Merck离心浓缩管参数

时间:2020年10月29日 来源:

首先,Amicon® Ultra超滤管的蛋白比较低起始浓度为25ug/ml。请确保样本的起始浓度大于这个浓度。其次,如果问题仍然出现,请不要丢弃样本滤过液以便用于分析可能的原因:

1)如果目的样本在滤过液中,那么请排查:

a)是否选择了合适截留分子量的超滤管(目的蛋白分子量的1/2或者1/3)?

b)使用的离心力是否是在限定范围内?如果使用的是rpm,请换算成相应的g离心力,具体换算方法请垂询。

c)离心机**近是否有校准过?

d)是否***尝试这个蛋白? 上海超滤浓缩管代理销售哪家好?Merck离心浓缩管参数

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 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(有5种截留分子量规格可选)。

6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。孵育5 min。

7. 4,000×g离心15 min。

8. 加上蛋白样品**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min,置换缓冲液的同时进行浓缩。

9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。

* 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管~1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法,但溶液体积和离心时间等需要略加优化。

用Protein A或G对抗体进行亲和纯化 常州Merck超滤浓缩管联系方式超滤浓缩管和其他的空压机有什么区别呢?

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截留

截留有时也称为排阻。水合程度、离子和空间位置效应会导致分子量相近

的分子表现非常不同的截留状态。许多生物大分子在不同的 pH 或离子强

度改变的情况下倾向于聚集或改变构象,因此其有效大小可能比 “天然”

分子大恨多,从而导致排阻增加。比如,有些蛋白质在某些缓冲液条件下

会发生多聚化,而另一些则发生解聚(如血红素蛋白)成亚基。这使选择

合适截留分子量的膜变得复杂。以默克密理博的经验,我们通常推荐选择

为目的分子大小一半的膜作为尝试的优先,再根据实际情况加以调整。

提供的超滤管是没有经过去内***处理的,同时由于内***通常以多聚体的形式存在,大小

在10-1000KD之间不等,在超滤的过程中是无法去除的。可在实验前通过先用0.5M NaOH预清洗,随后用Milli-Q®水/缓冲液清洗的步骤去除大部分内***。关于针对Amicon®,Microcon® , Centricon®尝试过的内***去除方案。

Amicon® Ultra超滤管使用的是再生纤维素膜,这种材质是蛋白吸附比较低的超滤膜。但是对于一些疏水性蛋白或非极性蛋白,它们和膜的非特异吸附可能会增强,对于这种情况,可以尝试在实验前对超滤管进行封闭处理。也可以尝试换成Amicon® Ultra 0.5或2来进行实验,通过减小膜面积来降低非特异性吸附。 上海超滤浓缩管哪家比较好?

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用超滤对分子进行分级

通过选定截留分子量的超滤操作能精确地将混在大分子中的小分子去

除的想法常常不切实际。事实上,膜的规格描述是基于截留而非通过

的性质。一项实验中,采用 100k NMWL 滤膜,大于 100kDa 的分子截

留率 >90%,但这时比膜孔径小的分子并不是完全自由地通过滤膜,

75kDa 的分子截留率为 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的

溶液中的各 种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实

践中,如果要分离两种大分子,它们之间的分子量差异应该达到 10 倍

以上,或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间,则可达到比较理想的

分离。如果蛋白溶液较为稀释,低压下操作也有助于达到更好的效果。 超滤浓缩管的优缺点您知道吗?虹口区超滤浓缩管代理商

你知道超滤浓缩管的用途吗?Merck离心浓缩管参数

默克密理博 Amicon® Ultra 离心式超滤管因其完美的设计

一经推出即成为生物样品操作的行业**产品。不论是蛋白、

核酸、***或颗粒物,抑或低浓度样品或宝贵的活性样品,

Amicon® Ultra 都能兼顾高回收率和操作的方便性及标准

化,并满足下游各种应用的要求,使研究者处理样品时倍感轻

松。

Amicon® Ultra 超滤管的独特优点:

有效浓缩同时保证比较高的蛋白回收率

合理的死体积设计

•避免样品离干而降低回收率

•便于估计和控制样品浓缩倍数

•重复性好,便于样品数据相互比较 Merck离心浓缩管参数

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