胰酪胨大豆多粘菌素肉汤(TSPB)基础
4.**培养条件**:-培养基的制备方法包括称取基础培养基14.2g加入180ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌;另取1.2g李斯特氏菌添加剂,加入20ml无菌水,并加入一些玻璃球,不停振动,使其乳化均匀,将二者分别于121℃高压灭菌15分钟。冷至50℃左右时,把李斯特氏菌添加剂加入基础培养基中,并加入李斯特氏菌抑菌剂,混匀,倾入无菌平皿。5.**质量控制**:-质控菌株在37℃培养24-48小时,单增李斯特氏菌和绵羊李斯特氏菌在该培养基上生长良好,形成蓝色菌落,菌落周围有一不透明环。其他菌如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌则不生长或生长不良。6.**储存条件**:-制备好的固体平板保存于2-8℃,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处,保存温度2-8℃。7.**注意事项**:-严格按照标签说明进行配制培养基,避免混合时培养基和添加剂温度过高导致平板出现絮状物。干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。这些特点使得李斯特氏菌显色培养基在食品卫生微生物检验中具有重要的应用价值。营养葡萄糖琼脂培养皿可以用于大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌等质控菌株的培养和观察 。胰酪胨大豆多粘菌素肉汤(TSPB)基础
培养基
连四硫酸盐肉汤培养基(TetrathionateBroth,简称TTB)是一种选择性富集培养基,主要用于分离和富集沙门氏菌。以下是其主要特点:1.**成分组成**:-连四硫酸盐肉汤培养基的基础成分包括胰酪蛋白胨、动物组织消化物、胆盐、碳酸钙和硫代硫酸钠等。每升培养基中通常包含胰酪蛋白胨2.5g、动物组织消化物2.5g、胆盐1.0g、碳酸钙10.0g和硫代硫酸钠30.0g。2.**选择性**:-该培养基通过添加去氧胆盐和亮绿染料等抑制剂,抑制革兰氏阳性菌的生长,从而提高对沙门氏菌的选择性。碘-碘酸钾与硫代硫酸钠反应生成四硫磺酸盐,阻遏常规肠道细菌生长。3.**鉴别功能**:-葡萄糖和甘露醇是可发酵的糖类物质,辅助肠道致病菌尤其是沙门氏菌的鉴别。连四硫酸盐肉汤培养基含有碘液和煌绿水溶液,这些添加剂有助于抑制共生生物,从而改善沙门氏菌的分离。4.**应用广**:-主要用于伤寒沙门氏菌和其他沙门氏菌的分离、增菌和鉴定。常用于从粪便、污水等样品中分离沙门氏菌。5.**配制方法**:-一般将培养基粉末溶解在蒸馏水或去离子水中,加热煮沸,分装后进行高压灭菌。使用时需现配现用,以保证培养基的稳定性和选择性。心浸液肉汤(Huntoon)HIB培养基BCYE琼脂培养皿在自然光下可以观察到博兹曼军团菌形成的蓝白色菌落,而在紫外灯照射下则有蓝白荧光 。
乳糖亚硫酸盐培养基(LactoseSulfiteMedium,简称LS)是一种用于产气荚膜梭菌确认试验的培养基,具有以下特点:1.**用途**:-主要用于产气荚膜梭菌的确认试验,通过检测其发酵乳糖产酸产气的能力。2.**成分组成**:-培养基的主要成分包括胰酪胨、酵母膏、氯化钠、乳糖和L-半胱氨酸盐酸盐。具体配方为每升含有胰酪胨15.0g、酵母膏2.5g、氯化钠2.5g、乳糖10.0g、L-半胱氨酸盐酸盐0.3g,pH值控制在7.1±0.2(25℃)。3.**添加剂**:-每瓶培养基需配套添加焦亚硫酸钠溶液和柠檬酸铁铵溶液,每8mL乳糖亚硫酸盐培养基(LS)需要1支焦亚硫酸钠和1支柠檬酸铁铵溶液。这些添加剂用于检测硫化氢的产生,使菌落呈黑色。4.**配制方法**:-称取30.3g培养基粉末,加热溶解于1000mL蒸馏水中,分装至含有倒置小导管的试管中,每管8mL,121℃高压灭菌15分钟,冷却,临用前,每管添加0.5mL过滤除菌的焦亚硫酸钠溶液和0.5mL柠檬酸铁铵溶液。5.**培养条件**:-将培养基放置于36℃±1℃的厌氧环境中培养18-24小时。6.**结果观察**:-接种质控菌株如产气荚膜梭菌(ATCC13124),观察其生长情况和特征。产气荚膜梭菌在该培养基上生长良好,菌落变黑,表明其发酵乳糖产酸产气的能力。
赖氨酸培养基(LYS)是一种选择性培养基,主要用于野生酿酒酵母的分离和计数。以下是其主要特点:1.**成分**:-赖氨酸培养基的主要成分包括D-葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙、氯化钠、腺嘌呤、DL-甲硫氨酸、L-组氨酸、DL-色氨酸、硼酸、硫酸锌、钼酸铵、硫酸锰、硫酸亚铁、L-赖氨酸、肌醇、泛酸钙、硫胺素、吡哆醇、对氨基苯甲酸、烟酸、核黄素、生物素、叶酸和琼脂等。2.**pH值**:-培养基的pH值通常控制在5.0±0.2,使用10%乳酸调节pH值至5.0。3.**选择性**:-赖氨酸作为氮源,很多酵母可以利用赖氨酸为氮源,这使得培养基具有选择性。4.**应用范围**:-主要用于接种用酵母中野生酵母的分离和计数。5.**制备方法**:-称取6.6g培养基粉末,用100ml去离子水重悬,加入0.84ml的60%乳酸钾溶液,加热煮沸至完全溶解,冷却至50°C,用10%乳酸调节pH至5.0,倒入无菌培养皿。6.**灭菌方法**:-将培养基加热煮沸,溶解于1000ml蒸馏水中,冷至50℃左右时,用16%乳酸溶液调整pH至4.8±0.2,混匀,倾入无菌平皿,备用。7.**保存条件**:-培养基应密封,2-25°C保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。制备改良CCD琼脂培养皿时需要将干粉成分溶解在蒸馏水中,经过高压灭菌,并在冷却至45-50℃时加入添加剂。
葡萄糖蛋白胨培养基(G.P)是一种常见的细菌培养基,具有以下特点:1.**成分组成**:-葡萄糖蛋白胨培养基的主要成分包括葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、磷酸氢二钾、硫酸镁和琼脂。具体配方为每升含有蛋白胨5.0克,葡萄糖20.0克,酵母粉2.0克,磷酸氢二钾1.0克,无水硫酸镁0.24克,琼脂适量,pH值控制在6.4±0.2(25℃)。2.**用途**:-该培养基用于药品、生物制品的无菌试验,也用于兽用生物制品的无菌试验。它还用于观察、分离和定量培养不同类型的细菌,同时用于研究菌株的特性和药敏试验。3.**pH值**:-葡萄糖蛋白胨培养基的pH值一般在7.0左右,适合大多数细菌的生长。4.**制法**:-制备葡萄糖蛋白胨培养基的方法相对简单,通常需要将葡萄糖、无机盐和其他营养物质溶解在蒸馏水中,然后加热至溶解,再经过滤消毒即可。5.**培养条件**:-培养基在121℃高压灭菌15分钟,备用。培养时通常在36±1℃培养18-24小时,记录实验结果。6.**微生物质控**:-接种质控菌株如单增李斯特氏菌、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、伤寒沙门氏菌等,在36±1℃培养18-24小时,观察生长情况和特征。TSAM培养皿的pH值通常控制在7.3 ± 0.2(25℃),以适应细菌的生理需求。用于HGMF膜法培养大肠菌群。肠道菌增菌肉汤(EE肉汤)
R2A琼脂培养基包含酵母浸出粉、蛋白胨、酪蛋白水解物、葡萄糖、淀粉、磷酸氢二钾、无水硫酸镁和琼脂等。胰酪胨大豆多粘菌素肉汤(TSPB)基础
改良亮绿琼脂培养皿通常用于细菌的培养和分离,而不是直接用于细胞培养。然而,通过一些调整和添加特定的成分,它也可以用于某些类型的细胞培养。以下是改良亮绿琼脂培养皿用于培养和分离细胞的一些方法:选择合适的基础培养基:改良亮绿琼脂培养皿的基础琼脂可以作为细胞培养的基质,但需要添加适合特定细胞类型的营养物质、生长因子。添加细胞生长所需的成分:为了满足细胞生长的需要,需要在琼脂中添加血清、氨基酸、维生素、矿物质和必要的缓冲系统。调整琼脂浓度:根据细胞的粘附特性,可能需要调整琼脂的浓度,以便细胞能够在琼脂上生长和扩散。选择性添加抗生物质:如果需要防止细菌污染,可以在培养基中添加适量的抗生物质。胰酪胨大豆多粘菌素肉汤(TSPB)基础