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蛋白如果浓缩过快或者过度浓缩都有可能引起蛋白沉淀。建议蛋白浓缩后的**终浓度不超过

20mg/ml。对于对浓缩速度敏感而容易沉淀的蛋白，建议的改进方法是：

1）离心力降为推荐离心力的30%-50%

2）改用截留分子量更大的超滤管（如原本选用10k，此时可以选择30k） 3）在浓缩过程中取出超滤管，用***头反复吹吸几次后再继续浓缩

Amicon® Ultra超滤膜中含有微量甘油。如果出现这种情况，请先用0.1 N NaOH清洗再离心。***用缓冲液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。清洗后的滤膜应立即使用，如暂时不用，请保持润湿状态，避免重新干燥。 您知道益启生物公司的 超滤浓缩管系列都有哪些吗？杨浦区默克0.5ml超滤浓缩管一级代理

Amicon® Pro纯化超滤管简明操作指南

亲和纯化

用于纯化GST•Tag，His•Tag等重组表达蛋白及抗体，适合～0.5 mL裂解液操作

6次低速离心，总耗时~100分钟（含65分钟孵育时间）

1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂（50%悬浊液）和1.5 mL漂洗缓冲液。

1,000×g离心1 min。

2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h，其间可温和搅动促进结合。

3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。

4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液，1,000×g离心1 min。 常州默克超滤浓缩管哪家好超滤浓缩管服务电话是多少呢。

外泌小体（Exosome）是一种囊泡结构，直径通常在30-150nm，常见于正常体液和病理样本，培养细胞也可分泌。研究人员已经在血液、唾液、尿液、母乳等中发现外泌小体，其运载的蛋白和核酸涉及其细胞间物资、信息交流，影响和调控着多方面的生理功能，包括**的发生、免疫促进、凋亡调控、血管的生成、炎症的反应及发育和分化等。由于在体液中出现，外泌小体对于临床生物标志物检测来说特别有利，成为体外诊断、biomarker研究的新热点。

无血清样品选择 3kDa 孔径是为了尽可能提高外泌体的回收率。

有血清样品选择100kDa/500kDa孔径是为了尽可能去除细胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌体的白蛋白造成的影响。

研究者可根据样品的粘稠程度，以及需要制备的目标外泌体 / 囊泡 / 颗粒的大小分布来选择和优化超滤孔径(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa)，以便达到更好的得率和操作体验。

样品体积大于 30mL 时可以考虑用超滤杯或 Centricon-70 超滤管，请注意搅拌式超滤杯在200mL 以内时吸附损耗可能较离心式超滤管略偏高。如需进一步提高特定外泌体的纯度，可选用包被相应抗体的磁珠进行亲和纯化精制。 购买超滤浓缩管就找益启生物公司。

 加入漂洗缓冲液（体积是树脂柱床体积的7.5倍）并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。

4. 使用一个新的50 mL离心管作为收集管。

5. 加入洗脱缓冲液（体积是树脂柱床体积的5倍）与树脂混匀并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。回收管中即纯化好的蛋白。

6. 如果是纯化抗体，在纯化产物中加入中和缓冲液。

* 进行较大体积操作时，可以延长结合反应时间，并用胶带密封上样池上沿以便颠倒混匀操作。离心前去除胶带即可。选购不带Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管的Amicon® Pro时请使用目录号ACS500024。 上海 超滤浓缩管代理销售推荐益启生物公司。普陀区默克离心浓缩管代理价

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