浙江口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒价格
EdU细胞增殖分析试剂采用click化学技术,可为新合成的DNA检测与定量提供比传统BrdU方法更的替代物。当在DNA合成过程中掺入修饰的核苷EdU(5-乙炔基-2-脱氧尿苷)时,可以通过快速的“click化学”反应检测到它,并且对细胞的破坏作用小。点击化学相比于BrdU具有更简便、更快速、更易操作的优点。与使用溴脱氧尿苷(BrdU)检测法不同,Click-iTEdU检测法不是基于抗体,因此并不需要DNA变性以检测掺入的核苷。此外,Click-iTEdU可以与R-PE、R-PEtandems和GFP等荧光蛋白复用提高效力。当您平行比较这些方法时,Click-iTEdU和InvitrogenClick-iTPlusEdU在测定细胞增殖方面的优势是显而易见的。EdU细胞增殖检测试剂盒多少钱?上海东寰告诉您!浙江口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒价格
摇床孵育5分钟,以中和过量的多聚甲醛;(c)弃甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室温清洗5分钟;(d)每孔加入300ulTritonX-100细胞通透液,室温通透10分钟,弃细胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室温清洗5分钟;染色反应液组分500ul1ml2ml5mlIX反应缓冲液430ul860ulmlml催化剂溶液20ul40ul80ul200ulTAMRA红色荧光溶液ulul5ulul缓冲添加剂50ul100ul200ul500ul(d)每孔加入100ul配置好的检测混合液,以覆盖细胞为宜,避光、室温孵育30分钟。(e)弃染色反应液,加入300ulTritonX-100细胞渗透液清洗2-3次,每次10分钟;(f)弃细胞渗透液,用PBS洗两次,每次5分钟。DNA染色(a)将Hoechst33342用PBS溶液1:1000进行稀释得到终浓度为5ug/ml的lxHoechst染色液;(b)每孔加入300ul1xHoechst染色液,室温避光孵育20-30分钟后,弃染色液;(c)每孔加入300ulPBS洗细胞两次,去掉洗液。上海咨询EdU细胞增殖检测试剂盒原理上海EdU细胞增殖检测试剂盒的发展趋势。
Jurkat细胞只用EdU标记(左列),或在标记EdU0min用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)处理(右列),2小时后染色,然后通过流式细胞仪进行检测。从流式结果图中可以看出,EdU标记的细胞有较高比例的绿色荧光阳性细胞,呈现绿色荧光阴性(弱染色)和阳性(强染色)的两个峰,分别对应于未增殖细胞和增殖细胞。经过Hydroxyurea处理的细胞,绿色荧光阳性的细胞几乎完全消失,剩下一个绿色荧光阴性的峰。Hela细胞只用EdU标记(左列),或在标记EdU0min用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)处理(右列),2小时后染色(步骤染Hoechst,方便观察增殖细胞比例),然后通过荧光显微镜进行检测。镜下可见,*EdU标记的细胞有一部分染上绿色荧光的增殖细胞,未增殖细胞的细胞核呈蓝色单染。
该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测。建议染色完成后立即进行荧光显微镜拍照观察;如果条件限制,请于4°C条件下避光湿润保存3天之内完成拍照。若为细胞爬片或涂片,可使用抗荧光淬灭封片剂进行封片后于4°C条件下保存及拍照检测。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确EdU细胞增殖检测试剂盒运用再哪些领域?
上海东寰生物科技有限公司即核苷渗入法。以前常用的核苷渗入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸类似物)法,但BrdU法的缺点是需要变性DNA后才能与抗体结合,导致了DNA双链结构的破坏,影响了其他染料的结合染色,导致染色弥散,准确性降低等问题。EdU法作为新型的核苷渗入法具有以下优点:安全—–不使用[3H]thymidine,无放射性污染。简单—–基于小分子化学反应的检测方法,简单高效,需三步:EdU孵育;细胞固定;荧光检测。无需DNA变性和孵育抗体。上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒的运用方式。河南哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒公司
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EdU细胞増殖检测试剂盒(红色荧光)使用说明产品简介细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要指标。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免样品损伤,而且无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。试剂盒组分产品编号试剂浓度试剂量保存条件EdU溶液1000X40ul室温运输,4℃长期储存,勿冻存。浙江口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒价格
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