采用了h62黄铜或聚乳酸材料制备的压迫元件,使得研究方法与检测方法不受磁场作用限制,丰富了腰椎间盘突出临床前研究的***方法及影像学检测,为临床研究提供理论依据。以下将结合附图对本发明作进一步说明,以充分说明本发明的目的、技术特征和技术效果。附图说明图1是压迫元件插入椎间孔的结构示意图。疾病动物模型建模怎么做?
pirb的功能和下游抑制性信号通路仍然未被阐明,因此迫切需要pirb的细胞和动物模型。目前对于pirb基因功能的研究,多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide,pep)和抑制剂,或者采用慢病毒转染。前者受到是否能够透过血脑屏障和抑制剂效率的影响,后者慢病毒转染在原代细胞和在体的转染效率比较低,使研究pirb的功能受到极大的限制。为解决这些问题,我们通过crispr/cas9技术建立了pirb基因敲入小鼠,将pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位点,为研究pirb在免疫系统或者神经系统的作用和机制提供了很好的工具。技术实现要素:本发明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠动物模型。哪里可以做动物模型?杨浦区疾病动物模型建模价格
动物模型作为人类疾病的缩影。皮肤疾病动物模型建模公司
1、动物模型名称:碱烧伤致角膜损伤大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:160-200g6、实验动物环境:SPF级,1、实验方法:氢氧化钠致大鼠角膜化学性损伤。大鼠用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,用干棉棒拭去结膜囊多余液体,将统一规格直径3mm的圆形滤纸片浸入1mol/LNaOH溶液中20s,饱和后取出置于干燥滤纸上1秒以吸去过多的碱液,将滤纸片贴敷于大鼠右眼角膜**90s后移去,立即用灭菌水冲洗结膜囊及角膜2min。2、检测标准:肉眼或裂隙灯下观察到角膜有损伤。皮肤疾病动物模型建模公司
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