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提供的超滤管是没有经过去内***处理的,同时由于内***通常以多聚体的形式存在,大小 在10-1000KD之间不等,在超滤的过程中是无法去除的。可在实验前通过先用0.5M NaOH预清洗,随后用Milli-Q®水/缓冲液清洗的步骤去除大部分内***。关于针对Amicon®,Microcon® , Centricon®尝试过的内***去除方案。 Amicon® Ultra超滤管使用的是再生纤维素膜,这种材质是蛋白吸附比较低的超滤膜。但是对于一些疏水性蛋白或非极性蛋白,它们和膜的非特异吸附可能会增强,对于这种情况,可以尝试在实验前对超滤管进行封闭处理。也可以尝试换成Amicon® Ultra 0.5或2来进行实验,通过减小膜面积来降低非特异性吸附。上海超滤浓缩管代理销售哪家比较好?崇明区默克2ml超滤浓缩管报价
膜的吸附损失 对于浓度很低及珍贵的样品,除了考虑截留效率和操作方便外,额外 要关注的是采用的超滤膜及设备对目标蛋白的潜在非特异性吸附损 失。不同膜材质对生物分子吸附程度不同,默克密理博的 Ultracel® 再 生纤维素膜在各类膜中对生物分子吸附**小,是 Amicon® Ultra 超滤管 等超滤产品成为优先的**技术关键之一。滤膜和装置表面对溶质的 吸附对样品收率会产生直接影响,所以如果希望尽可能提高得率,就 应该考虑采用较小的设备和膜面积。小量的、较为稀释的样品应该选 用膜面积小的装置,同时保证一定的流速。默克密理博设计了一系列 离心式或搅拌式装置,配合不同的膜面积、不同的截留分子量的切向 流系统,支持您获得理想的处理效果。闵行区默克离心浓缩管参数你知道上海超滤浓缩管代理销售哪家比较好吗?
样品的澄清、过滤和除菌 Ultrafree®-MC和Ultrafree®-CL微滤管 Ultrafree®-MC(0.5mL)和Ultrafree®-CL(2mL)是一次性使用的微滤离心管,可以用于各种水性样品和在某些溶剂中的样品除颗粒物、除沉淀的处理。提供两种体积及多种膜孔径以及已经经过无菌处理的产品供选择。Ultrafree®微滤离心管操作简便、样品回收率高且重复性很好,是蛋白和核酸样品处理的理想选择。 特点与优点 有0.1-5.0μm五种膜孔径供选择 采用高回收率的亲水Durapore® (PVDF)膜和亲水PTFE膜 提供无菌包装和非无菌包装形式产品 过滤速度快,数据稳定、重现性好 上样体积为0.5mL (MC)或2mL (CL) 配合1.5mL离心管固定转子(MC)或15mL离心管转子使用 顶盖颜色标识易于区分膜孔径
微滤中膜的孔径大小通常以微米计,表示大于这一规格的颗粒将被膜截留。超滤膜根据 NMWL分级,有时也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多数大于这个值的分子将在超滤时截留。一个确定NMWL的超滤膜应该截留至少90%以上的这个大小的球形分子。但为了保险起见,实践中选择的膜孔径要小于目的分子。缓冲液置换时膜截留分子量应该充分大于流过的溶质。当膜材料相同时,孔径减小 会增加排阻而减小滤过率。截留及产物回收的影响因素包括分子的形状、带电性质、样品浓度及组成成分、操作条件、使用的设备构造等。因此常常发生同样 NMWL 的膜对一定范围内的不同分子截留效果有一定差异的情况。使用超滤方法进行样品浓缩或除盐时,需要谨慎地选择合适的NMWL膜和设备。您了解超滤浓缩管的优势吗?
将装有样品的Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管接在Amicon®Pro上样池的下端。 3. Amicon®Pro上样池内加入预先准备好的1.5 mL含有染料的反应混合液。 4. 4,000×g离心15 min。 5. 优化选做:将样品在室温下多孵育30 min。 6. 上样池中加入1.5 mL PBS± NaN3。 7. 4,000×g离心15 min换液同时浓缩。 8. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管1,000×g离心回收标记好的抗体。 特点与优点: 特别的反转离心回收设计,滞留体积很小,样品损失少, 样品回收率通常>90% 浓缩倍数达到50-200倍 Ultracel®再生纤维素膜和聚丙烯外壳将吸附降至比较低 特别设计的死体积防止离干,保证样品回收率和活性 你知道超滤浓缩管的用途吗?嘉定区超滤浓缩管咨询问价
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如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话,那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性(构象差异)而影响浓缩效果,建议选用上一分子量级别的超滤管(如原本选用30k,此时可以选择10k)。 2)如果目的样本也不在滤过液中,那么: a)蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL? b)用来确定样本浓度的方法是什么?是否可信? c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。崇明区默克2ml超滤浓缩管报价