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润湿印迹。,对于大多数应用和大多数抗体而言,0.5%的脱脂/低脂干奶溶液可以提供足够的膜的阻塞。注意:请勿使用浓度高于0. 5%的干奶,因为它可能会导致吸墨纸架堵塞膜。如果使用其他封闭溶液,请参阅表5了解兼容性和推荐浓度。●在洗涤,封闭和抗体缓冲液中始终使用0.1%Tween8 20表面活性剂。这将减少溶液的表面张力,并确保孵育过程中抗体在印迹支架中的均匀分布。●由于SNAP i.d. @ 2.0系统中的免疫检测时间很短,因此建议在开始操作之前应准备一抗和二抗稀释液。●MultiBlot固定器所需的稀释抗体的总体积为2.5 mL,Mini blot固定器为5 mL,10 mL用于Midi印迹固定器。,每次需要洗30次(MultiBlot为15毫升),以确保每次洗完后都能完全清洗印迹孵化步骤。益启生物公司带您了解微流控细胞芯片分析仪详情。徐汇区Merck手持细胞计数器Merck仪器代理价
有关详细信息,请参见表2。●不建议在SNAP i.d. @ 2.0系统中剥离印迹。印迹已被剥离可以从阻塞步骤开始在SNAP i.d.o 2.0系统中对遵循标准协议的系统进行重新探测。●如果不需要剥离(例如,如果使用其他二抗进行检测),则可以重新检测印迹快速清洗后,立即在SNAP i.d.9 2.0系统中使用。 优化准则抗体已经开发了优化指南,以使用户能够转换所用抗体的浓度将标准免疫检测测定法浓缩至适用于SNAP i.d. @ 2.0系统的浓度。大多数用户会能够使用相同量的抗体,但与标准品相比,体积更小,浓度更高免疫检测。但是,当使用扩展抗体方案(第12页)时,可以使用相同的方法通常用于标准免疫检测的一抗的浓度,体积和时间,其次是较高浓度的二抗,持续时间较短。表1.如何根据SNAP i.d.9崇明区Merck仪器联系电话上海益启生物的细胞计数器询价公司电话。
IlASICONIX2微流体系统用户图4.细胞捕获机制设置说明指南。微型腔室将细胞轻轻地固定在玻璃上板底漆(可选)表面在基于灌注的分析过程中保持单个焦平面1.如果您的实验需要完全清理去除PBS,请更换实验BOA板的陷阱高度为o.7,0.9,1.1,1.3,2.3和溶液(1-5)和细胞入口(8)中的PBS与150uL您的4.5微米所需的底漆溶液歧管描述2.从6和7孔中吸出PBS溶液。CeIlASICDONK2加热(CAX2-MXT20)或碱性(CAX2-MBC20)3.根据以下说明,将微流体板密封到ONIX2歧管上歧管将微流控板连接到CellASICONX2CellASICONIX2微流体系统用户指南。微流体系统。4打开CellASICONX2软件,选择一种新的实验选项,然后在下拉列表中找到Bo4
15分钟。图4.扩展孵化(过夜):SNAP i.d.8 2.0系统与标准免疫检测一种。 SNAP id.o 2.0蛋白检测b。标准系统Midi印迹免疫检测将A431细胞裂解液和大鼠肝裂解液(12至3 ug)转移至Immobilon9-P膜。两种印迹均用在TBST中制备的0.5%NFDM封闭。这SNAP i.d.c 2.0 Midi印迹被阻断20秒,标准印迹为分锁了1个小时。两种印迹均与相同稀释度的MAP激酶1/2(ErK1 / 2),但是,对于HRP偶联的二抗山羊抗兔(AP132P),将SNAP i.d.2.0印迹孵育10分钟在TBST中洗涤3次后,将标准印迹孵育1小时。 图5.扩展孵化(1小时):,SNAP i.d.o 2.0系统1小时协议与SNAP i.d.9 2.0系统标准协议与标准免哪家细胞跨膜电阻仪是有正规授权的?
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疫检测对照,茴香霉素处理和PDGF处理的3T3小鼠成纤维细胞裂解液(10-0.63 ug)被转移到Immobilon8-P膜上。印迹被阻止补充有0.5%脱脂奶粉(NFDM)的Tris缓冲盐水含0.1%Tweeno 20表面活性剂(TBST),并用一级抗B-Tubulin进行探测(MAB3408)和次级HRP偶联的山羊蚂蚁(AP1 24P)在上述条件。将印迹暴露于X射线胶片一分钟。维护SNAP i.d.o 2.0系统清理去除协议每次使用时应清洁SNAP i.d.o 2.0系统。清理去除盐碱中的盐或污染物和管道,抽吸真空并通过系统冲洗散去的水。注:请勿对SNAP i.d.9 2.0系统进行高压灭菌。可以拆卸框架,并用中性清洁剂洗涤,然后用蒸馏水彻底冲洗。风干。要拆卸框架,请使用右侧的蓝色夹子调整框架的方徐汇区Merck手持细胞计数器Merck仪器代理价