松江区默克15ml超滤浓缩管销售

时间:2020年11月06日 来源:

Amicon® Ultra超滤管的膜材质为默克密理博特有的 Ultracel® 再生纤维素膜,生产工艺严格,截留分子量明确而精细,蛋白吸附损失基本上大概小。

如果要用超滤的方法分离两种蛋白,那么这两个蛋白的大小需要相差多少?

按照经验,建议两个蛋白的分子量要相差一个数量级(10倍)。

Amicon® Ultra与70%乙醇是兼容的,但是对灭菌处理的具体方法没有做相关的测试,所以无法提供更进一步的参考信息。

Amicon® Ultra都是采用热封设计,不可以用高压高温灭菌。

不保证超滤管不包含RNA酶,建议用0.1% DEPC在37度浸泡2小时,以完全灭活RNA酶;残留的DEPC可以用Milli-Q®超纯水洗涤除去。 上海Millipore超滤浓缩管授权代理商!松江区默克15ml超滤浓缩管销售

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如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话,那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性(构象差异)而影响浓缩效果,建议选用上一分子量级别的超滤管(如原本选用30k,此时可以选择10k)。

2)如果目的样本也不在滤过液中,那么:

a)蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL? b)用来确定样本浓度的方法是什么?是否可信?

c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。 上海超滤浓缩管报价您了解 超滤浓缩管的优势吗?

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离心方式的超滤方法进行溶液置换也被称为“渗滤”,操作时样品首先被浓缩,继而加入新的溶液,再次浓缩时,原溶液已经被换成选定的溶液。


化学相容性与溶出

样品的化学背景有时很多样而复杂,过滤的过程中很重要的一点是操作过程不应给样品带来新的污染。所以滤膜和装置与样品接触的其它部分都不能与样品中的化学成分发生反应而产生溶出污染。关于默克密理博各种微滤、超滤产品的化学相容性请参考产品使用说明书或垂询技术支持专线 。回收率及其重要性超滤的**终目的常常是很大程度地回收目标溶质,但膜的很多特性会对这一目的产生影响。影响回收的因素包括:• 标称分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)• 截留 • 浓差极化 • 通量


经典离心浓缩装置

Amicon® Ultra 离心超滤管


反转离心回收

•反转离心回收设计使蛋白样品,特别是小体积样品高效

回收,避免***头吸取造成的样品丢失或操作错误

•0.5mL、2mL 和 70mL 超滤管设计为反转回收模式

样品吸附损失小

•Ultracel® 超滤膜为密理博超滤产品特有的设

计,非特异吸附比较低,减少样品的吸附损失

•膜和聚丙烯管都是低吸附材质,保证> 90%

回收率

•竖膜切向流设计,不像横膜那样容易堵,样品

损失少

•浓缩速度超快,**少*需 10 分钟


益启生物公司的 超滤浓缩管种类繁多。

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Amicon® Pro纯化超滤管简明操作指南

亲和纯化

用于纯化GST•Tag,His•Tag等重组表达蛋白及抗体,适合~0.5 mL裂解液操作

6次低速离心,总耗时~100分钟(含65分钟孵育时间)

1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂(50%悬浊液)和1.5 mL漂洗缓冲液。

1,000×g离心1 min。

2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h,其间可温和搅动促进结合。

3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。

4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液,1,000×g离心1 min。 益启生物公司主营 超滤浓缩管销售。常州默克15ml超滤浓缩管咨询报价

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蛋白如果浓缩过快或者过度浓缩都有可能引起蛋白沉淀。建议蛋白浓缩后的**终浓度不超过

20mg/ml。对于对浓缩速度敏感而容易沉淀的蛋白,建议的改进方法是:

1)离心力降为推荐离心力的30%-50%

2)改用截留分子量更大的超滤管(如原本选用10k,此时可以选择30k) 3)在浓缩过程中取出超滤管,用***头反复吹吸几次后再继续浓缩

Amicon® Ultra超滤膜中含有微量甘油。如果出现这种情况,请先用0.1 N NaOH清洗再离心。***用缓冲液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。清洗后的滤膜应立即使用,如暂时不用,请保持润湿状态,避免重新干燥。 松江区默克15ml超滤浓缩管销售

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