普陀区默克超滤浓缩管联系电话

时间:2020年10月19日 来源:

特别推荐应用(提供实验报告作为参考)

Microcon®超滤管:

Microcon®PCR 级超滤管:

• 法医鉴定分析的DNA样品制备

• 生物大分子样品浓缩、脱盐及缓冲液置换

• 体外合成mRNA的纯化

• 以人mRNA或总RNA制备荧光DNA探针

• 游离标记物的去除

• 纳克级核酸的定量回收及大片段DNA完整性研究

• 替代乙醇沉淀,离心法高效浓缩基因组DNA

应用指南

典型应用

肽及生长因子浓缩

蛋白浓缩与脱盐

电泳等操作前的蛋白样品浓缩

HPLC前去除蛋白

组织培养抽提物和细胞裂解液中大分子成分的纯化

生物样本浓缩(抗原,抗体,酶等)

从含有SDS(或无SDS)的缓冲液中浓缩gDNA

核酸浓缩与脱盐(单链或双链核酸)

去除标记核苷酸

去除标记氨基酸

从扩增的DNA产物中去除引物

克隆前去除连接序列(linker) 超滤浓缩管和其他的空压机有什么区别呢?普陀区默克超滤浓缩管联系电话

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通量(超滤效率)及其影响因素

超滤过程中需要在速率和回收率之间平衡以期获得比较好的效果。滤膜的

通量的定义是流量除以面积,使用高 NMWL 滤膜可以增加通量,但同时

会降低回收率。选择膜和装置时需要同时考虑截留分子量和通量。而参

与影响通量的因素很多,包括:

压力:较为稀释的蛋白溶液或胶体悬液进行超滤时,流量随着跨膜压力

(TMP)的增大而增加。正压条件下操作,如 Stirred Cell 搅拌式超滤杯,

这种因素影响较为明显。如果极化影响***,通量会达到一个平台,甚

至可能随着压力的增加而降低。 黄浦区Merck离心浓缩管咨询报价买超滤浓缩管 找益启生物公司。

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截留

截留有时也称为排阻。水合程度、离子和空间位置效应会导致分子量相近

的分子表现非常不同的截留状态。许多生物大分子在不同的 pH 或离子强

度改变的情况下倾向于聚集或改变构象,因此其有效大小可能比 “天然”

分子大恨多,从而导致排阻增加。比如,有些蛋白质在某些缓冲液条件下

会发生多聚化,而另一些则发生解聚(如血红素蛋白)成亚基。这使选择

合适截留分子量的膜变得复杂。以默克密理博的经验,我们通常推荐选择

为目的分子大小一半的膜作为尝试的优先,再根据实际情况加以调整。

Amicon® Ultra超滤管的膜材质为默克密理博特有的 Ultracel® 再生纤维素膜,生产工艺严格,截留分子量明确而精细,蛋白吸附损失基本上大概小。

如果要用超滤的方法分离两种蛋白,那么这两个蛋白的大小需要相差多少?

按照经验,建议两个蛋白的分子量要相差一个数量级(10倍)。

Amicon® Ultra与70%乙醇是兼容的,但是对灭菌处理的具体方法没有做相关的测试,所以无法提供更进一步的参考信息。

Amicon® Ultra都是采用热封设计,不可以用高压高温灭菌。

不保证超滤管不包含RNA酶,建议用0.1% DEPC在37度浸泡2小时,以完全灭活RNA酶;残留的DEPC可以用Milli-Q®超纯水洗涤除去。 上海 超滤浓缩管代理销售推荐益启生物公司。

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膜的吸附损失

对于浓度很低及珍贵的样品,除了考虑截留效率和操作方便外,额外

要关注的是采用的超滤膜及设备对目标蛋白的潜在非特异性吸附损

失。不同膜材质对生物分子吸附程度不同,默克密理博的 Ultracel® 再

生纤维素膜在各类膜中对生物分子吸附**小,是 Amicon® Ultra 超滤管

等超滤产品成为优先的**技术关键之一。滤膜和装置表面对溶质的

吸附对样品收率会产生直接影响,所以如果希望尽可能提高得率,就

应该考虑采用较小的设备和膜面积。小量的、较为稀释的样品应该选

用膜面积小的装置,同时保证一定的流速。默克密理博设计了一系列

离心式或搅拌式装置,配合不同的膜面积、不同的截留分子量的切向

流系统,支持您获得理想的处理效果。 上海超滤浓缩管批发商。杨浦区Millipore超滤浓缩管哪家好

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核苷酸截留分子量(NCO)

超滤膜的 NMWL 是用球形蛋白标定的,适合各种蛋白研究,但在核酸

和多糖纯化时则要考虑更多因素。这些分子的棒状的三维结构容易漏

过,相对于球形蛋白需要更致密的膜(截留分子量更小)。所以选择

滤膜是更多考虑的是核苷酸长度而非分子量。

浓差极化

浓差极化实质是溶质累积在膜表面造成的堵塞,产生除了膜本身截留分

子量以外的过滤限制。当溶质浓度较高时,会形成相当于第二层滤膜作

用的胶体层,干扰分子通过滤膜,同时降低流速。pH 值、缓冲液的成分

也会影响目的分子的状态而使浓差极化现象加剧或减轻。

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