Recombinant Human DKK1 Protein
重组人血清白蛋白(rHSA),特别是通过植物表达系统生产的细胞培养级产品,以其高纯度和质量一致性而受到科研和工业界的重视。以下是高纯度rHSA的一些关键特点和意义:1.**纯度标准**:高纯度的rHSA通常意味着蛋白质含量达到99%以上,这通常通过高效液相色谱(HPLC)、SDS-PAGE电泳等方法进行验证。2.**内素水平**:内素水平是衡量蛋白质纯度的一个重要指标。高纯度rHSA的内素水平通常非常低(例如,≤0.5EU/ml),这有助于减少细胞培养中潜在的内素污染。3.**宿主细胞蛋白(HCP)残留**:高纯度rHSA的宿主细胞蛋白残留量非常低,这有助于减少细胞培养中外来蛋白的干扰。4.**无动物源成分**:由于rHSA是通过植物表达系统生产的,因此不含有动物源性成分,这降低了动物源性疾病传播的风险。5.**批次一致性**:高纯度rHSA的生产过程通常在严格控制的条件下进行,确保不同批次之间的质量一致性,这对于科学研究和商业生产至关重要。6.**应用广**:高纯度rHSA在细胞培养、生物制药、药物载体、疫苗开发等领域有着广的应用。7.**安全性**:高纯度rHSA的生产过程不涉及动物源材料,因此可以降低血源性疾病的风险,提高产品的安全性。在cDNA末端快速扩增(RACE)技术中,Ultra-Long Master Mix 可以用来扩增5'和3'末端的长片段cDNA。Recombinant Human DKK1 Protein,hFc Tag
重组增强型绿色荧光蛋白(RecombinantEnhancedGreenFluorescentProtein,EGFP)是一种用于生物科学研究的工具。以下是重组EGFP的一些特点和应用:1.**高荧光强度**:EGFP比野生型GFP具有更强的荧光,这使得它在成像和检测时更为敏感和有效。2.**改进的折叠效率**:EGFP在生理温度(如37℃)下的折叠效率更高,这有助于在细胞内快速形成成熟的荧光蛋白。3.**单一激发峰**:与野生型GFP相比,EGFP具有单一的激发峰,这简化了成像条件的设置,并提高了信号的稳定性。4.**适合多种生物系统**:EGFP可以用于多种生物系统,包括细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞。5.**多功能性**:EGFP可以作为报告基因用于基因表达分析,也可以作为融合标签用于蛋白质定位和动态研究。6.**非糖基化**:在大肠杆菌中表达的重组EGFP是非糖基化的,这有助于减少翻译后修饰的复杂性。7.**纯度高**:重组EGFP通常具有高纯度,适合用于各种生物化学和分子生物学实验。8.**稳定性**:EGFP的荧光稳定性好,适合长时间观察和成像。9.**分子量**:重组EGFP的分子量约为26.9kDa,由239个氨基酸构成。Recombinant Human DKK1 Protein,hFc TagPfu DNA Polymerase 具有较高的保真度,能够在DNA合成过程中减少错误掺入的碱基,降低非目标突变的发生率。
IdeSProtease是一种免疫球蛋白G(IgG)特异性降解酶,它能够在IgG的铰链区下方的一个特定位点进行切割,产生F(ab')2和Fc片段。这种酶是通过大肠杆菌(E.coli)表达系统重组表达生产的,并且经过分子改造,使其具有更高的酶活和更广的底物特异性。在生产过程中,确保IdeSProtease符合GMP(良好生产规范)标准,需要进行以下步骤:1.**分子改造**:通过分子生物学技术对IdeS进行改造,增强其稳定性和比活性。2.**大肠杆菌表达系统**:利用大肠杆菌表达系统进行IdeS的重组表达,确保无动物源性成分,减少病毒污染风险。3.**纯化**:通过高度纯化过程,确保IdeS的纯度达到≥95%。4.**酶活定义**:1个酶活力单位定义为在37°C条件下,30分钟内酶切1μg重组单克隆IgG所需的酶量。5.**质量控制**:每批产品都经过严格的质量控制,以确保产品批间稳定性和高稳定性。6.**储存条件**:采用适当的储存条件,如-30℃至-10℃冻存,确保产品在有效期内保持活性和稳定性。7.**微生物学安全性检测**:进行无菌检测、体内有毒物质的检测、抗生物质残留检测、宿主细胞蛋白残留检测和病毒安全性检测,确保产品符合微生物学安全性要求。
在ADCs(抗体药物偶联物)的制备过程中,确保药物的稳定性和生物活性是至关重要的。以下是几个关键步骤和技术要点:1.**药物抗体比(DAR)的控制**:DAR是影响ADC稳定性的关键因素。通过控制DAR和药物负荷分布,可以促进ADC的稳定性。DAR值在2-4之间通常被认为是好的选择,但后面的DAR值需要通过稳定性试验、体内有效性和药代动力学共同决定。2.**连接子的选择**:连接子在化学过程中、血浆循环以及产品储存过程中的稳定性非常关键。连接子的选择决定了抗体药物的DAR,并且连接子的稳定性影响着ADC的整体稳定性。3.**有效载荷的选择**:有效载荷对ADC的毒性和生物活性至关重要。选择具有高度细胞毒性且能在靶细胞内有效释放的有效载荷是必要的。同时,有效载荷及其代谢形式决定了ADC分子的毒性。4.**制剂配方的优化**:ADC的制剂配方需要考虑抗体、连接子和有效载荷的稳定性和特性。pH值、缓冲液、离子强度、表面活性剂和抗氧化剂等都可能影响ADC的稳定性。5.**避免聚集**:ADC的聚集倾向比单独的抗体更高,因此需要采取措施减少聚集,如使用非离子表面活性剂和优化冻干工艺。
酵母重组表达的PNGaseF(N-糖苷酶F)是一种用于蛋白质去糖基化实验的酰胺水解酶,具有以下特点以确保实验中的活性和稳定性:1.**高效性**:具有高比活性,例如750000U/mL,这有助于快速高效地进行去糖基化反应。2.**稳定性**:在含有50%甘油的储存缓冲液中,比较好的活性和稳定性可维持长达24个月。3.**使用条件**:可以在原生或变性条件下使用,对于变性条件下的去糖基化,建议添加NP-40以解除SDS的抑制作用。4.**储存条件**:建议在-15~-25℃保存,有效期1年。5.**酶活定义**:1个酶活力单位指在10μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10μg变性RNaseB中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。6.**操作简便**:提供了使用说明,包括变性和非变性条件下的蛋白质去糖基化步骤。7.**His标签**:产品带有His标签,便于在实验中进行纯化和检测。8.**纯度**:纯度达到95%以上,通过SDS-PAGE和完整ESI-MS进行确定。9.**快速反应**:有些产品如FastPNGaseF,可以在数分钟内完成彻底且无偏好性地去糖基化。10.**注意事项**:产品供科研使用,操作时应穿戴适当的实验室防护装备。遵循这些指导原则和产品说明,可以确保PNGaseF在实验中的活性和稳定性,从而获得可靠的去糖基化结果。Phusion DNA Polymerase 应在后面加入反应体系中,以避免其3'-5'外切酶活性降解引物。Recombinant Human SIRP alpha V6 Protein,His-Avi Tag
在基因编辑中,Pfu DNA Polymerase可以用于精确地引入特定位点的突变,或在基因组中插入特定的DNA序列。Recombinant Human DKK1 Protein,hFc Tag
酵母重组表达的N-糖苷酶F(PNGaseF)是一种酰胺水解酶,具有以下特点:1.**高效性**:PNGaseF是去除几乎所有N-连接寡糖从糖蛋白中有效的酶法方法。它能够在几分钟内快速且无偏倚地释放所有的N-糖链,适合后续的色谱或质谱分析。2.**重组酶**:该酶是重组的酰胺酶,能够从高甘露糖、杂合和复杂寡糖中切割内GlcNAc和天冬氨酸残基之间的连接。3.**纯度**:纯度达到95%以上,通过SDS-PAGE和完整ESI-MS进行确定。4.**储存稳定性**:在含有50%甘油的储存缓冲液中,好的活性和稳定性可维持长达24个月。5.**使用条件**:可以在原生或变性条件下使用,对于变性条件下的去糖基化,建议添加NP-40以解除SDS的抑制作用。6.**比活性**:具有高达100000U/mL的比活性。7.**His标签**:产品带有His标签,常用于抗体及其相关蛋白的完全去糖基化。8.储存条件:-25~-15℃保存,有效期1年。9.**无甘油版本**:还提供了无甘油版本的PNGaseF,这有助于在HPLC和质谱分析中获得结果。10.**酶活定义**:1个酶活力单位指在10μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10μg变性RNaseB中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。这些特点使得酵母重组表达的PNGaseF成为研究和分析糖蛋白糖链结构的重要工具。Recombinant Human DKK1 Protein,hFc Tag