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时间:2020年10月27日 来源:

Amicon® Ultra超滤管的膜材质为默克密理博特有的 Ultracel® 再生纤维素膜,生产工艺严格,截留分子量明确而精细,蛋白吸附损失基本上大概小。

如果要用超滤的方法分离两种蛋白,那么这两个蛋白的大小需要相差多少?

按照经验,建议两个蛋白的分子量要相差一个数量级(10倍)。

Amicon® Ultra与70%乙醇是兼容的,但是对灭菌处理的具体方法没有做相关的测试,所以无法提供更进一步的参考信息。

Amicon® Ultra都是采用热封设计,不可以用高压高温灭菌。

不保证超滤管不包含RNA酶,建议用0.1% DEPC在37度浸泡2小时,以完全灭活RNA酶;残留的DEPC可以用Milli-Q®超纯水洗涤除去。 您了解 超滤浓缩管的优势吗?黄浦区离心浓缩管商家

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通量(超滤效率)及其影响因素

超滤过程中需要在速率和回收率之间平衡以期获得比较好的效果。滤膜的

通量的定义是流量除以面积,使用高 NMWL 滤膜可以增加通量,但同时

会降低回收率。选择膜和装置时需要同时考虑截留分子量和通量。而参

与影响通量的因素很多,包括:

压力:较为稀释的蛋白溶液或胶体悬液进行超滤时,流量随着跨膜压力

(TMP)的增大而增加。正压条件下操作,如 Stirred Cell 搅拌式超滤杯,

这种因素影响较为明显。如果极化影响***,通量会达到一个平台,甚

至可能随着压力的增加而降低。 江苏Merck离心浓缩管报价超滤浓缩管的好处都有很多。

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操作模式

常规与切向流 : 常规溶液过滤(NFF)中液体在压力或真空驱动下直接流

过膜。大的颗粒物被膜截留并堆积在膜上,小分子则通过膜流出。NFF 常

用于无菌过滤、澄清预过滤及*** / 蛋白样品制备等。切向流过滤(TFF)

液体流过时与膜表面呈一定角度,被膜阻挡的大颗粒物不会累积在膜表

面,而且还会被切向流从膜表面扫除,因此 TFF 成为按分子大小不同分离

的主流方法。TFF 在大体积样品处理中是主要的操作方法,而现在,TFF

技术被用于 Amicon® Ultra 离心式超滤管的设计中,使小体积样品的浓缩

和分离操作也变得更加方便。

离心方式的超滤方法进行溶液置换也被称为“渗滤”,操作时样品首先被浓缩,继而加入新的溶液,再次浓缩时,原溶液已经被换成选定的溶液。


化学相容性与溶出

样品的化学背景有时很多样而复杂,过滤的过程中很重要的一点是操作过程不应给样品带来新的污染。所以滤膜和装置与样品接触的其它部分都不能与样品中的化学成分发生反应而产生溶出污染。关于默克密理博各种微滤、超滤产品的化学相容性请参考产品使用说明书或垂询技术支持专线 。回收率及其重要性超滤的**终目的常常是很大程度地回收目标溶质,但膜的很多特性会对这一目的产生影响。影响回收的因素包括:• 标称分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)• 截留 • 浓差极化 • 通量 超滤浓缩管代理销售哪家比较靠谱。

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对于慢***推荐Amicon® Ultra 100kDa; 对于腺***推荐Amicon® Ultra 50kDa。具体的操作步骤可以参考***浓缩纯化试剂盒FTLV00003和FTAV00003的产品使用说明书。另提供AAV(腺相关***)的制备方法供参考。

去污剂因其独特的性质,当浓度大于临界微团浓度(Critical Micelle Concentration, CMC)时,去污剂分子会聚集形成微团而改变分子构象,这有可能会影响去污剂的去除效果。

Amicon® Ultra超滤膜含有微量甘油。如果此成分干扰分析,可用缓冲液或Milli-Q®水预清洗。如果干扰仍然存在,用0.1 N NaOH清洗,然后用缓冲液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。 超滤浓缩管的主要优势是什么。南京Merck离心浓缩管代理价

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如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话,那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性(构象差异)而影响浓缩效果,建议选用上一分子量级别的超滤管(如原本选用30k,此时可以选择10k)。

2)如果目的样本也不在滤过液中,那么:

a)蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL? b)用来确定样本浓度的方法是什么?是否可信?

c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。 黄浦区离心浓缩管商家

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