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截留 截留有时也称为排阻。水合程度、离子和空间位置效应会导致分子量相近 的分子表现非常不同的截留状态。许多生物大分子在不同的 pH 或离子强 度改变的情况下倾向于聚集或改变构象,因此其有效大小可能比 “天然” 分子大恨多,从而导致排阻增加。比如,有些蛋白质在某些缓冲液条件下 会发生多聚化,而另一些则发生解聚(如血红素蛋白)成亚基。这使选择 合适截留分子量的膜变得复杂。以默克密理博的经验,我们通常推荐选择 为目的分子大小一半的膜作为尝试的优先,再根据实际情况加以调整。超滤浓缩管的系列有很多。黄浦区默克2ml超滤浓缩管一级代理
浓度:当需要截留的样品浓度很低时,通量通常不受浓度影响。操作过 程中,随着溶质浓度的升高,增加的粘滞性和极化将导致通量降低。 温度:粗体,作为获得压力、浓度一样的词条通常增加操作时的温度可 以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%,同时溶液粘度降低。 实践中一般是以样品和设备能耐受的比较高温度来操作。 pH:改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构,蛋白尤其如此。在蛋白的 pI 值蛋白会沉淀,产生堵塞和得率损失。 污垢:溶液中除了目的分子造成的浓差极化,还有其它小颗粒和分子会 在膜上富集和沉淀,逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中,形成结晶和沉淀。上海默克离心浓缩管益启生物公司主营超滤浓缩管销售。
基于 Millipore® 先进的膜过滤技术,默克密理博开发了独特的腺***及慢***纯化与浓缩试剂盒。试剂盒中已经包括了必需的 Steriflip® 过滤装置和超滤管,能在短短 2 小时内安全、快捷地获得高产***。 节约时间:整个操作需 2 小时。 产量高:***回收率超过 70%。 整体体验极好:流程简便而***质量高。 设计新颖易操作:Steriflip® 过滤装置可以替代昂贵的设备,使原本繁琐凌乱的操作变得简单而标准。 安全:封闭的真空抽滤设计,完全避免样品飞溅造 成的***污染和损失。
特点与优点: 高产:没有样品转移,损失更少 温和:特别的渗滤设计使换液过程更温和 快速:从细胞裂解到纯化、优化一共需要5次低速离心 灵活:一种离心方法,***支持各种样品制备所需 蛋白缓冲液置换、脱盐和透析 每一种蛋白的制备都是***的,常常需要摸索和优化。应该考虑为特定蛋白选择相应的工具进行换液和透析。您可以从操作较快 Amicon® Pro 的渗滤法或更温和的 D-Tube™透析法中选择更适合样品的操作方法。 选择更直接而有效的方法! Amicon® Pro能做到一步离心完成脱盐换液超滤浓缩管咨询服务电话多少呢。
用超滤对分子进行分级 通过选定截留分子量的超滤操作能精确地将混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切实际。事实上,膜的规格描述是基于截留而非通过 的性质。一项实验中,采用 100k NMWL 滤膜,大于 100kDa 的分子截 留率 >90%,但这时比膜孔径小的分子并不是完全自由地通过滤膜, 75kDa 的分子截留率为 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的 溶液中的各 种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实 践中,如果要分离两种大分子,它们之间的分子量差异应该达到 10 倍 以上,或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间,则可达到比较理想的 分离。如果蛋白溶液较为稀释,低压下操作也有助于达到更好的效果。益启生物公司的超滤浓缩管系列有很多。江苏默克超滤浓缩管联系人
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蛋白复性,温和透析 D-Tube™ 透析管 如果样品很敏感而难以处理,采用温和的透析方法可以避免其在过度浓缩时发生沉淀和离心操作剪切力对样品的损害。。D-Tube™是双膜设计的透析管,**提高了样品透析表面积,在2-5小时内即可完成透析,是非常温和而高效的缓冲液置换工具。D-Tube™ 透析管的独特优点: 样品回收率> 89% • 膜和管壁皆为低吸附性材质,增加样品回收率可靠而易用 • 不会像使用夹子或打结那样造成样品渗漏和污染,安全可靠 旋盖式设计,易于打开和关紧 硬管设计,易于更充分地吸取、移走样品,即使是μL级样品加样方便,功能多样 • 采用标准***头加样,而非注射器和针头加样,减少膜破损的风险提供的浮漂适合在常见的广口烧杯中使用,方便在透析过程中换液D-Tube™ 透析管还可以用于从琼脂糖或丙烯酰凝胶电洗脱样品黄浦区默克2ml超滤浓缩管一级代理
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