奉贤区默克离心浓缩管参数

Amicon® Pro纯化超滤管简明操作指南

亲和纯化

用于纯化GST•Tag，His•Tag等重组表达蛋白及抗体，适合～0.5 mL裂解液操作

6次低速离心，总耗时~100分钟（含65分钟孵育时间）

1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂（50%悬浊液）和1.5 mL漂洗缓冲液。

1,000×g离心1 min。

2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h，其间可温和搅动促进结合。

3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。

4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液，1,000×g离心1 min。 您了解 超滤浓缩管的优势吗？奉贤区默克离心浓缩管参数

超滤（UF）常用于分离溶液中极其微小的颗粒和不溶分子。虽然分离效果受到包括化学性质、电荷等多种因素影响，这种方法主要还是以分子大小为**基本的考虑。超滤膜截留1-1000kDa（MW）的分子，盐和水等小分子会透过，因此在大分子样品处理中得到了应用。胶状或微粒状物质也能够被截留。UF膜既可以用于透过样品也用于保留样品的纯化。样品***小于膜孔径，则经过膜处理可以达到除热源、澄清和与大分子污染物的分离的效果。如果目的分子远远大于膜孔径，膜处理则可以将小分子污染物去除而目的分子被浓缩。超滤方法相比沉淀法对于样品更温和，没有发生容易导致生物大分子失活的相变，而且在浓缩的同时可以完成对溶质的除盐。超滤的应用不限于蛋白样品的操作，也常用于核酸样品制备，包括分子克隆和质粒纯化。DNA和RNA样品起始浓度低至5ng/mL也可以被高效地在数分钟内被浓缩，回收率达到99%以上。常州超滤浓缩管哪家好超滤浓缩管的系列有很多种。

如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话，那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性（构象差异）而影响浓缩效果，建议选用上一分子量级别的超滤管（如原本选用30k，此时可以选择10k）。

2）如果目的样本也不在滤过液中，那么：

a）蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL？ b）用来确定样本浓度的方法是什么？是否可信？

c）目的蛋白是不是沉淀了？如果是的，具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。

外泌体的精制磁珠法富集精制外泌体：300μg样品（相当于300μg总蛋白）用含有5μg anti-CD63抗体的溶液稀释，与protein A/G磁珠共孵育1hr，漂洗后用0.2M glycine洗脱。如果要先将抗体偶联在磁珠上（以避免抗体洗脱下来对外泌体的干扰），请参考默克磁珠操作说明书。（Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3)）。推荐使用试剂目录号信息：cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。

默克已经建立了基于“微滤+超滤”的外泌体制备操作标准，相较于需要昂贵的设备及繁琐操作的超速密度梯度离心，用实验室常见的工具解决外泌体制备的高大上问题，真是惠而不费，不亦乐乎？ 上海超滤浓缩管批发商。

这是一种只用一步温和的离心完成渗滤而很大程度保持蛋白活性的好方法。

为了与下游应用兼容，常常需要用透析或渗滤方法对蛋白样品进行缓冲液置换。传统透析方法需要时间很长，多步透析容易造成样品丢失、损耗和失活，而且***还需要一步浓缩。新产品 Amicon® Pro 带来了突破性的革新，只需一步温和的渗滤操作即可达到同时对样品进行换液和浓缩的目的。

Amicon® Pro建立小量蛋白样品纯化-换液/ 脱盐-浓缩流程 新标准

操作步骤的优化与简化往往带来更好的结果，数据的稳定性、可比性和高通量化随之得以改

善，默克密理博新上市的Amicon® Pro纯化超滤管创造性地将纯化、换液、脱盐和浓缩操作融为一体，减少样品转移损失和人为操作的繁琐和误差，使蛋白样品的处理更加标准化，数据结果便于评估和比较。宝贵的小量样本从此有了比较好的操作工具。 上海超滤浓缩管哪家比较专业。长宁区默克0.5ml超滤浓缩管

超滤浓缩管的主要优势是什么。奉贤区默克离心浓缩管参数

样品的澄清、过滤和除菌

Ultrafree®-MC和Ultrafree®-CL微滤管

Ultrafree®-MC（0.5mL）和Ultrafree®-CL（2mL）是一次性使用的微滤离心管，可以用于各种水性样品和在某些溶剂中的样品除颗粒物、除沉淀的处理。提供两种体积及多种膜孔径以及已经经过无菌处理的产品供选择。Ultrafree®微滤离心管操作简便、样品回收率高且重复性很好，是蛋白和核酸样品处理的理想选择。

特点与优点

有0.1-5.0μm五种膜孔径供选择

采用高回收率的亲水Durapore® (PVDF)膜和亲水PTFE膜

提供无菌包装和非无菌包装形式产品

过滤速度快，数据稳定、重现性好

上样体积为0.5mL (MC)或2mL (CL)

配合1.5mL离心管固定转子(MC)或15mL离心管转子使用

顶盖颜色标识易于区分膜孔径 奉贤区默克离心浓缩管参数

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