热敏磷酸酶

时间:2024年07月06日 来源:

糖苷酶F(PNGaseF)是一种酰胺水解酶,经过和平空间站伊丽莎菌克隆,主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌。N-糖苷酶F(PNGaseF)在酵母中重组表达(比活性:100000U/mL),可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGaseF的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间的酰胺键,同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。本产品带his标签,常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化。另外,我司还提供其他类型的糖苷酶,包括酵母重组表达的N-糖苷酶F(比活性:750000U/mL),内切糖苷酶H,内切糖苷酶S。产品信息产品性质中文别名(Chinesesynonym)N-糖酰胺酶F;N-糖苷酶F英文别名(Englishsynonym)PNGaseF来源(Source)酵母重组表达分子量(Molecularweight)36kDa比活性(Specificactivity)100000U/mL缓冲液组分(Buffer)20mMTris-HClpH7.5,50mMNaCl,5mMEDTA,50%Glycerol透明质酸及其衍生物由于其生物相容性和生物降解性,被用作药物的控释载体。热敏磷酸酶

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Endo H糖苷内切酶H:结构、功能及其在糖生物学中的应用摘要Endo H糖苷内切酶H(Endo H)是一种专门切割N-连接糖链的内切酶,用于糖生物学和蛋白质工程领域。本文将探讨Endo H的结构特性、催化机制、以及其在研究和临床应用中的潜力。引言N-连接糖基化是一种在真核细胞中普遍存在的蛋白质修饰方式,涉及将糖链添加到蛋白质的天冬酰胺残基上。Endo H作为一种内切酶,能够特异性地识别并切割N-连接糖链中的β-N-乙酰葡糖胺苷键,从而在蛋白质工程和生物制药中发挥重要作用。Endo H的结构特性Endo H通常来源于流感嗜血杆菌(Hemophilus influenzae),其分子质量约为50 kDa。该酶由两个结构域组成:一个负责识别糖链的催化结构域和一个有助于酶稳定性的非催化结构域。催化机制Endo H的催化机制涉及对N-连接糖链的特异性识别和切割。酶的活性位点含有多个氨基酸残基,这些残基与糖链的特定结构相互作用,导致酶对底物的高特异性。Endo H催化的糖苷键断裂是一水解反应,需要水分子的参与。Recombinant Human BD-4肠激酶作为研究工具,用于探索蛋白质结构-功能关系,以及在蛋白质工程中进行蛋白质的定点突变。

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利用PCR技术扩增得到编码土豆羧肽酶抑制剂(carboxypeptidaseinhibitorfrompotato,CPI)活性多肽基因,克隆于表达载体pGEX一4T一1的多克隆位点中,得到重组质粒pGCPI,测序后将重组质粒转化到受体茵EscherichiacoliBL21中。重组茵经IPTG诱导表达,超声波破茵后,通过谷胱甘肽sepheroseFF亲和层析柱一步纯化得到融合蛋白,纯度大于97%。融合蛋白经凝血酶切割并分离除去谷胱甘肽一S一转移酶后得到纯度大于98%的重组CPI,ELISA鉴定产物具有免疫原性,体外检测表明其促进纤溶的生物功能与天然CPI无明显差异。

T4UvsX重组酶的保存和纯化是实验室工作流程中的重要环节,确保了酶的稳定性和活性。以下是根据搜索结果提供的信息:保存条件:-T4UvsX重组酶通常在-20°C的条件下保存,可以保持3年的有效期。-某些产品说明中提到,该制品不含甘油,可用于建立冻干体系,这可能对长期保存和运输有额外的好处。-建议避免反复冻融,因为这可能会影响酶的活性。纯化过程:-T4UvsX重组酶是由大肠杆菌表达和纯化的。这意味着科学家首先将T4噬菌体的uvsX基因克隆到适合在大肠杆菌中表达的质粒载体中。-然后将这个质粒转化到大肠杆菌宿主细胞中,使其表达T4UvsX蛋白。-接下来,通过一系列生化步骤从大肠杆菌细胞中提取和纯化T4UvsX蛋白,这些步骤可能包括细胞裂解、离心、层析等技术。注意事项:-T4UvsX重组酶的保存液中甘油含量为20%,建议单独分装保存,以避免反复冻融。-该酶无核酸酶活性,这表明它在催化反应时不会切割DNA链,而是促进DNA链的重组。-本产品用于科研用途,不应用于临床诊断。应用:-T4UvsX重组酶主要用于等温扩增技术,如重组酶聚合酶扩增(RPA),这是一种快速、灵敏的核酸检测技术。通过遵循这些保存和纯化指南,研究人员可以确保T4UvsX重组酶在实验中的有效性和可靠性。在生物制药工业中,肠激酶用于生产重组蛋白质药物,通过专一性切割去除不需要的序列,提高药物纯度和活性。

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Enterokinase,Recombinant,ExpressedinE.coli大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)注意事项1.本产品所讲述的缓冲体系需要自行配置。2.不建议37℃条件下酶切,可能会有非特异性酶切出现。3.在>200mM咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切会受到影响。如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种,为获得理想的酶切结果,请先将样品透析到25mMTris-HCl8.0缓冲液中,然后再进行酶切实验;若不方便透析,可将样品稀释到咪唑含量在100mM以下,NaCl浓度在50mM以下,甘油浓度小于5%以下进行酶切,酶的用量与蛋白比例不变;若干扰因素很多,且不便去除,需要适当增加酶量或延长酶切时间,有助于得到理想的酶切效果。4.磷酸盐对Enterokinase有很强的抑制作用,痕量的磷酸盐都会严重影响Enterokinase的活性,因此在酶切体系内不能存在磷酸盐。5.本品是具有高酶活力重组肠激酶,切割蛋白使用量少,可不考虑除去。后续如需去除重组肠激酶,可用阴离子交换树脂(如DEAE-FF)对其进行洗脱。推荐洗脱条件如下:平衡缓冲液:25mMTris-HClpH8.0洗脱缓冲液:25mMTris-HClpH8.0,含100mMNaCl6.蛋白酶切效果不好,可适当增加酶量,或适当延长酶切时间。肠激酶用于重组抗体和其他蛋白质的质量检测,确保其正确折叠和功能。DNA Marker V

使用全长A2AR蛋白进行药物筛选:全长A2AR蛋白可以用于ELISA、SPR亲和分析,以筛选和优化潜在的A2AR调节剂。热敏磷酸酶

SARS-CoV-2,whichcausestheglobalpandemiccoronavirusdisease2019(Covid-19),belongstoafamilyofvirusesknownascoronavirusesthatalsoincludeMERS‑CoVandSARS-CoV-1.Coronavirusesarecommonlycomprisedoffourstructuralproteins:Spikeprotein(S),Envelopeprotein(E),Membraneprotein(M)andNucleocapsidprotein(N).TheSARS-CoV-2Sproteinisaglycoproteinthatmediatesmembranefusionandviralentry.TheSproteinishomotrimeric,witheach~180-kDamonomerconsistingoftwosubunits,S1andS2.TheRBDofSARS-CoV-2bindsametallopeptidase,angiotensin-convertingenzyme2(ACE-2).BeforebindingtotheACE-2receptor,structuralanalysisoftheS1trimershowsthatonlyoneofthethreeRBDdomainsisinthe"up"conformation.Thisisanunstableandtransientstatethatpassesbetweentrimericsubunitsbutisneverthelessanexposedstatetobetargetedforneutralizingantibodytherapy.PolyclonalantibodiestotheRBDoftheSARS-CoV-2proteinhavebeenshowntoinhibitinteractionwiththeACE-2receptor,confirmingRBDasanattractivetargetforvaccinationsorantiviraltherapy.热敏磷酸酶

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