1M磷酸盐缓冲液(pH6.0)
胰岛素(Insulin)作用普遍,包括调节脂肪和蛋白质的代谢以及促进细胞生长等。胰岛素功能的发挥源于其对细胞的作用,进而引起组织乃至机体的整体反应。一般可将胰岛素在细胞水平的作用分为三大类:代谢作用、促生长作用、以及代谢和促生长混合作用。胰岛素对细胞的代谢调节作用主要是通过其与细胞膜上的胰岛素受体(Insulin receptor, IR)相互作用而介导,而胰岛素对细胞的促生长作用则是通过其与细胞膜上胰岛素的样生长的因子受体(IGF Receptor, IG)相互作用而介导的。在无血清细胞培养液中,常添加胰岛素来维持细胞生长,调节细胞对葡萄糖、氨基酸和脂肪酸的摄取、利用和贮存,同时抑制糖原、蛋白质和脂肪的分解。酚类与醇类消毒剂中和肉汤含氯碘和过氧化物消毒剂中和肉汤培养基 洗必泰与季铵盐类消毒剂中和肉汤培养基。1M磷酸盐缓冲液(pH6.0)
细胞培养液(liquid of culture cellulae) 是指用于各种目的的体外培养、保存、运输活组织及细胞的液体,实质为人工模拟体内生长的营养环境,使细胞在此环境中有生长和繁殖的能力。由于其成分数量明确并可通过调节某一种成分来观察被研究对象的各种生物学改变,被广泛应用于细胞生物学科的研究。细胞培养液的组成成分主要有水、氨基酸、维生素、碳水化合物、无机离子、生长因子等,这些成分必须通过严格挑选,严格测试后方可使用,所用的水必须达到2级试验用水(CB/T 6682-1992),所用的器皿必须清洁无污并进行高压灭菌或干烤去热源处理。固氮螺菌液体培养基使用说明称取本品21.5g于1L蒸馏水或去离子水中加热煮沸至完全溶解分装115℃高压灭菌30分钟冷却备用.
培养基的pH必须控制在一定的范围内,以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的较适pH条件各不相同,一般来讲,细菌与放线菌适于在pH7-7.5范围内生长,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范围内生长。值得注意的是,在微生物生长繁殖和代谢过程中,由于营养物质被分解利用和代谢产物的形成与积累,会导致培养基pH发生变化,若不对培养基pH条件进行控制,往往导致微生物生长速度下降或(和)代谢产物产量下降。因此,为了维持培养基pH的相对恒定,通常在培养基中加入pH缓冲剂,常用的缓冲剂是一氢和二氢磷酸盐(如KH2PO4和K2HPO4)组成的混合物。K2HPO4溶液呈碱性,KH2PO4溶液呈酸性,两种物质的等量混合溶液的pH为6.8。当培养基中酸性物质积累导致H+浓度增加时,H+与弱碱性盐结合形成弱酸性化合物,培养基pH不会过度降低;如果培养基中OH-浓度增加,OH-则与弱酸性盐结合形成弱碱性化合物,培养基pH也不会过度升高。
L-谷氨酰胺在细胞培养中重要吗?它在溶液中不稳定吗?L-谷氨酰胺(L-Glutamine)是细胞生长的必须氨基酸,可作为培养细胞的能量来源,参与蛋白质的合成和核酸代谢。L-谷氨酰胺在溶液中状态不稳定,它的降解速率随保存时间,保存温度及保存环境pH值等变化而变化。L-丙胺酰-谷氨酰胺(L-alanyl-L-glutamine)是细胞培养中普遍使用的L-谷氨酰胺的替代品,其在水溶液中稳定性高,即可保持长时间稳定的营养供给,也降低了分解产物造成的细胞毒性。L-丙胺酰-谷氨酰胺溶液(L-alanyl-L-glutamineslution)可作为哺乳动物贴壁细胞或悬浮细胞培养添加剂。与谷氨酰胺相比,L-丙胺酰-谷氨酰胺不会自行降解成氨而导致细胞毒性,作为添加物培养条件更加可控,可有效提高细胞活力。李氏琼脂 Herrold’s 卵黄琼脂基础 指示选指示选择性培养基基础 肝浸液肉汤 肝浸液琼脂 胰膘肉汤 胰膘琼脂。
选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选效率。酵母菌富集培养基:葡萄糖5%,尿素0.1%,硫化铵0.1%,磷酸二氢钾0.25%,磷酸氢二钠0.05%,七水合硫酸镁0.1%,七水合硫酸铁0.01%,酵母膏0.05%,孟加拉红0.003%,pH4.5。富集好氧自生固氮菌:甘露醇1%,磷酸二氢钾0.02%,七水合硫酸镁0.02%,氯化钠0.02%,二水合硫酸钙0.01%,碳酸钙0.5%葡萄糖酵母浸粉蛋白胨琼脂GYP琼脂 改良M17琼脂培养基基础 尿酸琼脂 MC肉汤不含琼脂溴甲酚紫牛乳琼脂培养基。植物组织培养基 KC 培养基
M-远藤氏防腐培养基 克罗诺杆菌筛选肉汤 Skirrow琼脂基础(Skirrow血琼脂基础) 半固体储存培养基。1M磷酸盐缓冲液(pH6.0)
按照培养基用途区分:鉴别培养基,一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便的从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。例如,伊红美蓝乳糖培养基(EMB)。培养基的分类有哪些?培养基按功能用途可分为几种?培养基的分类有哪些?培养基按功能用途可分为几种?常见的培养基有细菌培养基、牛心培养基、根瘤菌培养基、放线菌培养基、面粉琼脂培养基、微藻培养基、豆芽汁培养基、食用菌菌种培养基、动物细胞培养基等等。1M磷酸盐缓冲液(pH6.0)
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