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关闭真空。同样,溶液将被吸收到印迹架中,并且表面可能看起来干燥。重要提示:孵育10分钟后,再抽真空。11.向下压框架并施加真空。等待5至8秒钟,直到框架完全空了。真空运行连续添加30 mL洗涤缓冲液(对于MultiBlot为15 mL)。重复洗涤步骤3次(共3次)4次洗涤)。12.关闭真空,然后从框架上取下吸墨架。从污点固定器中取出污点,并与适当的检测试剂。如果使用了MultiBlot孔空白,则卸下并清洗。 扩展一级抗体孵育:一小时至过夜1.执行《通用议定书》的步骤1至5。2.加入2.5 mL(对于MultiBlot),5 mL(对于Mini blot)或10 mL(对于Midi blot)1X一抗(浓缩液)通常在标准免疫检测过程中使用)。3.用盖子盖住吸墨纸固定架。如果需要的话,将其从底座宝山区Merck细胞分析仪Merck仪器哪家优惠上海益启生物的样本制备仪询价公司电话。
疫检测对照,茴香霉素处理和PDGF处理的3T3小鼠成纤维细胞裂解液(10-0.63 ug)被转移到Immobilon8-P膜上。印迹被阻止补充有0.5%脱脂奶粉(NFDM)的Tris缓冲盐水含0.1%Tweeno 20表面活性剂(TBST),并用一级抗B-Tubulin进行探测(MAB3408)和次级HRP偶联的山羊蚂蚁(AP1 24P)在上述条件。将印迹暴露于X射线胶片一分钟。维护SNAP i.d.o 2.0系统清理去除协议每次使用时应清洁SNAP i.d.o 2.0系统。清理去除盐碱中的盐或污染物和管道,抽吸真空并通过系统冲洗散去的水。注:请勿对SNAP i.d.9 2.0系统进行高压灭菌。可以拆卸框架,并用中性清洁剂洗涤,然后用蒸馏水彻底冲洗。风干。要拆卸框架,请使用右侧的蓝色夹子调整框架的方
润湿印迹。,对于大多数应用和大多数抗体而言,0.5%的脱脂/低脂干奶溶液可以提供足够的膜的阻塞。注意:请勿使用浓度高于0. 5%的干奶,因为它可能会导致吸墨纸架堵塞膜。如果使用其他封闭溶液,请参阅表5了解兼容性和推荐浓度。●在洗涤,封闭和抗体缓冲液中始终使用0.1%Tween8 20表面活性剂。这将减少溶液的表面张力,并确保孵育过程中抗体在印迹支架中的均匀分布。●由于SNAP i.d. @ 2.0系统中的免疫检测时间很短,因此建议在开始操作之前应准备一抗和二抗稀释液。●MultiBlot固定器所需的稀释抗体的总体积为2.5 mL,Mini blot固定器为5 mL,10 mL用于Midi印迹固定器。,每次需要洗30次(MultiBlot为15毫升),以确保每次洗完后都能完全清洗印迹孵化步骤。关于细胞分析仪的询价电话。
养室培养室的面积为20x1.2毫米,陷阱高度为0.7,09.1.1。13.23和45um。带正蛋白标记的支持帖保持统一的高度入口功能和下表列出了每个培养单位的比较小/比较大狼数量。图1.平板配置BD04A板具有4个单独分别的单元[A-DI。每个都有5个进水口(1-5升细胞入口(8升细胞(6)。大出口井(7)。流动)每个通道的孔(A-D)的阻力都匹配处理相应的培养室。板已发货用PBS(磷酸盐缓冲盐水)溶液预涂,可以在实验之前,请先将其替换为所选择的缓冲液。盘子是给的只能使用一次。 细胞诱捕机制局限性该板与乙酸和有机溶剂(例如饼酮,乙醇和甲醇的命运应进行相容性测试在使用前与其他酸或有机溶剂一起使用。印版操作如果需要温度控制,请使用CellASICONIX2集成块XT(CAx2-MXT20]。请参阅Cel益启生物的细胞计数器怎么样?Merck手持细胞计数器Merck仪器
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utiBlot框架用于在MultiBlot框架中进行单点印迹时,放置正确处理一次印迹,然后空白卡在空井。未放入空白卡空井清洁不足确保框架**的所有系统垫片和阀门均处于院长,无碎屑或盐分。清空真空瓶,然后更换串联的Milx9-FA过滤器。可能由于以下原因堵塞了吸盘座:浓度在补充有缓冲剂的缓冲液中使用0.2-0.5%的干奶脱脂/低脂干0.1%Tweens 20表面活性剂,带有新的污点固定器。牛奶太高不兼容的封闭液使用新的吸盘固定器更换为强力封闭液。吸墨纸架的重复使用吸笔座只供一次性使用。请勿重复使用。低信号或低信号初级和/或次级将抗体浓度增加5到8倍。比标准抗体浓度过低免疫检测上下颠倒标记印迹的蛋白质一侧,并确保该污点检测试剂不敏感更换灵敏度更高的检测试剂,例如足够的Luminata用Forte杨浦区Merck微流控细胞芯片分析仪Merck仪器联系人
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