长宁区Merck离心浓缩管批发

时间:2020年09月18日 来源:

浓度:当需要截留的样品浓度很低时,通量通常不受浓度影响。操作过

程中,随着溶质浓度的升高,增加的粘滞性和极化将导致通量降低。

温度:粗体,作为获得压力、浓度一样的词条通常增加操作时的温度可

以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%,同时溶液粘度降低。

实践中一般是以样品和设备能耐受的比较高温度来操作。

pH:改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构,蛋白尤其如此。在蛋白的 pI

值蛋白会沉淀,产生堵塞和得率损失。

污垢:溶液中除了目的分子造成的浓差极化,还有其它小颗粒和分子会

在膜上富集和沉淀,逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中,形成结晶和沉淀。 那么 超滤浓缩管施工的优势都有哪些呢?长宁区Merck离心浓缩管批发

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脱盐/缓冲液置换并浓缩

5次低速离心,总耗时~35分钟

1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。

2. 优化选做:加入1.5 mL用于置换的缓冲液,1,000×g离心1 min。

3. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(有5种截留分子量规格可选)。

4. 加入1.5 mL样品,4,000×g离心15 min进行浓缩。

5. 加入1.5 mL需要置换的缓冲液,4,000×g离心15 min,换液的同时进行浓缩。

6. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收处理好的蛋白。

* 进行较大体积操作时,可以适当延长离心时间,也可参考Amicon® Pro完整操作说明书

查看详细信息。 嘉定区默克2ml超滤浓缩管哪家好超滤浓缩管的各种系列应用领域还是不一样的。

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用超滤对分子进行分级

通过选定截留分子量的超滤操作能精确地将混在大分子中的小分子去

除的想法常常不切实际。事实上,膜的规格描述是基于截留而非通过

的性质。一项实验中,采用 100k NMWL 滤膜,大于 100kDa 的分子截

留率 >90%,但这时比膜孔径小的分子并不是完全自由地通过滤膜,

75kDa 的分子截留率为 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的

溶液中的各 种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实

践中,如果要分离两种大分子,它们之间的分子量差异应该达到 10 倍

以上,或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间,则可达到比较理想的

分离。如果蛋白溶液较为稀释,低压下操作也有助于达到更好的效果。

高通量超滤

MultiScreen®超滤膜板

MultiScreen® 超滤膜板是实现高通量生物样品处理的必备工具,能配合自动化工作平台对样品进行纯化、浓缩、脱盐或分析前去除蛋白等操作。Millipore 提 供 3 种带有低吸附超滤膜的 96 孔板,在高通量操作时样品吸附损失小而得率高。

优点与应用:

高通量:96 孔超滤膜板和 384 孔膜板

可靠:低蛋白吸附,蛋白得率高,孔间数据均一性好

功能多样:样品体积 50-500μL 适用,兼容各种 96/384 孔板标准操作设备或自动化平台

用于高通量蛋白鉴定与筛选的浓缩、脱盐,以及样品分析前大分子蛋白去除

也可用于核酸(DNA/RNA/PCR 产物 / ***)样品制备及二代测序样品制备 超滤浓缩管具体报价多少呢。

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基于 Millipore® 先进的膜过滤技术,默克密理博开发了独特的腺***及慢***纯化与浓缩试剂盒。试剂盒中已经包括了必需的 Steriflip® 过滤装置和超滤管,能在短短 2 小时内安全、快捷地获得高产***。

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 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(有5种截留分子量规格可选)。

6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。孵育5 min。

7. 4,000×g离心15 min。

8. 加上蛋白样品**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min,置换缓冲液的同时进行浓缩。

9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。

* 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管~1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法,但溶液体积和离心时间等需要略加优化。

用Protein A或G对抗体进行亲和纯化 长宁区Merck离心浓缩管批发

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