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蛋白亲和纯化（无需换液和浓缩）

* 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管～1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法，但溶液体积和离心时间等需要略加优化。

3次低速离心，总耗时~75分钟（含60分钟孵育时间）

1. 在Amicon® Pro上样池中加入至多1000μL亲和纯化树脂（沉降的柱床体积）和至多9 mL漂洗缓冲液。1,000×g离心1 min平衡树脂。（柱床）树脂量≥ 500μL时采用2,000×g离心4 min。

2. 加入至多9 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h*，其间可温和搅动促进结合。 超滤浓缩管直销公司。普陀区Merck离心浓缩管联系电话

对于慢***推荐Amicon® Ultra 100kDa; 对于腺***推荐Amicon® Ultra 50kDa。具体的操作步骤可以参考***浓缩纯化试剂盒FTLV00003和FTAV00003的产品使用说明书。另提供AAV（腺相关***）的制备方法供参考。

去污剂因其独特的性质，当浓度大于临界微团浓度（Critical Micelle Concentration, CMC）时，去污剂分子会聚集形成微团而改变分子构象，这有可能会影响去污剂的去除效果。

Amicon® Ultra超滤膜含有微量甘油。如果此成分干扰分析，可用缓冲液或Milli-Q®水预清洗。如果干扰仍然存在，用0.1 N NaOH清洗，然后用缓冲液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。 长宁区离心浓缩管规格超滤浓缩管的各种系列应用领域还是不一样的。

 加入漂洗缓冲液（体积是树脂柱床体积的7.5倍）并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。

4. 使用一个新的50 mL离心管作为收集管。

5. 加入洗脱缓冲液（体积是树脂柱床体积的5倍）与树脂混匀并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。回收管中即纯化好的蛋白。

6. 如果是纯化抗体，在纯化产物中加入中和缓冲液。

* 进行较大体积操作时，可以延长结合反应时间，并用胶带密封上样池上沿以便颠倒混匀操作。离心前去除胶带即可。选购不带Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管的Amicon® Pro时请使用目录号ACS500024。

脱盐/缓冲液置换并浓缩

5次低速离心，总耗时~35分钟

1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。

2. 优化选做：加入1.5 mL用于置换的缓冲液，1,000×g离心1 min。

3. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（有5种截留分子量规格可选）。

4. 加入1.5 mL样品，4,000×g离心15 min进行浓缩。

5. 加入1.5 mL需要置换的缓冲液，4,000×g离心15 min，换液的同时进行浓缩。

6. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管，1,000×g离心回收处理好的蛋白。

* 进行较大体积操作时，可以适当延长离心时间，也可参考Amicon® Pro完整操作说明书

查看详细信息。 超滤浓缩管的系列有很多。

膜的吸附损失

对于浓度很低及珍贵的样品，除了考虑截留效率和操作方便外，额外

要关注的是采用的超滤膜及设备对目标蛋白的潜在非特异性吸附损

失。不同膜材质对生物分子吸附程度不同，默克密理博的 Ultracel® 再

生纤维素膜在各类膜中对生物分子吸附**小，是 Amicon® Ultra 超滤管

等超滤产品成为优先的**技术关键之一。滤膜和装置表面对溶质的

吸附对样品收率会产生直接影响，所以如果希望尽可能提高得率，就

应该考虑采用较小的设备和膜面积。小量的、较为稀释的样品应该选

用膜面积小的装置，同时保证一定的流速。默克密理博设计了一系列

离心式或搅拌式装置，配合不同的膜面积、不同的截留分子量的切向

流系统，支持您获得理想的处理效果。 超滤浓缩管批发价格是多少呢。嘉定区默克4ml超滤浓缩管批发

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大体积样品浓缩

Centricon® Plus-70离心浓缩装置

用于15-70mL生物溶液的快速浓缩等操作。70mL的样品在25分钟内浓缩至350μL；死体积设计确保样品不会被离干而损失。依起始材料不同、起始体积不同，样品可被浓缩50-200倍。低吸附竖向再生纤维素超滤膜及双超滤柱设计，加快处理速度；反转离心操作进一步使宝贵的浓缩样品回收率得以提高。这个产品替代传统的透析、冻干、沉淀或搅拌式浓缩等技术和方法，是非常方便的工具。

特别推荐的应用：

色谱洗脱产物的浓缩和脱盐

单克隆抗体浓缩

培养上清中蛋白和***的浓缩

组织匀浆液和细胞裂解液澄清 普陀区Merck离心浓缩管联系电话

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