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2000年,王关林等从蜜蜂毒腺中提取总RNA,通过RT-PCR方法扩增得到了蜂毒肽前体蛋白的cDNA,再进一步通过定点诱变在蜂毒肽序列前引入了经胺裂解位点,构建了与β-半乳糖苷酶部分序列相融合的蜂毒肽诱变蛋白表达载体,序列分析结果表明,他们成功地引入了目的密码子,且与β-半乳糖苷酶部分序列构成正确的读码框,并在大肠杆菌中表达了诱变蛋白。
2001年,黄雪强等通过人白血病细胞观察蜂毒肽促凋亡的作用,结果发现对白血病细胞5mg/mL蜂毒肽作用4h与4μg/mL蜂毒肽作用24h都可见典型凋亡特征,进一步实验发现其诱导细胞凋亡同bcl-2基因表达***下降相关。 在室温下能很快干燥成白色或淡黄色晶体状。库存蜂毒厂商
六、谨防过敏
蜂毒含有大量的致过敏性物质,虽然对普通人而言不会出现严重的影响,但对过敏性体质者来说则极有可能出现过敏现象,严重时甚至可能危及生命,因此在使用蜂毒前一定要进行过敏性检测,另外肾功能衰竭、造血系统疾患、孕妇等人群为了确保安全也比较好不要使用蜂毒。
总结:蜂毒是蜜蜂自卫的“化学武器”,但事实上蜜蜂的毒性是非常弱的,除了过敏体质者外一般人被蜜蜂蛰后过1~2天便会痊愈,而且偶尔被蜜蜂蛰刺对健康反而有一定的好处,目前比较流行的蜂疗便来源于此。
高纯蜂毒比较便宜蜂毒肽(mPlilfin)是蜂毒的主要成分.约占蜂毒于重的 50%。
我国天然蜂毒主要采自意大利蜜蜂(Apis melliferaligustica),天然蜂毒是具有苦香气味的透明液体,在室温下很快就干燥至原来重量的30%~40%。蜂毒是一种成分十分复杂的混合物,经过各国学者几十年的研究,已知蜂毒含有多种生物活性物质,如蜂毒肽(melittin)、蜂毒明肽(apamin)、MCD肽(mast cell deganulatingpeptide)等。蜂毒肽是蜂毒的主成分,其重量占蜂毒干物质45%~50%。蜂毒肽具有很高的生物学作用和药理作用,其半数致死量(LD50)为4.0mg/kg,现代药理研究表明蜂毒肽具有***、镇痛、***血小板凝聚和抗**等作用。
1蜂毒肽的物理化学性质.
蜂毒肽由26个氨基酸组成,分子量为2480,其一级结构为
H-Gly-lle—Gly- -Ala- -Val- -Leu- -Lys-
_Val- -Leu- -Thr- -Thr- -Gly- Leu-Pro- -A1a-Leu- -lle- -Ser--Try- -e- -Lys-
-Ary- -Lys一Ary-Gln-NH2(GIGAVLKVLTTGLPALISWIKRKRQQ一-NH2。
蜂毒肽是一种不对称的线性多肽,***位至第20位的氨基酸是疏水基团,第21位至26位的氨基酸是亲水基团。蜂毒肽能降低水的表面张力,蜂毒肽的稀薄溶液作为单体存在,如在溶液中增加离子强度或蜂毒肽的浓度会产生不同程度的凝聚现象,直接生成疏水性四聚物。 由于蜂毒肽具有结构已知及膜活性的特点,现已成 为研究细胞作用机制,钙调蛋白作用机制的常用探针。
1991年,张青文开始提取了蜂王毒腺的RNA,用于棉铃虫卵中的转译,成功地合成了Promelittin,并对提取的mRNA成分进行了研究,结果发现总RNA在除去rRNA后就可得到高纯度的蜂毒肽mRNA。
1997年,李继周等通过mRNA-cDNA反转录的方法合成了蜂毒肽基因,用λgt11建立了蜂毒肽的cDNA文库,并用抗体探针筛选出能够表达蜂毒溶血肽的阳性克隆。 Benachir等利用钙黄绿素作为荧光标记物,系统研究了蜂毒肽诱导的膜渗漏。认为蜂毒肽与囊泡的结合会非常迅速,而且在蜂毒肽作用下,有的囊泡的内容物全部释放,而有的则保持完整。 蜂毒贮存在毒囊中的垫刺里,由蛰针排出。哈药六厂蜂毒商家
由于蜂毒来源丰富.作用广,功效大,因此蜂毒的药理作 用和***价值将会有一个广闷发展前景。库存蜂毒厂商
蜂毒是工蜂毒腺分泌出来的一种具有芳香气味的成分复杂的混合物,主要含有蛋白质多肽类、酶类、生物胺类和其他物质。蜂毒中研究较多的是蜂毒溶血肽,又称蜂毒肽(melittin)。蜂毒肽约占蜂毒干重的50%,也是蜂毒中具药理作用和生物学活性的主要组分。MLT呈强碱性,易溶于水,相对分子质量为2849,。2013年3月,美国科学家宣布,可以利用在蜂刺***中发现的化学物质毁灭**毒,防止**传播,但又不伤及周围正常细胞。
尤其是蜂毒肽可以抗对青霉素具有耐药性的金黄色葡萄球菌。蜂毒肽还能增强磺胺类和青霉素类***的***效力,对多种***、***也具0性。其对前列腺素合成酶的***作用是吲哚镁辛的70倍,镇痛强度为***的40%。实验研究证明,全蜂毒、蜂毒肽、神经毒多肽、MCD均能刺激垂体肾上腺系统使皮质***释放增加而产生***作用。蜂毒肽还能***白细胞转移. 库存蜂毒厂商
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