RNA深度测序诊断

高通量基因组测序中，什么是测序深度和覆盖度？测序深度是指测序得到的总碱基数与待测基因组大小的比值。假设一个基因大小为2M，测序深度为10X，那么获得的总数据量为20M。覆盖度是指测序获得的序列占整个基因组的比例。由于基因组中的高GC、重复序列等复杂结构的存在，测序终拼接组装获得的序列往往无法覆盖有所的区域，这部分没有获得的区域就称为Gap。例如一个细菌基因组测序，覆盖度是98%，那么还有2%的序列区域是没有通过测序获得的。传统Sanger测序相比，NGS技术的发展使得一个小的研究小组可以拥有大量病毒株的全基因组序列。RNA深度测序诊断

为了便于新发或罕见病毒性传染病的筛查检测,利用多重置换扩增技术,以负链RNA病毒—发热伴血小板减少综合征病毒和正链RNA病毒—登革病毒为模拟样本探索临床样本中RNA病毒基因组非特异性扩增方法。研究中通过梯度稀释的RNA病毒模拟样本中可能存在的不同丰度的病原体,样本核酸依次加工成单链cDNA,双链cDNA,T4DNA连接酶处理后的双链cDNA以及添加外源辅助RNA后合成并连接的双链cDNA形式,然后进行Phi29DNA聚合酶等温扩增,使用荧光定量PCR方法比较各种方法对RNA病毒核酸扩增的影响。四川病毒高通量测序诊断病毒全基因组测序具有的特点：无需培养和特异性扩增，对采集临床样本直接检测。

病毒（Virus）由一种核酸分子（DNA或RNA）与蛋白质（Protein）构成或由蛋白质构成（如朊病毒）。根据遗传物质的组成，可分为单链DNA病毒（ssDNA）、双链DNA病毒（dsDNA）、单链RNA病毒（ssRNA）、双链RNA病毒（dsRNA）和蛋白质病毒（如朊病毒）。根据宿主类型的不同，可以分为噬菌体（细菌病毒）、植物病毒（烟花叶病毒）和动物病毒（如禽流感病毒、天花病毒和HIV等）。病毒全基因组测序（VirusWholeGenomeSequencing，VWGS），是指基于第二代高通量测序技术，对病毒全基因组进行测序，利用生物信息分析手段，得到病毒的全基因组序列，解析编码信息，并获得相应的变异信息。

病毒基因组测序包括完成图测序、扫描图测序和重测序三个层面，通过二代/三代测序平台，获得病毒的基因组的序列信息，并在结构基因组学、比较基因组学层面通过差异分析、同源基因分析、共线性分析、物种进化分析等手段探究病毒的毒力系统、基因组的进化与演变历程等。对疑似传染标本采集提取后直接进行高通量测序，通过病原微生物数据库比对和智能化算法分析，获得疑似致病微生物种属信息，并提供全方面深入的报告，为疑难危重传染提供快速准确诊断依据，促进药物的合理应用。高通量测序能否定向检测细菌病毒等微生物?

    有哪些技术手段能实现对病毒的全基因组进行测序呢？早期在高通量测序技术普及之前，对病毒的全基因组进行测序是通过非特异性扩增+克隆结合sanger测序来完成的。当物种有了参考的序列之后，可以通过特异性扩增+sanger测序获得全基因组序列。Sanger测序准确度高，读长很长，但与此同时，扩增和克隆工作费时费力，由于流程繁琐，加上快速变异导致引物无法通用，该方法对于大量基因组的测序工作而言，可操作性不强，这对于研究者一直是一个困扰。高通量测序技术正式启用之后，研究者可以将样品处理至标准浓度和体积后进行测序和分析，减少了工作量，增加了成功率。探普生物进行了大量有针对性的研发和测试，开发了全套的实验和分析流程用于对病毒的全基因组进行测序，该流程自运行以来广受研究者们好评。 全基因组测序覆盖面广。二代测序突变分析多少钱

在探普生物长时间运行过程中，接触到的对病毒的全基因组进行测序的项目有比较丰富的应用场景。RNA深度测序诊断

上海探普生物科技有限公司的对病毒的全基因组进行测序有什么优势？全国开设病毒相关测序的公司不超过5家，只有探普生物是专门为病毒研究者服务的，探普生物的研发团队和实验团队都来自全国各地病毒学、微生物学专业的高校，硕士及以上学历成员超过60%，团队具备普通测序实验和分析基础之外，同时具备病毒学及微生物学的学术背景，相当了解病毒相关样本情况、研究方向等。研究者在项目咨询的时候就可以明显感觉到探普生物的专业性，沟通顺畅，省时省力。RNA深度测序诊断