普陀区Merck离心浓缩管一级代理
温和的高浓度样品浓缩、脱盐装置
Amicon® stirred cells 搅拌式超滤杯
Amicon® stirred cells 搅拌式超滤装置对于高浓度(达 **分子溶液快速浓缩和脱盐提供了的可行方法。做蛋白浓缩时,向超滤装置中导入气压,大于超滤膜截留分子量的溶质将被截留在容器内,水及小于超滤膜截留分子量的溶质(如盐分)会被过滤并排出。加压拌式设计防止浓缩的样品发生沉淀,比离心超滤温和,对于高浓度、易沉淀样品的进一步浓缩同时脱盐等应用是比较好选择。配套选择的超滤膜可以灭菌并经处理后反复使用,更为经济。 一个好的 超滤浓缩管代理销售需要具备哪些特点您了解吗?普陀区Merck离心浓缩管一级代理
如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话,那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性(构象差异)而影响浓缩效果,建议选用上一分子量级别的超滤管(如原本选用30k,此时可以选择10k)。
2)如果目的样本也不在滤过液中,那么:
a)蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL? b)用来确定样本浓度的方法是什么?是否可信?
c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。 普陀区默克4ml超滤浓缩管代理价格上海超滤浓缩管供应商。
特点与优点
温和的磁力搅拌避免发生聚集和剪切变性
所有型号都可以高压灭菌
提供 3 种规格共选择,用于浓缩 3mL - 400mL 及更大体积样品
浓度达 10% 的溶液依然可以获得高流速
应用:
大分子(如蛋白、酶、抗体和***)溶液的浓缩和缓冲液置换
渗滤(Diafiltration)模式
非连续渗滤是换液的一种操作方法,即先浓缩到一定浓度再稀释到起始的体积,并多次重复这个操作,直到溶液中的盐或溶剂被
去除或降到需要的浓度。而连续渗滤(保持恒定体积)是将超滤杯经转换装置(目录号6003)与补液杯(目录号6028)连接,
使供气压和液体流转。连接有转换装置时,不必停下系统的运转就可以即时进行浓缩和渗滤之间的切换,将两种操作模式的优点
集中在一起,有利于敏感的(蛋白)样品在**恒定、温和的条件下高效换液。
首先,Amicon® Ultra超滤管的蛋白比较低起始浓度为25ug/ml。请确保样本的起始浓度大于这个浓度。其次,如果问题仍然出现,请不要丢弃样本滤过液以便用于分析可能的原因:
1)如果目的样本在滤过液中,那么请排查:
a)是否选择了合适截留分子量的超滤管(目的蛋白分子量的1/2或者1/3)?
b)使用的离心力是否是在限定范围内?如果使用的是rpm,请换算成相应的g离心力,具体换算方法请垂询。
c)离心机**近是否有校准过?
d)是否***尝试这个蛋白? 超滤浓缩管的各种系列应用领域还是不一样的。
核苷酸截留分子量(NCO)
超滤膜的 NMWL 是用球形蛋白标定的,适合各种蛋白研究,但在核酸
和多糖纯化时则要考虑更多因素。这些分子的棒状的三维结构容易漏
过,相对于球形蛋白需要更致密的膜(截留分子量更小)。所以选择
滤膜是更多考虑的是核苷酸长度而非分子量。
浓差极化
浓差极化实质是溶质累积在膜表面造成的堵塞,产生除了膜本身截留分
子量以外的过滤限制。当溶质浓度较高时,会形成相当于第二层滤膜作
用的胶体层,干扰分子通过滤膜,同时降低流速。pH 值、缓冲液的成分
也会影响目的分子的状态而使浓差极化现象加剧或减轻。
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上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(有5种截留分子量规格可选)。
6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。孵育5 min。
7. 4,000×g离心15 min。
8. 加上蛋白样品**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min,置换缓冲液的同时进行浓缩。
9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。
* 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管~1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法,但溶液体积和离心时间等需要略加优化。
用Protein A或G对抗体进行亲和纯化 普陀区Merck离心浓缩管一级代理
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