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使用该分析法时的"夹心"产生过程∶

将一种纯化的、靶标特异性抗体（捕获"抗体）结合在因定相上一通常阔着在平板孔约底叔加入样品（可能含有未知量的抗原），使其与捕获抗体发生结合反应。通过洗涤除去未结合的样品。

加入一种标记抗体（检测抗体），使其与抗原结合。在双抗夹心ELISA中，捕获抗体和检测抗体的选择十分重要，直接关系到实验结果的准确性、特异性和灵敏度。

夹心法ELISA和竞争性ELISA之间的差别

Troubleshooting

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请查测生产厂家说明书。当在Luminex200仪器上读取分析的读数时，采用4个校准片，根题Luminex推荐的方案调整探针高度至适当位置。当在FLEX0MP3D"仪器上读取分析法的读数时，采用1个校准片，根据Luminex建议的方案调整探针高度至适当位置。当在MAGPK"系统上读取分析的读数时，采用2个校准片，根掘山uminex建议的方案调整探针高度至适当位置。

适当使用封闭剂，且用多道移液器移取液体而不触碰微孔板中的试剂，这样可以遍免孔的交叉污染。增加洗涤次数 长宁区鉴定抗体抗体咨询报价正规科研抗体品牌零售代理商家。

除非您正在研究组蛋白和组蛋白修饰，否则您应采用X-ChIP方案，以使您的靶蛋白与DNA的连接稳定。增加交联时间。
蛋白G磁珠能结合更大范践的执体，包括小鼠单克境抗体，为达到抗体选择的比较大灵活性，我们推荐使用蛋白A/G混合物（目录号16-663）。检测PCR引物的效果。加入相应的时维物，必要时重新设计引物。

关于ChIP中关键步骤的详细讨论及实验问题解答，请参考默克密理博染色质免疫沉淀指南（ChIP实验指南）。

酶联免疫吸附实验（ELISA）

对于单克隆抗体，我们采用的是机器人克隆和筛选系统，该系统可以处理所有杂交瘤的融合和培养。这种高度自动化的流程使用了前列技术，确保达到比较大产量和比较好的一致性。我们通过阵列射流自动化微阵列系统检测融合情况，鉴别阳性克隆，然后用ELISA和Western blot进行再筛查。***，对阳性克隆多次稀释，以分离出比较高质量的产物，直至样本达到**克隆性。这一附加的程序正是默克密理博抗体质量优于竞争对手的原因之一。

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通过改变参数（见第5.3节）和评估他们对梁色质回收率的影响来优化这些步骤。使用机械力，如杜恩斯匀浆器或坡璃珠改善细脆溶辉。优化裂解步要和避免起泡。
在甲醛中培养时间过长可能掩盖经ChIP抗体识别所需要的表位。如果您使用的是单克隆抗体，此问题可能更加严重。过度交联也可能导致超声处理时复合物难以形成。优化交联步骤∶甲醛的**终液度应为1%;您应确定***的交联时间，然后再继绩进行实验。在研究方案的后续步骤中，交联不足可能引起靶蛋白从DNA解离。

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