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(c)漂洗液,所述漂洗液为70-80%乙醇; (d)洗脱液,其组分为:10 mmol/L Tris-HCl,0.1 mmol/L 乙二胺四乙酸二钠,pH 8.0; (e)硅基DNA吸附材料,所述硅基DNA吸附材料为二氧化硅纳米颗粒、硅胶膜、玻璃纤维膜、石英膜、二氧化硅包裹的磁性纳米颗粒中的任意一种。 使用本发明的试剂盒,用以提取土壤尿液DNA的方法,包括以下步骤: 1)DNA提取 用土壤裂解液和蛋白酶K裂解含有尿液的土壤样品,离心分离土壤和上清液,上清液加入结合液,混合后加入硅基DNA吸附材料,分离硅基DNA吸附材料和液体,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脱DNA;具体包括以下步骤: a.刮取含有尿液的表层土壤,烘干,买土壤DNA提取哪家专业?静安区FastDNA Spin Kit For Soil土壤DNA提取哪家好
土壤中含有大量的二氧化硅成分,因此,对土壤样品进行DNA提取时,需要考虑样品来源的二氧化硅对DNA的结合,一旦DNA与样品来源的二氧化硅发生结合,DNA就会随着土壤固体颗粒物质一起被去除。 尿液中含有一定量的DNA,可以通过多种方法提取DNA,并用于PCR检测、STR分型检测、二代测序分析;但是,尿液中DNA含量较低,尿液浸润土壤后,被土壤吸附的DNA含量更低,要针对土壤尿液进行DNA提取,具有一定难度。 技术实现要素: 本发明为解决上述存在的问题,提供了一种土壤尿液DNA提取试剂盒及方法,其解决技术问题的技术方案是: 土壤尿液DNA提取试剂盒,包括以下试剂:静安区FastDNA Spin Kit For Soil土壤DNA提取哪家好上海益启订购土壤DNA提取的服务电话是多少?
1.0视为提取效果良好。土壤类型:有机营养土100mg、花坛土100mg、盐碱土250mg、沙漠土250mg。提取方法:自动化/手工、自动化/手工、自动化/手工、自动化/手工。DNA收率(ng/mg样本):130.25+4.95;196.08+3.92、19.92+0.95;24.43+0.74、11.75+0.37;13.43+0.39、2.47+0.13;2.97+0.13。A260/A280:1.84+0.00;1.98+0.02、1.86+0.01;1.85+0.02、1.87+0.02;1.90+0.01、1.85士0.00;1.91+0.03。A260/A230:1.23+0.02;1.08+0.01、1
大批量样本的提取,选择适宜的核酸提取方法十分重要。MP在构思和开发新一代的土壤样本DNA纯化方法的过程中,针对土壤样本核酸纯化的三大难题:腐植酸含量高、微生物裂解难,难以高通量提取,给出了针对性的解决方案:MagBeads FastDNATM Kit for Soil。PART.01,磁珠法土壤基因组DNA提取试剂盒。产品名称:MagBeads FastDNATM Kit for Soil、MagBeads FastDNATM Kit for Soil (Sample)。包装规格:50 preps、5 preps。货号:1165**050、11**61*05MP土壤DNA提取询价公司电话。
8000rpm离心1分钟,上清DNA溶液转移至新的离心管中。 2)PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例2 以硅胶膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟;最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀;混合液转移至装有硅胶膜的离心柱中,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,12000rpm离心3分钟,将离心柱转移至新的离心管中,70℃加热3分钟;加入20 ul洗脱液,70℃加热3分钟;12000rpm离心1分钟,丢弃离心柱,离心管中液体即为DNA溶液。 2)实验室用的土壤DNA提取推荐购买什么品牌?静安区FastDNA Spin Kit For Soil土壤DNA提取哪家好
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取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟; b.最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀; c.将上一步的混合液转移至硅基DNA吸附材料,分离液体和硅基DNA吸附材料; d.用漂洗液漂洗硅基DNA吸附材料; e.用洗脱液洗脱硅基吸附材料中的DNA; 2)PCR扩增及电泳 将上步纯化的DNA进行PCR扩增,在电泳仪中检测DNA。 本发明具有以下有益效果: 本发明的土壤尿液DNA提取试剂盒及方法,配制好土壤裂解液、结合液、漂洗液、洗脱液,利用特殊成分的土壤裂解液,在加入结合液之前,样品土壤来源的二氧化硅不与DNA结合,离心分离固体颗粒和溶解了DNA的上清液,上清液中加入结合液,混合后转入含有硅基DNA吸附材料中,分离液体和硅基DNA吸附材料,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脱获得纯化DNA;静安区FastDNA Spin Kit For Soil土壤DNA提取哪家好
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