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前言 流式细脆术是具有很强统计学功能的技接术，它根据物理特征和焚光信号对悬浮细胞群进行鉴定和分选。在50年前就已经开发了流式细胞分析仪;直至1960年代晚期，这种技术才开始商业化。 流式细胞术定义为在悬浮液中，当粒子（如细胞）通过激光或其它光源时，测量细胞和荧光特性。 根据这些检测，可以对它们之中的特定群体和亚群进行鉴定，甚至可以通过细胞分选进行物理分离;在细胞分选中，根据荧光特征使细胞带电从而发生静电偏移。也可以分析粘附细胞和因体组织，前提是要对它们进行解离，建立单细胞悬浮液。 流式细胞术依赖于悬浮细胞的流体动力学，建立在激光器前通过的单细脆流。通过细胞散射光方式的不同，在千粒子/秒的速度下测定细胞的大小和细胞内的复杂性。然后 把这些拟合数据转化为可定量的和可用于二维（或三维）图像的致据。

无信号 在检测之前，转印膜在贮藏过程中发 生蛋白降解 二抗选择错误 曝光时间太短 抗原上样量不足 抗原可能被破坏 检测系统 一抗的亲和力较低 化学发光底物已丧失活性。 已从膜上剥离抗体并再次杂交。 处理方法 使用新转的膜进行实验。 检查是否使用适当的二抗。 增加曝光时间。 在凝胶上载入更多的抗原，或在载入之前使用超滤管浓缩样品， 或使用免疫沉淀，以增加凝胶中的目标蛋白量。 检查确保电泳处理未破坏抗原性。 增加（和优化）一抗的浓度和培养时间、温度。Upstate抗体的报价具体是多少呢?

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