改良CCD琼脂平板

时间:2024年11月05日 来源:

DCR培养基是一种用于植物组织培养的培养基,它支持植物细胞、组织的生长和发育。以下是DCR培养基的一些关键特点和配制方法:1.**配方组成**:-包含大量元素(如硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙等)、微量元素(如硼酸、硫酸锰、硫酸锌、硫酸铜、碘化钾等)、铁盐(如硫酸亚铁、EDTA二钠)和有机物(如盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、甘氨酸、肌醇)。2.**配制方法**:-称取培养基粉末1428.68mg/L,溶于1000ml蒸馏水或去离子水中。-加入1ml/L的1000×钙浓缩液。-使用NaOH或HCl调节pH至5.8-6.2。-115℃高压灭菌30分钟。3.**用途**:-主要用于植物组织培养,包括细胞、组织的生长和发育。4.**保存条件**:-2-8°C保存。5.**注意事项**:-避免吸入、摄入或皮肤接触。-配制过程中应严格按配方配制。-pH调节不宜过高或过低。-培养基灭菌后应进行无菌检查。6.**特别说明**:-不适宜制备高浓度母液,会有沉淀产生。DCR培养基的配方是完全定义的,不含动物衍生成分,从而减少了潜在的影响和免疫反应风险。这种培养基在植物组织培养中有着广泛的应用,尤其是在研究植物细胞重编程、干细胞和组织工程等领域。CAS培养基广泛应用于细菌铁载体的筛选试验,特别是在研究植物根际促生菌和微生物与植物相互作用的领域 。改良CCD琼脂平板

改良CCD琼脂平板,培养皿

滤膜肠球菌琼脂(FilterMembraneEnterococcusAgar)是一种用于分离和计数肠球菌的选择性培养基。它通常用于水或其他样品中肠球菌的滤膜法分离或计数。**特点**:1.**成分**:含有胰蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、磷酸氢二钾、叠氮化钠和2,3,5-三苯基四氮唑氯化物(TTC)等。其中,胰蛋白胨、葡萄糖和酵母浸粉提供碳源和氮源,叠氮化钠作为抑菌剂抑制非肠球菌生长,TTC作为显色剂使肠球菌菌落呈现红色。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),为肠球菌提供适宜的生长环境。3.**应用**:适用于水和污水中肠球菌的检测,也可用于食品样本中肠球菌的分离和计数。4.**配制方法**:称取培养基42g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,冷却至45-50℃时倾入无菌平皿,备用。无需高压灭菌。5.**结果观察**:肠球菌在滤膜肠球菌琼脂上通常形成红色菌落,便于识别和计数。滤膜肠球菌琼脂因其高选择性和特异性,是检测水和食品样本中肠球菌污染的重要工具。Vogel-Johnson琼脂培养皿TSFA是一种通用的营养培养基,用于各种微生物的培养,如细菌总数的测定,特别是适用于滤膜法细菌总数测定 。

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PALCAM琼脂基础(PalcamAgarBase)是一种用于分离单核细胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的选择性培养基。它的特点如下:1.**成分**:PALCAM琼脂基础包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、玉米淀粉、肉胃酶消化物、酵母膏粉、氯化钠、葡萄糖、甘露醇、柠檬酸铁铵、七叶苷、氯化锂、酚红和琼脂等成分。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),为李斯特氏菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**:氯化锂和抗生物质添加剂(如盐酸吖啶黄素、硫酸多粘菌素B和头孢他啶)能够抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌,从而提高对李斯特氏菌的选择性。4.**应用**:主要用于食品、水和污水样本中单核细胞增生李斯特氏菌的选择性分离培养。5.**配制方法**:通常称取71.9g培养基粉末,加入1升蒸馏水,加热至完全溶解,分装后进行高压灭菌。使用时,冷却至50℃,加入配套的添加剂,混匀后倾入无菌培养皿。6.**结果观察**:李斯特氏菌在PALCAM琼脂上生长时,会水解七叶苷生成黑色的6,7-二羟基香豆素,形成灰绿色菌落,中心凹陷,周围有黑色环。

肉浸液肉汤是一种基础的微生物培养基,其主要特点和制作方法如下:1.**成分**:肉浸液肉汤主要由绞碎牛肉、氯化钠、蛋白胨和磷酸氢二钾组成,再加上一定量的蒸馏水。具体配比为:绞碎牛肉500g、氯化钠5g、蛋白胨10g、磷酸氢二钾2g、蒸馏水1000mL。2.**制作方法**:首先将绞碎的去筋膜无油脂牛肉与蒸馏水混合后放冰箱过夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量。然后加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐,溶解后校正pH至7.4~7.6,煮沸并过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌30分钟。3.**用途**:肉浸液肉汤通常用于培养那些营养要求不是特别高的细菌,如溶血性链球菌及其他营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003中4.1G)。它提供了细菌生长所需的氮源、维生素和生长因子。4.**培养特征**:在肉浸液肉汤中,细菌可以很好地生长,通常表现为肉汤混浊,这是由于细菌的代谢活动导致的。5.**储存**:肉浸液肉汤的脱水培养基应避光储存于25℃下阴凉干燥处,开过封的脱水培养基应盖紧瓶盖注意密封储存。低温是降低细菌代谢的关键因素之一。常用的低温保存方法包括4℃冰箱保存、-20℃至-80℃的低温冰箱保存。

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锰盐营养琼脂(ManganeseNutrientAgar)是一种用于微生物培养的培养基,特别适用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验。以下是它的一些主要特点和用途:1.**成分**:通常包含硫酸锰、蛋白胨、牛肉粉、氯化钠和琼脂。其中,硫酸锰的含量为0.0308g/L,蛋白胨为10.0g/L,牛肉粉为3.0g/L,氯化钠为5.0g/L,琼脂为15.0g/L。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.3±0.1(25℃),为微生物提供适宜的生长环境。3.**用途**:主要用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验,也可用于芽孢杆菌或梭菌的培养和孢子的形成。4.**检验原理**:蛋白胨和牛肉粉提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂作为培养基的凝固剂;硫酸锰可促进芽孢的生成。5.**使用方法**:称取本品33.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,备用。需要注意的是,由于培养基中含有少量硫酸锰,灭菌后可能出现微量沉淀。6.**质量控制**:通过接种质控菌株,如短小芽孢杆菌CMCC(B)63202、枯草芽孢杆菌黑色变种ATCC9372等,放置于55℃需氧培养48小时,以验证培养基的性能。除了用于血液和无菌体液标本的细菌培养,血液增菌培养基还可用于动物性食品中致病菌的检测研究。麦康凯肌醇阿东醇羧苄青霉素琼脂(MIAC)预装培养皿

GC肉汤基础用于致病性奈瑟氏菌的分离,每100ml添加IsoVitaleX添加剂、V-C-N抑菌剂、无菌血红蛋白粉各1支 。改良CCD琼脂平板

使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。

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